間接免疫熒光法檢測自身抗體
自身抗體診斷的標準技術是間接免疫熒光法,其特點是特異性強,陽性與陰性樣品的信號強度對比明顯,通過顯微鏡觀測能夠精確地判斷組織或細胞內熒光的分布。自身抗原的位置決定了其相應抗體的典型的熒光模式,所有與此典型模式不相關區域的染色被認為是非特異性染色。即使偶爾伴有強的非特異性染色,但弱的特異性信號也能夠被識別。間接免疫熒光法不需要復雜、費時的化學制備程序,而酶聯免疫吸附測定等實驗,要取得高特異性則必須提取和純化抗原,并將其吸附于固相載體上,如果抗原不純,則相關抗體會出現假陽性結果。 間接免疫熒光法保留了原基質的完整抗原譜,因而可同時檢測大量抗體.獲得較高的檢測效率。當抗幾種不同抗原的抗體需要在一種生物基質上同時檢測時(如抗細胞核抗原抗體),或為每一種實驗逐一準備抗原很困難或相當復雜時,就應該選擇免疫熒光法。另外,應用免疫熒光法還可檢測到一些至今未知的抗體。 在沒有熒光顯微鏡時,可嘗試用酶標記的第二抗體代替熒光標記的......閱讀全文
間接免疫熒光法檢測自身抗體
??? 自身抗體診斷的標準技術是間接免疫熒光法,其特點是特異性強,陽性與陰性樣品的信號強度對比明顯,通過顯微鏡觀測能夠精確地判斷組織或細胞內熒光的分布。自身抗原的位置決定了其相應抗體的典型的熒光模式,所有與此典型模式不相關區域的染色被認為是非特異性染色。即使偶爾伴有強的非特異性染色,但弱的特異性信號
間接免疫熒光法檢測自身抗體
自身抗體診斷的標準技術是間接免疫熒光法,其特點是特異性強,陽性與陰性樣品的信號強度對比明顯,通過顯微鏡觀測能夠精確地判斷組織或細胞內熒光的分布。自身抗原的位置決定了其相應抗體的典型的熒光模式,所有與此典型模式不相關區域的染色被認為是非特異性染色。即使偶爾伴有強的非特異性染色,但弱的特異性信號也能夠被
間接免疫熒光法原理
間接免疫熒光試驗是用特異性抗體與標本中相應抗原反應后,再用熒光素標記的第二抗體(抗抗體)與抗原-抗體復合物中第一抗體結合,洗滌后在熒光顯微鏡下觀察特異性熒光,以檢測未知抗原或抗體。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一種熒光二抗可檢測多種抗原抗體系統,缺點是易產生非特異性熒光。
自身免疫性肝病的自身抗體檢測
自身免疫性肝病是-類原因不明的慢性肝病,主要包括3種與自身免疫密切相關的,以肝、膽損傷為主的疾病:自身免疫性肝炎(AIH)、原發性膽汁性肝硬化(PBC)和原發性硬化性膽管炎(PSC)。自身免疫性肝病的診斷主要依靠病史、臨床表現、體征和實驗室檢查結果。每種自身免疫性肝病都具有特征性自身抗體譜,自身抗體
活細胞間接免疫熒光法
一.實驗器材:1.??器材:40孔塑料板、40孔板離心機、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等2.??試劑:單抗隆抗體(單抗)、熒光標記抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、疊氮鈉(NaN3)等二.方法(微量法)1.??將分離好的單個核細胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分鐘
自身免疫性肝病(AILD)與自身抗體檢測
自身免疫性肝病(AILD)是一組肝臟免疫耐受機制失衡引起的肝細胞或膽管上皮慢性損傷性炎癥疾病,根據其臨床表現、生化、免疫學、影像學和組織病理學特點,可分為以肝實質細胞進行性損傷為主的自身免疫性肝炎(AIH),以膽道系統受累為主的原發性膽汁性肝硬化(PBC)和原發性硬化型膽管炎(PSC)。自身免疫性肝
什么是直接免疫熒光法和間接免疫熒光法
免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體(或抗原)以化學的方法結合,將熒光標記抗體(或抗原)與標本中相應的抗原結合形成熒光標記的抗體- 抗原復合物,用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在,根據已 知
什么是直接免疫熒光法和間接免疫熒光法
免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體(或抗原)以化學的方法結合,將熒光標記抗體(或抗原)與標本中相應的抗原結合形成熒光標記的抗體- 抗原復合物,用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在,根據已 知
什么是直接免疫熒光法和間接免疫熒光法
免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體(或抗原)以化學的方法結合,將熒光標記抗體(或抗原)與標本中相應的抗原結合形成熒光標記的抗體- 抗原復合物,用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在,根據已 知
免疫學實驗自身免疫抗體檢測介紹
自身免疫抗體檢測介紹: 正常抗體具有自身免疫調節功能,產生極弱的自身抗體。病人由于免疫調控功能缺陷,導致機體對自身細胞抗原產生反應,表現為以細胞介導的細胞毒性作用和細胞表面特異性抗原與自身抗體結合而產生的免疫反應。 自身免疫抗體檢測正常值: 正常值呈陰性 自身免疫抗體檢測
免疫學實驗自身免疫抗體檢測介紹
自身免疫抗體檢測介紹: 正常抗體具有自身免疫調節功能,產生極弱的自身抗體。病人由于免疫調控功能缺陷,導致機體對自身細胞抗原產生反應,表現為以細胞介導的細胞毒性作用和細胞表面特異性抗原與自身抗體結合而產生的免疫反應。 自身免疫抗體檢測正常值: 正常值呈陰性 自身免疫抗體檢測臨床意義: 異
自身免疫性疾病實驗診斷的自身抗體檢測介紹
自身免疫性疾病的發生同自身抗體的產生密切相關,因此自身免疫性抗體的檢查對自身免疫疾病的診斷尤為重要。自身抗體檢查包括如下幾類。 1.抗核抗體譜 包括抗核抗體、抗DNA抗體、抗組蛋白抗體、抗非組蛋白抗體、抗核仁抗體、抗其他細胞成分抗體(如抗細胞質成分抗體、抗核包膜蛋白抗體、抗細胞周期抗原抗體等
間接免疫熒光法有哪些優缺點
優點:可直接看到細胞核,判斷疾病的方向缺點:培養熒光操作人員大約需要半年時間,成本高(需要熒光顯微鏡);不能量化指標,周期長,半定量。
間接免疫熒光法的操作步驟介紹
1、細胞準備與固定 (1)單層生長細胞:取對數生長細胞,用0.25%胰蛋白酶消化,制成單細胞懸液。將細胞接種到預先放置幾張6×22mm蓋玻片的培養瓶或培養皿中,置二氧化碳培養箱培養1-3天,待細胞接近長成單層,取出蓋玻片,進入PBS(0.01 mol/L,pH7.4)洗2次,然后根據實驗目的,
關于自身免疫抗體的實驗室檢測
從醫學檢驗到檢驗醫學,整個檢驗行業面貌一新,尤其是近年來相關政策的出臺以及檢驗新技術的涌現,共同推進檢驗醫學的進一步發展,我們也一直在不斷的改進中發現和解決問題。對于國內檢驗行業的進步,不論是新技術、新政策,工作在一線的使用者們是問題的發現者,也是最權威的發言人。因此,我們衷心希望“臨床在線”欄目能
自身免疫肝病相關抗體檢測的相關介紹
自身免疫肝病相關抗體檢測是指對引起自身免疫異常并導致肝臟疾病的自身抗體的檢測。自身免疫性肝病與病毒感染、藥物、遺傳等其他因素所致的肝病不同,是一組由于自身免疫異常導致的肝臟疾病,突出特點是血清中存在自身抗體,對診斷有相對特異性,常見的自身免疫肝病相關抗體有抗核抗體、抗線粒體抗體、抗平滑肌抗體等。
自身免疫肝病相關抗體檢測的檢查方法
多采用免疫印跡法進行自身免疫肝病相關抗體的檢測,將患者的血清樣本與檢測膜條溫育,如果樣本陽性,出現特異性抗體與相應抗原位點結合,再加入酶標記的抗人IgG進行第二步溫育,最后加底物可產生顏色反應。其檢查步驟為:稀釋待測血清;滴定已稀釋的血清至反應槽反應區,避免產生氣泡;溫育30分鐘,用洗滌液洗滌3
自身免疫抗體檢測的臨床意義
異常結果:自身免疫性抗體在不同類型肝功能異常患者血清中為陽性。血清自身抗體的檢測對診斷、鑒別、治療自身免疫性肝病與其他肝病具有一定的臨床意義。自身免疫抗體在不孕不育人群中有較高的發生率。觀測女性不孕不育癥與更多自身免疫抗體的關系,為免疫性不孕不育患者的診治提供依據。 需要檢查的人群:一般是肝病
自身免疫抗體檢測的注意事項
不合宜人群:無要求。 檢查前禁忌:早晨空腹檢測,因此一般禁忌進食后檢查。 檢查時要求:注意血清標本不被污染和按照醫生的安排去做。
自身免疫抗體檢測的檢查過程
研究對象取靜脈血2ml,分離血清,20℃保存待測。酶聯免疫吸附(ELISA)法。測定結果采用χ2檢驗。
什么是自身抗體和自身免疫性疾病
自身抗體是指針對自身組織、器官、細胞及細胞成分的抗體,分為天然自身抗體和病理性自身抗體。天然自身抗體存在于健康人和動物血清中,多為?IgM(即“免疫球蛋白M”)?型,主要識別細胞內的抗原、細胞膜或分泌成分,具有一定的生理功能(清除體內的死亡細胞碎片等),與自身抗原親和力低但具有廣泛的交叉反應性。病理
自身抗體檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用專家
三、《自身抗體檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用專家建議》十三條本《建議》可為廣大臨床醫生和檢驗醫師在日常診療實踐中擬定檢測項目及檢測流程時提供參考。自身抗體檢測的合理應用有賴于檢驗醫生和臨床醫生的共同合作。1、《建議》十三條2《建議》解讀?(1)對臨床懷疑有自身免疫性疾病的患者建議進行自身抗體的檢測
檢測抗體間接法操作步驟
間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下: ⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。 ⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗
間接免疫熒光抗核抗體檢測怎么看
看有熒光增強標記的地方。間接免疫熒光抗核抗體檢測技術是直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理,使之與特異的抗原形成復合物,然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色,即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位,具有熒光增強效應。間接免疫熒光法(IIF)這是進行抗核抗體、抗核仁抗體和抗胞漿抗體篩選檢測
自身抗體檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用專家(上)
自身抗體檢測是自身免疫性疾病診治中的重要工具,隨著早期診斷、規范化治療的開展,自身抗體檢測在疾病診斷、監測及預后評估中發揮的作用也日益受到重視。但是,由于目前自身抗體檢測缺乏統一的標準化檢驗方法,加上工作條件、傳統診療習慣、結果判讀以及醫療保險限制等方面的因素影響,導致自身抗體檢測在臨床應用上存在著
自身抗體檢測在自身免疫病中的臨床應用專家建議
自身免疫病是由于免疫功能紊亂,機體產生針對自身抗原的病理性免疫應答反應而引起器官或系統損傷的一類疾病。根據臨床表現和病變累及的范圍,自身免疫病可以分為系統性和器官特異性,前者以SLE、SSc、RA、APS等為代表;后者包括自身免疫性肝炎(AIH)、PBC、自身免疫性甲狀腺炎、胰島素依賴性糖尿病等。自
自身免疫性疾病新型自身抗體研究進展
自身免疫性疾病(autoimmune disease, AID)是指機體免疫系統對自身成分的免疫耐受被打破, 從而攻擊自身的器官、組織或細胞, 引起損傷而誘發的一類疾病。按受累器官組織的范圍將AID分為器官特異性AID和非器官特異性AID兩大類。器官特異性AID是指病變局限于某一特定器官或組織,
自身免疫性疾病新型自身抗體研究進展
? ? ?自身免疫性疾病(autoimmune disease, AID)是指機體免疫系統對自身成分的免疫耐受被打破, 從而攻擊自身的器官、組織或細胞, 引起損傷而誘發的一類疾病。按受累器官組織的范圍將AID分為器官特異性AID和非器官特異性AID兩大類。器官特異性AID是指病變局限于某一特定器官或
關于自身免疫抗體檢測的臨床意義介紹
正常抗體具有自身免疫調節功能,產生極弱的自身抗體。病人由于免疫調控功能缺陷,導致機體對自身細胞抗原產生反應,表現為以細胞介導的細胞毒性作用和細胞表面特異性抗原與自身抗體結合而產生的免疫反應。 一、自身免疫抗體檢測的臨床意義: 異常結果:自身免疫性抗體在不同類型肝功能異常患者血清中為陽性。血清
關于自身免疫肝病相關抗體檢測的檢查前準備
1.檢查前注意事項 (1)向患者解釋清楚檢驗目的、采血時間和注意事項。 (2)采血前患者應避免劇烈運動和勞動,一般要求患者休息15分鐘后進行采血,冬季應使患者暖和后保持血液循環通暢再采集,以保證檢測結果的準確性。 (3)根據具體情況,盡量避免藥物干擾。 2.標本采集 采集靜脈血,用離心