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  • 蛋白質及蛋白質含量測定的幾種方法

    蛋白質是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。蛋白質主要用于維持、生長、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白質含量的檢測成為一項日常性且必需性的工作。 蛋白質含量測定的幾種方法 1紫外分光光度法 蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范圍內,蛋白質溶液的吸光值與其濃度成正比,可作定量測定。該法操作簡單、快捷,并且測定的樣品可以回收,低濃度鹽類不干擾測定結果,故在蛋白質和酶的生化制備中廣泛被采用。但此方法存在以下缺點: 1.當待測的蛋白質中酪氨酸和色氨酸殘基含量差別較大會產生一定的誤差,故該法適用于測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的樣品。 2.若樣品中含有其他在280nm吸收的物質如核酸等化合物,就會出現較大的干擾。但核酸的吸收高峰在260nm,因此分別測定280nm和260nm兩處的光吸收值,通過計算可以適當的消除核酸對于測......閱讀全文

    蛋白質及蛋白質含量測定的幾種方法

       蛋白質是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。蛋白質主要用于維持、生長、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白質含量的檢測成為一項日常性且必需性的工作。    蛋白質含量測定的幾種方法   1紫外分光光度法   蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具

    蛋白質及蛋白質含量測定的幾種方法

    蛋白質是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。蛋白質主要用于維持、生長、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白質含量的檢測成為一項日常性且必需性的工作。 蛋白質含量測定的幾種方法? 1紫外分光光度法 蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范圍內,蛋白質溶

    幾種蛋白質含量測定方法的差異化比較

      蛋白質測定有很多種方法,如標準方法中規定的凱氏定氮法,就是蛋白質含量的經典測定方法,另外還有根據這一原理發展而來的蛋白質測定儀,是蛋白質含量測定最常用的儀器之一。另外,還有微波消解法,比色法等等,都是測定蛋白質含量的非常好的方法。下面我們就具體實踐過程中得到的蛋白質含量測定方法的結果,來作一比較

    幾種蛋白質濃度測定方法

    一、Bradford法蛋白質與考馬斯亮蘭染料結合生成藍色物質,藍色物質的量與蛋白質濃度的高低成正比。生成的藍色物質在595nm處有最大光吸收,通過測定595nm的光吸收,來測定蛋白質濃度。實驗中一般利用牛血清白蛋白(BSA)來作標準曲線,此法的靈敏度為25~200ug/ml。甘油、吐溫(tween)

    蛋白質含量的測定方法(一)

    實驗原理:蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bradford法

    蛋白質含量的測定方法(三)

    (二)Bradford法的優缺點1、Bradford法的突出優點是:(1)靈敏度高,據估計比Lowry法約高四倍,其最低蛋白質檢測量可達1g。這是因為蛋白質與染料結合后產生的顏色變化很大,蛋白質-染料復合物有更高的消光系數,因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比Lowry法要大的多。(2)測定快速、簡便,

    蛋白質含量的測定方法(二)

    (二)試劑與器材1.試劑(1)試劑甲:(A) 10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。(B) 0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。(2)試劑乙

    蛋白質含量測定

    應該是問蛋白質含量測定的方法吧。方法有以下幾種:1、直接測定UV法。2、凱氏定氮法。3、雙縮脲法。4、酚試劑法。5、紫外吸收法。6、BCA法。7、Lowry法。8、考馬斯亮藍法。9、Bradford法測定試劑盒。蛋白質含量增高,常見于多發性骨髓瘤患者,主要是異常球蛋白增加;血漿濃縮也可使蛋白質含量增

    蛋白質含量測定的操作方法

    衡量食品的營養成分時,要測定蛋白質含量,但由于蛋白質組成及其性質的復雜性,在食品分析中,通常用食品的總氮量表示,蛋白質是食品含氮物質的主要形式,每一蛋白質都有其恒定的含氮量,用實驗方法求得某樣品中的含氮量后,通過一定的換算系數。即可計算該樣品的蛋白質含量。?一般食品蛋白質含氮量為l0%如肉、蛋、豌豆

    蛋白質含量的測定方法有哪些

    蛋白質含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。1、微量凱氏定氮法:含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸銨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。2、雙縮脲法:雙縮脲是兩個分子

    測定蛋白質含量的方法有哪些

    1、凱氏定氮法凱氏定氮法是由丹麥化學家凱道爾于1833年建立的,現已發展為常量、微量、平微量凱氏定氮法以及自動定氮儀法等,是分析有機化合物含氮量的常用方法。凱氏定氮法的理論基礎是蛋白質中的含氮量通常占其總質量的16%左右,因此,通過測定物質中的含氮量便可估算出物質中的總蛋白質含量(假設測定物質中的氮

    知識分享:蛋白質含量的測定方法

      實驗原理:   蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bra

    蛋白質含量的測定方法有哪些

    蛋白質含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。1、微量凱氏定氮法:含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸銨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。2、雙縮脲法:雙縮脲是兩個分子

    蛋白質含量的測定

    衡量食品的營養成分時,要測定蛋白質含量,但由于蛋白質組成及其性質的復雜性,在食品分析中,通常用食品的總氮量表示,蛋白質是食品含氮物質的主要形式,每一蛋白質都有其恒定的含氮量,用實驗方法求得某樣品中的含氮量后,通過一定的換算系數。即可計算該樣品的蛋白質含量。??? 一般食品蛋白質含氮量為l0%如肉、蛋

    蛋白質含量的測定

    衡量食品的營養成分時,要測定蛋白質含量,但由于蛋白質組成及其性質的復雜性,在食品分析中,通常用食品的總氮量表示,蛋白質是食品含氮物質的主要形式,每一蛋白質都有其恒定的含氮量,用實驗方法求得某樣品中的含氮量后,通過一定的換算系數。即可計算該樣品的蛋白質含量。一般食品蛋白質含氮量為l0%如肉、蛋、豌豆、

    常用的測定蛋白質含量方法的比較

    ? ?蛋白質定量是生物化學、食品檢驗和其它生命學科zui常涉及的分析內容,是臨床診斷的重要指標,也是許多生物制品、藥物、食品質量檢測的重要指標。生化實驗中,在對生化藥品,特別是蛋白質、酶、某些多肽或蛋白質激素的分離純化時,對蛋白質進行準確可靠的定量分析是非常重要的。??????? 紫外分光光度法是根

    蛋白質含量的測定方法及常見注意事項匯總!

      蛋白質含量是實驗室的基礎性操作,衡量食品的營養成分時,要測定蛋白質含量,但由于蛋白質組成及其性質的復雜性,在食品分析中,通常用食品的總氮量表示,蛋白質是食品含氮物質的主要形式,每一蛋白質都有其恒定的含氮量,用實驗方法求得某樣品中的含氮量后,通過一定的換算系數。即可計算該樣品的蛋白質含量。   一

    蛋白質含量測定實驗

    實驗材料?蛋白質試劑、試劑盒?牛血清NaCl考馬斯亮藍儀器、耗材?分光光度計離心機實驗步驟 ? 分別在兩組微量離心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl補足至100 μl,同時以兩管100 μl 的0.15 mmol/l NaCl作空白對照。2.? 每管各加

    蛋白質含量測定實驗

    Bradford法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒

    蛋白質含量測定實驗

    folin—酚試劑法 考馬斯亮藍法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(

    蛋白質含量測定的基本方法有哪些

    pro的測定方法分為兩大類:一類是利用pro的共性,即含氮量,肽鏈和折射率測定pro含量,另一類是利用蛋白質中特定氨基酸殘基、酸、堿性基團和芳香基團測定pro含量。但是食品種類很多,食品中pro含量又不同,特別是其他成分,如碳水化合物,脂肪和維生素的干擾成分很多,因此pro的測定通常利用經典的剴氏定

    常用的蛋白質含量測定方法有哪些

     ①凱氏定氮法  原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。  ②雙縮脲法  原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形

    常用的蛋白質含量測定方法有哪些

     ①凱氏定氮法  原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。  ②雙縮脲法  原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形

    常用的蛋白質含量測定方法有哪些

     ①凱氏定氮法  原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。  ②雙縮脲法  原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形

    常用的蛋白質含量測定方法有哪些

     ①凱氏定氮法  原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。  ②雙縮脲法  原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形

    測定蛋白質含量的6種方法

    一、微量凱氏(kjeldahl)定氮法樣品與濃硫酸共熱。含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。若以甘氨酸為例,其反應式如下:NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S

    沉淀蛋白質的幾種方法及應用實例

    1.鹽析法——多用于各種蛋白質和酶的分離純化在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出,這種方法稱為鹽析.常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等.各種蛋白質鹽析時所需的鹽濃度及pH不同,故可用于對混和蛋白質組分的分離.例如用半飽和的硫酸銨來沉淀出血清中的球蛋白,飽和硫酸銨可以使

    蛋白質含量的測定實驗

    實驗方法原理 FOLIN 酚法所用的試劑有兩部分組成。試劑甲可與蛋白質中的肽鍵起顯色反應, 試劑乙在堿性條件下極不穩定, 易被酚類化合物還原成藍色(蛋白質中的酚基將磷鉬酸-磷鎢酸還原成藍色復合物)。在一定條件下, 藍色強度與蛋白質的量成正比, 范圍約在25~250 μg/ ml 蛋白質濃

    蛋白質含量的測定實驗

    FOLIN酚法 考馬斯亮藍法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 FOLIN 酚法所用的試劑有兩部分組成。試劑甲可與蛋白質中的肽鍵起顯色反應, 試劑乙在堿性條件下極

    蛋白質印跡法的測定蛋白質含量

    1、制作標準曲線(1 )從-20℃取出1mg/ml?BSA,室溫融化后,備用。(2) 取18個1.5ml離心管,3個一組,分別標記為0μg,2.5μg,5.0μg,10.0μg,20.0μg,40.0μg。(3 )按下表在各管中加入各種試劑。0μg2.5μg5.0μg10.0μg20.0μg40.0

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