一、原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步,這種方法已成為研究亞細胞成分的化學組成、理化特性及其功能的主要手段。勻漿(Homogenization)低溫條件下,將組織放在勻漿器中,加入等滲勻漿介質(即0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L氯化鈣)進行破碎細胞使之成為各種細胞器及其包含物的勻漿。分級分離(Fractionation)由低速到高速離心逐漸沉降。先用低速使較大的顆粒沉淀,再用較高的轉速,將浮在上清液中的顆粒沉淀下來,從而使各種細胞結構,如細胞核、線粒體等得以分離。由于樣品中各種大小和密度不同的顆粒在離心開始時均勻分布在整個離心管中,所以每級離心得到的第一次沈淀必然不是純的最重的顆粒,須經反復懸......閱讀全文
面對全球嚴峻的抗癌形勢,如何在提高癌癥治療效果的同時,降低藥物的毒副作用以減輕病人痛苦并延長生存期已成為重大的社會問題。臨床研究表明,藥物的治療效果很大程度上取決于藥物與亞細胞結構及生物大分子等(如線粒體、DNA、RNA等)的有效相互作用。大部分抗癌藥物通過損傷細胞核內DNA殺死癌細胞,因此,其
百合胚珠的發育和胚囊的形成 百合花取材比較容易,而且其子房大而細長,中軸胎座,有三個子房室,每一子房室中有兩列胚珠。百合胚珠在中軸上排列整齊,著生部位一致,在制作切片時,可在同一切面上同時切到六個胚珠,而且容易得到胚珠切面較正的切片(子房橫切,胚珠縱切)。所以,常用百合子房作為觀察胚珠和胚囊發育的材
一、克隆的早期研討 克隆一詞是英文單詞clone的音譯,作為名詞,c1one通常被意譯為無性繁衍系。同一克隆內一切成員的遺傳構成是完整相同的,例外僅見于有突變發作時。自然界早已存在自然植物、動物和微生物的克隆,例如:同卵雙胞胎實踐上就是一種克隆。但是,自然的哺乳動物克隆的發作率極低,成員數
一、克隆的早期研討 克隆一詞是英文單詞clone的音譯,作為名詞,c1one通常被意譯為無性繁衍系。同一克隆內一切成員的遺傳構成是完整相同的,例外僅見于有突變發作時。自然界早已存在自然植物、動物和微生物的克隆,例如:同卵雙胞胎實踐上就是一種克隆。但是,自然的哺乳動物克隆的發作率極低,成員數
一、克隆的早期研究 克隆一詞是英文單詞clone的音譯,作為名詞,c1one通常被意譯為無性繁殖系。同一克隆內所有成員的遺傳構成是完全相同的,例外僅見于有突變發生時。自然界早已存在天然植物、動物和微生物的克隆,例如:同卵雙胞胎實際上就是一種克隆。然而,天然的哺乳動物克隆
實驗材料組織試劑、試劑盒溶液 H儀器、耗材尼龍網勻漿器實驗步驟組織制備1. 切碎組織,用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗組織/組織培養物:溶液 H:15 mmol/L PIPES,pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2 mmo
實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 NaCl 洗液
實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 NaCl 洗液Laemmli 上樣緩沖液ATP磷酸肌酸無菌蒸餾水尿素緩沖液MD 0.1MD 0.6KCl 洗液鏈親和素瓊脂糖凝膠封閉緩沖液NP-40儀器、耗材 鏈親和素瓊脂糖凝膠Dounce 玻璃勻漿器微量透析杯透析袋實驗步驟 一、材料與設備1. AAS 法純化
從組織中制備細胞核體外細胞核連綴反應體外細胞核連綴反應產物的分析實驗材料動物組織 &nbs
哺乳動物組織/組織培養細胞爪蟾卵母細胞果蠅胚SPISULA實驗材料組織 &n
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒NaCl 洗液Laemmli 上樣緩沖液ATP磷酸肌酸無菌蒸餾水尿素緩沖液MD 0.1MD 0.6KCl 洗液鏈親和素瓊脂糖凝膠封閉緩沖液NP-40儀器、耗材鏈親和素瓊脂糖凝膠Dounce 玻璃勻漿器微量透析杯透析袋實驗步驟一、材料與設備1. AAS 法純化 RNP
從組織中制備細胞核 體外細胞核連綴反應 體外細胞核連綴反應產物的分析 實驗材料
哺乳動物組織/組織培養細胞 爪蟾卵母細胞 果蠅胚 SPISULA 實驗材料
實驗材料 組織試劑、試劑盒 溶液 H儀器、耗材 尼龍網勻漿器實驗步驟 組織制備1. 切碎組織,用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗組織/組織培養物:溶液 H:15 mmol/L PIPES,pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2
在細胞核中基因組的活性部分與它的非活性部分在空間上分隔開來對于基因表達控制至關重要。在一項新的研究中,來自德國慕尼黑大學、美國麻省理工學院和馬薩諸塞大學醫學院的研究人員揭示了這種分離的主要機制,并顛覆了我們對細胞核的認識。相關研究結果近期發表在Nature期刊上,論文標題為“Heterochro
11月5日,國際學術期刊Nucleic Acids Research在線發表了中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所陳玲玲研究組關于研究細胞核內長非編碼RNA的新型表達載體。該研究首次構建了一種可以將外源過表達的RNA滯留在細胞核內的載體(snoVector),而且過表達的RN
細胞凋亡的圖片5細胞凋亡的圖片6細胞凋亡的研究方法一、定性和定量研究只定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察(普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)進行定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。二、區分凋亡和壞死可將二
實驗材料動物組織試劑、試劑盒PBS蔗糖儀器、耗材電動勻漿器特氟隆研杵實驗步驟一、用超速離心法從組織中分離細胞核1. 切下動物組織,放入置于冰上的平皿中,用冰冷的 PBS 沖洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液,用剪刀或剃須刀片將組織切碎,轉入一個干凈試管中,加蔗糖Ⅰ溶液至終體積為每克組織 10 ml。3. 用
hoechst33258染色,他們認為細胞發生凋亡時,染色質會固縮。 所以Hoechst染色時,細胞核會呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。正常細胞核刺激后有致密濃染的凋亡細胞 AO-EB染色法:The image below shows human lymphoma cells
近日,中國科學院南京地質古生物研究所研究員朱茂炎、副研究員殷宗軍與來自英國、巴西和瑞典的合作者,在貴州甕安動物胚胎化石亞細胞結構研究方面取得了新進展。他們采用高分辨率同步輻射X射線斷層掃描顯微術等三維無損成像技術,以亞微米的精度重建了動物胚胎化石的三維結構,并且借助大型圖形工作站和專業體數據處理
細胞核靶向介孔二氧化硅納米載藥體系成功實現高效抗癌 面對全球嚴峻的抗癌形勢,如何在提高癌癥治療效果的同時,降低藥物的毒副作用以減輕病人痛苦并延長生存期已成為重大的社會問題。 中科院上海硅酸鹽研究所研究員施劍林帶
利用一種可在活細胞中實時操作蛋白質的新工具,來自約翰霍普金斯大學的研究人員無意中解答了一個長期以來關于某種蛋白在細胞中的開啟位置及機制的爭辯。在發布于《自然細胞生物學》(Nature Chemical Biology)的研究報告中,科學家們證實蛋白激酶A不僅可以在細胞胞體內還可以在
基因表達是用遺傳信息生產蛋白質的過程,這對于細胞正常運行和實現它們的許多目的,是至關重要的。基因表達發生在兩個不同的步驟:首先是轉錄,這發生在細胞核中,然后是翻譯,這發生在細胞質中。控制基因表達,對于細胞產生在正確時刻所需的確切蛋白質,是至關重要的。到目前為止,基因轉錄和翻譯成蛋白質,都被認為是
細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。一、細胞凋亡的形態學檢測 根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。 1 光學顯微鏡和倒
薛社普 著名細胞生物學家、實驗胚胎學家和生殖生物學家,中國醫學科學院研究員、北京協和醫學院教授。廣東新會人,1917年出生,1943年畢業于重慶中央大學博物系,1951年獲美國華盛頓大學(圣路易斯)理科哲學博士學位。1991年當選為中國科學院院士。對細胞分化規律及其可調控性提供了重要理論依據;為
研究人員成功地從單個腦細胞細胞核中分離出全部的信使RNA并對其進行了測序。這項發表在《美國科學院院刊》(PNAS)上的新研究,將幫助研究人員更好地了解一些器官在健康和疾病狀態下的功能機制,為開發出個體化治療提供了又一塊跳板。 動物和植物中的大多數細胞都包含有一個細胞核,里面儲存著細胞的DN
實驗概要本實驗以蛙為實驗材料介紹了細胞核移植技術。實驗原理細胞核移植,就是將一個細胞核用顯微注射的方法放進另一個細胞里去。前者為供體,可以是胚胎的干細胞核,也可以是體細胞的核。受體大多是動物的卵子。因卵子的體積較大,操作容易,而且通過發育,可以把特征表現出來,因此細胞核移植技術,主要是用來研究胚胎發
氨酰tRNA合成酶(aminoacyl tRNA synthetase,通常簡寫為aaRS)是一類催化特定氨基酸或其前體與對應tRNA發生酯化反應而形成氨酰tRNA的酶。由于每一種的氨基酸與 tRNA的連接都需要專一性的氨酰tRNA合成酶來催化,因此氨酰tRNA合成酶的種類與標準氨基酸的數量一樣
在真核細胞的細胞核中,基因組會被核小體包裹形成染色質[1],而染色質在空間上的分布是否有一定的規律是長期以來科學家們在努力研究的問題。了解其分布規律有利于增強對于細胞核的組織結構以及一些重要細胞活動的理解[2-4]。本研究利用改良的CRISPR/Cas9系統在二倍體活細胞中對隨機選中的基因組位點
一、DNA探針的應用 雖然一般認為DNA探針敏感度不如cRNA探針,但在病毒的檢測等領域中DNA探針仍得到廣泛的應用。 在原位雜交細胞化學的操作步驟方面與cRNA探針基本相同,所不同的是:(1)雜交時需先在高溫80~95℃短時處理,使DNA探針及細胞內靶DNA變性,解離成單鏈,迅置于冰上冷卻。然