乳過氧化物酶法（LPO）
本法反應溫和，對抗原、抗體免疫活性影響小，已被廣泛應用。缺點是標記率較低，一般為20～40%。 1．原理此法是利用乳過氧化物酶（Lactoperoxidase）有促進微量過氧化氫對125I-的氧化作用，生成125I+，并標記在多肽、蛋白質酪氨酸分子上。 2．方法以標記蛋白質抗原為例。 （1）反應液組成：蛋白質2～5μg溶于磷酸緩沖液10～25μl中，加入Na125i 1m Ci(10μl)、乳過氧化物酶溶液25ng(10μl)、H2O2200ng(10μl)； （2）在室溫保溫7min； （3）加入H2O2200ng(10μl)； （4）過7min再加入H2O2(3μl)； （5）保溫7min后，加入0.5ml、10mmol/L巰基乙醇以停止反應； （6）10min后加入NaI載體溶液1ml ； （7）按常規方法分離純化。 3．注意事項 （1）LPO質量好壞，可直接影響標記率，LPO應在使用前新鮮配制，......閱讀全文
乳過氧化物酶法（LPO）
本法反應溫和，對抗原、抗體免疫活性影響小，已被廣泛應用。缺點是標記率較低，一般為20～40%。 1．原理此法是利用乳過氧化物酶（Lactoperoxidase）有促進微量過氧化氫對125I-的氧化作用，生成125I+，并標記在多肽、蛋白質酪氨酸分子上。 2．方法以標記蛋白質抗原為例。 （1
簡述TMB－法檢測乳過氧化物酶
TMB 因其安全性和較高的敏感性，正逐步取代有致癌性的ABTS 顯色劑用于LP 的檢測中。TMB檢測法的原理是在過氧化物酶存在條件下，TMB 能被過氧化氫氧化生成明亮的藍色物質，已知該有色物質于波長655 nm 下有最大吸收峰。根據顏色的深淺，借助分光光度計，測定反應的吸光度，進而換算待測樣的酶
關于ABTS－法檢測乳過氧化物酶的介紹
ABTS 主要用來測量和表征抗氧化劑抗氧化能力，是近些年興起的一種相對簡便的用于體外測定物質總抗氧化能力的方法。最初由Marklund 提出，用含有蛋白質的血紅素過氧化物酶與ABTS 反應生成ABTS+，用于測定樣品中血紅蛋白的含量，目前已廣泛應用于包括血清類的生物樣品、果蔬類和一些純物質抗氧化
愈創木酚法檢測乳過氧化物酶的介紹
愈創木酚檢測方法的原理，在LP 催化作用下，過氧化氫氧化愈創木酚，產物為醌類化合物，此化合物可進一步縮合或與其他分子縮合，生成紅棕色的4 -鄰甲氧基苯酚。利用愈創木酚檢測方法測定LP 時要求嚴格控制時間，檢測過程中用酸終止酶促反應，導致試驗結果明顯偏低。
乳過氧化物酶的檢測
鑒于其重要的應用價值，因此測定LP 活性尤為重要。目前，國內外有關LP 檢測方法的研究較多，大多是基于顏色反應，利用酶促反應原理，借助分光光度計測定酶活大小 。苯胺類檢測LP 活性以苯胺類為底物測定過氧化物酶活性，其原理為在過氧化物酶存在時，H2O2 可使苯胺發生氧化聚合反應，產物為棕褐色物質。該物
乳過氧化物酶的檢測
鑒于其重要的應用價值，因此測定LP 活性尤為重要。目前，國內外有關LP 檢測方法的研究較多，大多是基于顏色反應，利用酶促反應原理，借助分光光度計測定酶活大小。苯胺類檢測LP 活性以苯胺類為底物測定過氧化物酶活性，其原理為在過氧化物酶存在時，H2O2 可使苯胺發生氧化聚合反應，產物為棕褐色物質。該物質
乳過氧化物酶的結構特點
LP是由一條多膚鏈構成的,包括612個氨基酸殘基,分子量大約是78kD,等電點為9.6,是一種堿性蛋白,也是一種糖蛋白。它含有一個血紅素和大約10%的碳水化合物,其催化活性中心的血紅素是一個原葉琳ix,通過一個酷鍵共價連接到多膚鏈上構成的。LP中鐵含量是0.07%,鐵是血紅素的一部分,每個LP分子對
乳過氧化物酶的組成成分
所謂LPS必須同時包括3種組成成分,即乳過氧化物酶,硫氰酸鹽和過氧化氫。只有這三種成分共同作用才具有抗菌活性。在實際應用中,若體系中的某一組分濃度不夠時,則需要添加外源或設法生成,以保證抗菌效果,這就是LPS的“激活”。其中,乳過氧化物酶的濃度不低于0.02 U/mL。牛乳中天然的LP的濃度為1.4
乳過氧化物酶的基本結構
LP是由一條多膚鏈構成的,包括612個氨基酸殘基,分子量大約是78kD,等電點為9.6,是一種堿性蛋白,也是一種糖蛋白。它含有一個血紅素和大約10%的碳水化合物,其催化活性中心的血紅素是一個原葉琳ix,通過一個酷鍵共價連接到多膚鏈上構成的。LP中鐵含量是0.07%,鐵是血紅素的一部分,每個LP分子對
關于乳過氧化物酶的簡介
乳過氧化物酶(Lactoperoxidase，EC 1.11.1.7，簡稱LP)是存在于乳汁中的一種血紅素蛋白，是一種來自動物的過氧化物酶，在初乳中含量尤其豐富。乳過氧化物酶和過氧化氫以及硫氰酸根(SCN)可以形成“乳過氧化物酶體系(LPS)”。這個酶系統具有抑菌活性，可以在沒有冷藏的條件下，抑
乳過氧化物酶的濃度及活性
在牛乳中,LP是僅次于黃嚓吟氧化酶第二豐富的酶,它在乳中的濃度大約是30mg/L。有報道,LP含量的改變與牛的生殖周期、季節、品種和喂養制度有關,需要注意,不像其它抗菌蛋白,LP的含量在牛初乳中是較低的,但在產后3~5天LP含量迅速增加以達到最大值。不同來源乳中的LP的活性不同，可以看到牛乳中LP的
乳過氧化物酶的理化性質
存在于乳腺、淚腺、唾液腺中的LP在化學上和免疫學上的性質都是類似的。LP參與抑制微生物生長首先被Hanssen提出,他指出LP參與構成宿主對抗入侵微生物的天然防御系統。除此之外,LP還具有抗菌活性、降解各種致癌物質以及保護動物細胞被過氧化的能力。LP是乳中熱穩定性的酶之一,它的破壞已經被作為巴氏滅菌
乳過氧化物酶的基本信息
乳過氧化物酶(Lactoperoxidase，EC 1.11.1.7，簡稱LP)是存在于乳汁中的一種血紅素蛋白，是一種來自動物的過氧化物酶，在初乳中含量尤其豐富。乳過氧化物酶和過氧化氫以及硫氰酸根(SCN)可以形成“乳過氧化物酶體系(LPS)”。這個酶系統具有抑菌活性，可以在沒有冷藏的條件下，抑制革
關于乳過氧化物酶的結構介紹
LP是由一條多膚鏈構成的,包括612個氨基酸殘基,分子量大約是78kD,等電點為9.6,是一種堿性蛋白,也是一種糖蛋白。它含有一個血紅素和大約10%的碳水化合物,其催化活性中心的血紅素是一個原葉琳ix,通過一個酷鍵共價連接到多膚鏈上構成的。LP中鐵含量是0.07%,鐵是血紅素的一部分,每個LP分
乳過氧化物酶的理化性質
存在于乳腺、淚腺、唾液腺中的LP在化學上和免疫學上的性質都是類似的。LP參與抑制微生物生長首先被Hanssen提出,他指出LP參與構成宿主對抗入侵微生物的天然防御系統。除此之外,LP還具有抗菌活性、降解各種致癌物質以及保護動物細胞被過氧化的能力。LP是乳中熱穩定性的酶之一,它的破壞已經被作為巴氏滅菌
乳過氧化物酶的基本信息
乳過氧化物酶(Lactoperoxidase，EC 1.11.1.7，簡稱LP)是存在于乳汁中的一種血紅素蛋白，是一種來自動物的過氧化物酶，在初乳中含量尤其豐富。乳過氧化物酶和過氧化氫以及硫氰酸根(SCN)可以形成“乳過氧化物酶體系(LPS)”。這個酶系統具有抑菌活性，可以在沒有冷藏的條件下，抑制革
乳過氧化物酶的主要功用
LPS的抗菌性是表現在對乳中一些微生物具有抑菌或殺菌作用其抗菌機理是微生物細胞質膜上的琉基基團被氧化,導致細胞質膜結構破壞,鉀離子、氨基酸和多膚泄露,使細胞對葡萄糖、氨基酸、漂吟、嚓陡的攝取以及蛋白質、DNA和RNA的合成受到了抑制口l。抗菌因素與供電體、介質、溫度、PH值的不同以及從氧化物的脫氧到
乳過氧化物酶體系的組成成分
所謂LPS必須同時包括3種組成成分,即乳過氧化物酶,硫氰酸鹽和過氧化氫。只有這三種成分共同作用才具有抗菌活性。在實際應用中,若體系中的某一組分濃度不夠時,則需要添加外源或設法生成,以保證抗菌效果,這就是LPS的“激活”。其中,乳過氧化物酶的濃度不低于0.02 U/mL。牛乳中天然的LP的濃度為1.4
簡述乳過氧化物酶的理化性質
存在于乳腺、淚腺、唾液腺中的LP在化學上和免疫學上的性質都是類似的。LP參與抑制微生物生長首先被Hanssen提出,他指出LP參與構成宿主對抗入侵微生物的天然防御系統。除此之外,LP還具有抗菌活性、降解各種致癌物質以及保護動物細胞被過氧化的能力。LP是乳中熱穩定性的酶之一,它的破壞已經被作為巴氏
乳過氧化物酶的濃度及活性的介紹
在牛乳中,LP是僅次于黃嚓吟氧化酶第二豐富的酶,它在乳中的濃度大約是30mg/L。有報道,LP含量的改變與牛的生殖周期、季節、品種和喂養制度有關,需要注意,不像其它抗菌蛋白,LP的含量在牛初乳中是較低的,但在產后3~5天LP含量迅速增加以達到最大值。不同來源乳中的LP的活性不同，可以看到牛乳中L
乳過氧化物酶體系的組成成分介紹
所謂LPS必須同時包括3種組成成分,即乳過氧化物酶,硫氰酸鹽和過氧化氫。只有這三種成分共同作用才具有抗菌活性。在實際應用中,若體系中的某一組分濃度不夠時,則需要添加外源或設法生成,以保證抗菌效果,這就是LPS的“激活”。其中,乳過氧化物酶的濃度不低于0.02 U/mL。牛乳中天然的LP的濃度為1
微乳薄層色譜法
微乳薄層色譜法與一般常用的薄層色譜法不同，微乳薄層色譜法是以微乳液為流動相的薄層色譜法。微乳液是將不同配比的表面活性劑、助表面活性劑、油、水等組分組合在一起，使其自發生成一種無色透明、各向同性、低黏度的溶液，屬于締合膠體溶液。微乳體系的組成與膠束體系相似，但比膠束體系具有更大的增溶量。微乳液具有更大
乳過氧化物酶體系的抑菌效果介紹
LPS的抗菌性是表現在對乳中一些微生物具有抑菌或殺菌作用其抗菌機理是微生物細胞質膜上的琉基基團被氧化,導致細胞質膜結構破壞,鉀離子、氨基酸和多膚泄露,使細胞對葡萄糖、氨基酸、漂吟、嚓陡的攝取以及蛋白質、DNA和RNA的合成受到了抑制口l。抗菌因素與供電體、介質、溫度、PH值的不同以及從氧化物的脫
免疫學方法檢測乳過氧化物酶的介紹
酶聯免疫吸附試驗（ELISA） 即將抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。ELISA 方法是近30 年來發展起來的綜合性酶免疫化學分析方法，采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產生顏色反應，用于定量測定抗原或者抗體。使用該測定方法有3 種
熟地黃延緩小鼠衰老的作用
熟地黃20%水煎液每日灌胃0.3ml共45天，處死取血，測定超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力和過氧化脂質（LPO）的含量。結果熟地黃可增強GSH-Px活性和降低血清中LPO的含量，與對照組相比較分別為P
熟地黃延緩小鼠衰老的作用
熟地黃20%水煎液每日灌胃0.3ml共45天，處死取血，測定超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力和過氧化脂質（LPO）的含量。結果熟地黃可增強GSH-Px活性和降低血清中LPO的含量，與對照組相比較分別為P
過氧化物酶染色（Washburn法）
1.?實驗原理粒細胞和部分單核細胞的溶酶體顆粒中含有過氧化物酶，pox能分解H2O2釋放出新生氧，使四甲基聯苯胺氧化成聯苯胺藍，后者與亞硝基鐵氰化鈉結合，再進一步氧化形成穩定的藍色物質，沉淀于酶活性的細胞質內。2.?標本采集2.1?病人準備：了解病人是否對局麻藥有過敏史。凝血因子嚴重缺陷引起的出血性
苯胺類檢測LP－活性檢測乳過氧化物酶的介紹
以苯胺類為底物測定過氧化物酶活性，其原理為在過氧化物酶存在時，H2O2 可使苯胺發生氧化聚合反應，產物為棕褐色物質。該物質于415 nm 波長下有最大光吸收，因此利用分光光度法測定反應液的吸光度，以吸光度的變化速率來表征過氧化物酶活力。
乳過氧化物酶體系（LPS）的抑菌效果介紹
LPS的抗菌性是表現在對乳中一些微生物具有抑菌或殺菌作用其抗菌機理是微生物細胞質膜上的琉基基團被氧化,導致細胞質膜結構破壞,鉀離子、氨基酸和多膚泄露,使細胞對葡萄糖、氨基酸、漂吟、嚓陡的攝取以及蛋白質、DNA和RNA的合成受到了抑制口l。抗菌因素與供電體、介質、溫度、PH值的不同以及從氧化物的脫氧到
大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA檢測法
大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和唾液、尿液、生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?MPO?單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的?MPO與單抗結合，加入生物素化的抗大鼠MPO，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的