RAPD操作要點
一、 材料 不同來源的DNA(50ng/ul)。 二、設備 PCR儀,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,電泳裝置。 三、試劑 1、隨機引物(10mer) (5umol/L):購買成品。 2、Taq酶:購買成品。 3、10xPCR 緩沖液:配方見第八章。 4、MgCl2 :25mmol/L。 5、dNTP:每種2.5mmol/L。 四、操作步驟: 1. 在25ul反應體系中,加入 模板DNA 1ul (50ng) 隨機引物 1ul (約5pmol) 10xPCR Buffer 2.5ul MgCl2 2ul dNTP 2ul Taq酶 1單位(U) 加ddH2O ......閱讀全文
RAPD操作要點
一、 材料 不同來源的DNA(50ng/ul)。? 二、設備? PCR儀,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,電泳裝置。? 三、試劑? 1、隨機引物(10mer) (5umol/L):購買成品。? 2、Taq酶:購買成品。? 3、10xPCR 緩沖液:配方見第八章。 4
RAPD分析的原理及操作技術
1 目的分子標記是一類建立在分子水平上的遺傳標記,它同樣具有遺傳標記的兩個特點,即可遺傳性和可識別性。廣義的分子標記包括同工酶和DNA分子標記兩類,狹義的分子標記則僅指后者。DNA分子標記通常是一些小分子量的DNA片段(幾十到2000bp左右),它們大量存在于真核生物的基因組內,能夠通過特定的技術和
RAPD
一、 材料 不同來源的DNA(50ng/ul)。二、設備 PCR儀,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,電泳裝置。三、試劑 1、隨機引物(10mer) (5umol/L):購買成品。 2、Taq酶:購買成品。 3、10xPCR 緩沖液:配方見第八章。 4、MgCl2 :25
RFLP和RAPD技術原理和操作步驟
原理:DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基因組的限制性內切酶的酶切位點
RAPD分子標記的實驗原理及操作流程
RAPD標記RAPD技術的全稱是隨機擴增多態性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA),此技術建立于PCR基礎之上,使用一系列具有10個左右堿基的單鏈隨機引物,對基因組的DNA全部進行PCR擴增,以檢測多態性。由于整個基因組存在眾多反向重復序列,因此須對每一隨機
RAPD技術
實驗概要RAPD(Random ?Amplified Polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA)是建立于PCR實驗基礎上的檢測基因組DNA多態性的實驗技術。從1990年Williams首次應用該技術到今,短短幾年間,該技術由于具有快速、簡便、耗資相對較少,所需設備較少的特點,因此發展
RFLP操作要點
RFLP操作要點 ? 一、 材料? 基因組DNA(大于50kb,分別來自不同的材料)。? 二、設備? 電泳儀及電泳槽, 照相用塑料盆5只,玻璃或塑料板(比膠塊略大) 4塊,吸水紙若干,尼龍膜(依膠大小而定),濾紙 ,eppendorf管(0.5ml)若干。? 三、試劑:? 1、限制性內
ELISA操作要點
ELISA操作要點:1; 顯色? 顯色是ELISA中的最后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。
ELISA操作要點
1 標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑
ELISA操作要點
優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。 1 標本的采取和保存 可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。
ELISA操作要點(一)
1 標本的采取和保存 可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝
ELISA操作要點(二)
6 顯色和比色 (1) 顯色顯色是ELISA中的最后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。定性測
ELISA的操作要點
優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規定操
ELISA技術操作要點
優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規定操
箱式馬弗爐操作要點
箱式馬弗爐操作需要:1、*高溫度1200℃、1300℃或1400℃2、5面加熱確保良好的溫度分布3、安裝在支承管上的加熱元件自由輻射熱量,使用壽命長久4、爐底SiC板保護底部加熱,并提供平穩的堆垛支墊5、LH爐型:采用多層次的無纖維輕質耐火磚保溫結構和特殊的絕熱設計6、LF爐型:**的纖維保溫結構和
高溫電爐操作要點
高溫電爐是國家標準節能型周期作業電爐,主要供合金鋼制品、各種金屬機件正火、淬火、退火等熱處理之用,或金剛石等切割刀片進行高溫燒結用途。?以下是關于高溫電爐操作要點的簡單介紹,我們一起來了解一下;高溫電爐是國家標準節能型周期作業電爐,主要供合金鋼制品、各種金屬機件正火、淬火、退火等熱處理之用,或金剛石
高溫電爐操作要點
高溫電爐是標準節能型周期作業電爐,主要供合金鋼制品、各種金屬機件正火、淬火、退火等熱處理之用,或金剛石等切割刀片進行高溫燒結用途。高溫電爐的使用是近幾年來,采納電子調溫裝配的高溫電爐、箱式高溫爐、箱式氣氛爐等高溫電爐適用于企業、農業、實驗室加熱用。表面采用靜電噴塑工藝、表面別致、堅固耐用的優點已愈來
ELISA操作要點(一)
優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。1 標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均
ELISA操作要點(二)
6 顯色和比色6.1 顯色 顯色是ELISA中的最后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。定性
清潔灌腸操作要點
? 清潔灌腸是用0.1~0.2%肥皂水500~1000ml通過**,自肛管經直腸緩緩地灌入結腸,幫助病人排出糞便和積存的氣體,以防止因麻醉后**括約肌松弛而使大便污染手術臺,增加感染機會,同時可減輕術后腹脹。??? 操作方法??? 取NS500ml常規消毒后插入一次性輸液器,去掉無菌針頭;取一次性吸
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
RAPD標記技術
實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly ?amplifiled polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上,它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體)
RFLP和RAPD技術
RFLP和RAPD技術概 述? DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
植物RAPD分析技術
RAPD(Randomly Amplified Polymorphic?DNA),意為隨機擴增多態性DNA,是利用PCR技術進行隨機擴增,把擴增的DNA片段進行瓊脂糖凝膠電泳,根據DNA條帶的多態性來反應模板DNA序列上的多態性。RAPD同AFLP、SSR等分子標記一樣都基于PCR擴增,只是RAPD
RAPD分析技術2
(2)擴增結果差,條帶模糊或難以辨認。――更換Taq聚合酶緩沖液。――檢查引物(使用另外一個引物,或者將引物末端標記,在 16% 6mol/L尿素聚丙烯酰胺膠上電泳檢測)。――檢查Taq聚合酶活性(與不同批量的酶作比較)。――改變DNA濃度。(3)高相對分子質量產物彌散狀分布>4kb。――降低DNA
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為 RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的
RAPD分析技術1
1 導論聚合酶鏈式反應(PCR)以其優越性極大地影響到了分子生物學的幾乎所有領域,并以其基本程序和DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis),開發出多種檢測核苷酸變異的方法。 RAPD(Random Amplifed Polymorphic D
ELISA技術的操作要點
優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規定操
薄層層析操作要點
鋪板鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀:過稠,板容易出現拖動或停頓造成的層紋;過稀,水蒸發后,板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G:水=1:2~3,硅膠G:羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時間,根據經驗來定,與空氣濕度有關,一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷,越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑