間接免疫熒光
方案16.11 間接免疫熒光實驗方法原理固定細胞，順序加入一抗和二抗，通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片，置于合適的培養皿中。如 13 mm 蓋玻片可用24 孔板。2. 將培養皿置于 -20°C，10 min，再加入冷的固定劑（5 % 醋酸乙醇溶液（放在 -20°C ）），靜置 20 min 。3. 去除固定劑，在 D-PBSA 中洗蓋玻片，加入 1 ml 正常豬血清，室溫下放置 20 min。4. 用 D-PBSA 中淋洗蓋玻片，用吸水紙吸干，將蓋玻片翻轉，置于一滴 50 μl 已稀釋的一抗（用含10 % 的 FBS 培養液，按1：100~1：1000比例稀釋）上。5. 37°C 下放置 30 min 后，室溫 1~3 小時或 4°C 過夜，若在4°C 孵育，抗......閱讀全文
間接免疫熒光
方案16.11 間接免疫熒光實驗方法原理固定細胞，順序加入一抗和二抗，通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片，置于合適的培養皿中。如 1
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞，順序加入一抗和二抗，通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產生一抗種屬的二抗 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞，順序加入一抗和二抗，通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片，置于合適的培養皿中。如 13 mm 蓋玻片可用24 孔
間接免疫熒光
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理，使之與特異的抗原形成復合物，然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色，即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位，具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞
皮膚間接免疫熒光試驗
免疫熒光技術的原理是不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。間接免疫熒光試驗是將熒光素標記的抗體先與特異性抗體抗原復合物反應，形成抗原-抗體-抗抗體復合物體系。染色程序分為兩步，第一步：用未知未標記的抗體（待檢標本
免疫熒光染色（間接法）
1、切片固定后用毛細滴管吸取經適當稀釋的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的濕度，37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗兩次，10min，用吸水吸去或吹干余留的液體。?2、再滴加間接熒光抗體（如兔抗人 -球蛋白熒光抗體等），同上步驟，染色30min，37℃，緩沖鹽水
免疫熒光技術——間接法
實驗方法原理基本原理是先用特異性抗體與細胞內相應抗原結合，再用熒光素標記的二抗與特異性抗體相結合，形成抗原-特異性抗體-標記熒光抗體的復合物。因為在復合物上帶有比直接法更多的熒光標記物，所以比直接法更敏感。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBS伊文氏蘭儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定后，PBS洗滌3
間接免疫熒光法原理
間接免疫熒光試驗是用特異性抗體與標本中相應抗原反應后，再用熒光素標記的第二抗體（抗抗體）與抗原-抗體復合物中第一抗體結合，洗滌后在熒光顯微鏡下觀察特異性熒光，以檢測未知抗原或抗體。本法比直接法敏感度提高5-10倍，且一種熒光二抗可檢測多種抗原抗體系統，缺點是易產生非特異性熒光。
免疫學實驗間接免疫熒光試驗介紹
間接免疫熒光試驗介紹： 間接免疫熒光試驗是用對應某一種抗原的抗體(這里被稱為一抗)與細胞孵育結合，在采用對應一抗(也就是抗一抗)的抗體(這里被稱為二抗，二抗上偶聯有熒光素分子)與細胞孵育結合后在熒光顯微鏡下觀察。間接免疫熒光試驗正常值：
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同：直接免疫熒光的實驗方案通常較短，因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少，更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗，增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出，
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同：直接免疫熒光的實驗方案通常較短，因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少，更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗，增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出，
間接免疫熒光和直接免疫熒光染色方法的異同
免疫熒光細胞化學方法的原理是根據抗原抗體反應的規律，把已知的抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗原或抗體，然后以它作為探針來檢測組織或細胞內的相應物質。方法具體種類有直接法、間接法、夾心法和補體法等。在熒光顯微鏡下，根據其形成復合物所發的熒光，來確定判斷檢測物的來源、性質和部位。?1、直接法：這是最早
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同：直接免疫熒光的實驗方案通常較短，因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少，更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗，增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出，
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同：直接免疫熒光的實驗方案通常較短，因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少，更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗，增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出，
間接免疫熒光術的技術特點
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理，使之與特異的抗原形成復合物，然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色，即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位，具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞
間接免疫熒光試驗檢查過程
（1） 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，10min后棄去，使標本保持一定濕度。 （2） 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間(參考：30min)。 （3） 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS
活細胞間接免疫熒光法
一．實驗器材：1．??器材：40孔塑料板、40孔板離心機、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等2．??試劑：單抗隆抗體（單抗）、熒光標記抗鼠免疫球蛋白、PBS（pH7.2-7.4）、甘油、疊氮鈉（NaN3）等二．方法（微量法）1．??將分離好的單個核細胞用PBS洗2次，1000rpm每次10分鐘
免疫熒光技術熒光抗體染色方法介紹間接法
間接法是根據抗球蛋白試驗的原理,用熒光素標記抗球蛋白抗體(簡稱標記抗抗體)的方法(圖）。間接法的檢測過程分為兩步:第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中在37℃下保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體;第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、
間接免疫熒光法檢測自身抗體
??? 自身抗體診斷的標準技術是間接免疫熒光法，其特點是特異性強，陽性與陰性樣品的信號強度對比明顯，通過顯微鏡觀測能夠精確地判斷組織或細胞內熒光的分布。自身抗原的位置決定了其相應抗體的典型的熒光模式，所有與此典型模式不相關區域的染色被認為是非特異性染色。即使偶爾伴有強的非特異性染色，但弱的特異性信號
抗核抗體與間接免疫熒光技術
在自身免疫性疾病中，人體組織細胞細胞核的核膜、核內的染色質、非組蛋白，以及核糖核酸（RNA）和相關的蛋白質等都可成為自身免疫反應攻擊的靶子，產生抗核抗體（ANA）。其中有不少抗體因對疾病的診斷有高度的特異性，已成為診斷某一類疾病的血清標志性抗體，如抗雙鏈DNA抗體、抗Sm抗體之于SLE，抗SSB抗體
間接免疫熒光法檢測自身抗體
自身抗體診斷的標準技術是間接免疫熒光法，其特點是特異性強，陽性與陰性樣品的信號強度對比明顯，通過顯微鏡觀測能夠精確地判斷組織或細胞內熒光的分布。自身抗原的位置決定了其相應抗體的典型的熒光模式，所有與此典型模式不相關區域的染色被認為是非特異性染色。即使偶爾伴有強的非特異性染色，但弱的特異性信號也能夠被
皮膚間接免疫熒光試驗臨床意義
鑒別診斷皮膚間接免疫熒光試驗用以檢測患者血清中的某種特異抗體或自身抗體。 1.血清中各種抗微生物抗體的測定 如梅毒螺旋體、支原體、衣原體、立克次體、皰疹病毒等。 2.血清中各種自身抗體的測定 （1）系統性紅斑狼瘡、皮肌炎、硬皮病、類風濕關節炎、混合結締組織病、干燥綜合征等：有不同類型的抗
間接免疫熒光試驗的注意事項
檢查前： 抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食 物，避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。體檢前一天 的晚八時以后，應禁食，以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測。 檢查時： 應放松心情，避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難 不適宜人群：沒有
什么是直接免疫熒光法和間接免疫熒光法
免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體（或抗原）以化學的方法結合，將熒光標記抗體（或抗原）與標本中相應的抗原結合形成熒光標記的抗體- 抗原復合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在，根據已 知
什么是直接免疫熒光法和間接免疫熒光法
免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體（或抗原）以化學的方法結合，將熒光標記抗體（或抗原）與標本中相應的抗原結合形成熒光標記的抗體- 抗原復合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在，根據已 知
什么是直接免疫熒光法和間接免疫熒光法
免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體（或抗原）以化學的方法結合，將熒光標記抗體（或抗原）與標本中相應的抗原結合形成熒光標記的抗體- 抗原復合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在，根據已 知
關于瘧疾間接免疫熒光試驗的基本介紹
瘧疾的血清學診斷方法頗多，本節僅介紹常用的間接免疫熒光試驗法。 異常結果：熒光抗體法的陽性檢出率，一般均高于原蟲檢出率。對惡性瘧疾患者抗體效價為1∶80或更高，可認為是帶蟲者或近期感染瘧疾的標志。 需要檢查的人群：有明顯的寒戰、全身發抖、面色蒼白、口唇發紺、皮膚干熱、煩躁不安疲乏、頭疼、不適
免疫熒光組織（細胞）化學染色方法：間接法
一、原理與意義?免疫熒光組織（細胞）化學染色方法——間接法，是一種熒光抗體染色法。該方法只需制備一種熒光抗體可以檢出多種抗原，敏感性較高，操作方法較易掌握，而且能解決一些不易制備動物免疫血清的病原體（如麻疹）等的研究和檢查，所以已被廣泛應用于自身抗體和感染病人血清的試驗。?二、操作流程?（一）雙層法
間接免疫熒光法有哪些優缺點
優點：可直接看到細胞核，判斷疾病的方向缺點：培養熒光操作人員大約需要半年時間，成本高（需要熒光顯微鏡）；不能量化指標，周期長，半定量。
間接免疫熒光試驗定義和注意事項
間接免疫熒光試驗是用特異性抗體與標本中相應抗原反應后，再用熒光素標記的第二抗體（抗抗體）與抗原-抗體復合物中第一抗體結合，洗滌后在熒光顯微鏡下觀察特異性熒光，以檢測未知抗原或抗體。本法比直接法敏感度提高5-10倍，且一種熒光二抗可檢測多種抗原抗體系統，缺點是易產生非特異性熒光。 注意事項 檢