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  • 大腸桿菌的電擊轉化實驗

    大腸桿菌的電擊轉化實驗可以用于:更為簡便快捷地進行轉化。實驗方法原理轉化(transformation)是某一基因型的細胞從周圍介質中吸收來自另一基因型的細胞的DNA而使它的基因型和表型發生相應變化的現象。該現象首先發現于細菌。也是細菌間遺傳物質轉移的多種形式中最早發現的一種,它不同于通過噬菌體感染傳遞遺傳物質的轉導以及通過細菌細胞的接觸而轉移DNA的細菌接合。實驗材料質粒 DNA試劑、試劑盒甘油純水SOC 培養液儀器、耗材CYTLBSOB 瓊脂板電擊儀電擊杯冰浴盒液氮實驗步驟一、材料準備1. 緩沖液和溶液甘油(10% V/V)(分子生物級),冰上預冷。純水(Milli-Q 級或與之相當的級別,用預先處理的 Nalgene 濾膜(0.45 &mu;m 孔徑)過濾除菌,放置冰上。2. 核酸和寡核苷酸質粒 DNA ( 重組質粒)3. 培養基(1) CYT,冰上放置。10% ( V/V ) 甘油,0.125% ( m/V) 酵......閱讀全文

    大腸桿菌

    ? ? ??大腸細菌(E. coli)為埃希氏菌屬(Escherichia)代表菌。一般多不致病,為人和動物腸道中的常居菌,在一定條件下可引起腸道外感染。某些血清型菌株的致病性強,引起腹瀉,統稱病致病大腸桿菌。一、生物學性狀(一)形態與染色大小0.4~0.7×1~3um,無芽胞,大多數菌株有動力。有

    大腸桿菌素或能殺死大腸桿菌本身

      近日,英國諾丁漢大學生物分子科學中心研究人員表示,他們發現了對付大腸桿菌菌株的新線索。研究人員指明了如何使“細菌素”——能夠殺死其他細菌菌株的物質——進入細菌細胞進而殺死它,以及如何讓大腸桿菌產生的大腸桿菌素A有針對性地到另一個細胞蛋白(TolA)中創建一個新的“特洛伊木馬”武器,并最終從內部殺

    大腸桿菌雜交

    一、實驗原理Lederberg和Tatum(1946)選用典型的大腸桿菌為材料,篩選營養缺陷型。利用雙重和三重缺陷型的菌株,在簡單的合成培養基上混合培養,在此培養基上只有重組子能長,親本不能長,即所謂選擇性培養,使細菌雜交獲得成功。圖12-1說明了細菌的基因重組是不同基因型的細菌經接觸,接合后隨之發

    大腸桿菌中毒表現

    不同的致瀉性大腸埃希菌引起的中毒,癥狀各不相同。①產腸毒素性大腸埃希菌引起的中毒主要癥狀是水樣腹瀉、腹痛、惡心、低熱。每天腹瀉可達8~12次。②腸道侵襲性大腸埃希菌的中毒癥狀與志賀菌引起的痢疾相似,發熱、劇烈腹痛、水樣腹瀉、糞便中有少量粘液和血。③腸道致病性大腸埃希菌引起的中毒主要癥狀是發熱、不適、

    大腸桿菌染色方法

    考慮到你是觀察純凈水,大腸桿菌含量較少,首先用濾膜過濾濃縮,然后平板培養數菌落即可,如果要用顯微鏡觀察的話可以革蘭氏染色

    大腸桿菌轉化實驗

    實驗方法原理?質粒DNA或重組DNA粘附在細菌細胞表面,經過42°C短時間的熱擊處理,促進吸收DNA.然后在非選擇培養基中培養一代,待質粒上所帶的抗菌素基因表達,就可以在含抗菌素的培養基中生長。實驗材料?質粒DNA重組DNA試劑、試劑盒?LB培養基蒸餾水IPTGX-gal氨芐青霉素儀器、耗材?旋渦混

    大腸桿菌轉化實驗

    實驗方法原理質粒DNA或重組DNA粘附在細菌細胞表面,經過42攝氏度短時間的熱擊處理,促進吸收DNA.然后在非選擇培養基中培養一代,待質粒上所帶的抗菌素基因表達,就可以在含抗菌素的培養基中生長。實驗材料質粒DNA?重組DNA試劑、試劑盒LB培養基?蒸餾水?IPTG?X-gal?氨芐青霉素儀器、耗材旋

    質粒轉染大腸桿菌

    質粒轉染大腸桿菌可應用于:(1)細菌株的構建;(2)細胞工程;實驗方法原理感受態細胞易于接受外來基因成為重組細胞,實驗將質粒加入有感受態細胞的培養皿中,熱擊處理進行質粒轉染。實驗材料細胞株質粒試劑、試劑盒鏈霉素青霉素FCSPBS胰酶EDTA轉染試劑(Lipofectamine TM2000)胰化蛋白

    大腸桿菌介紹(二)

    ? 三、微生物學檢查法  (一)細菌的分離鑒定  1.標本:腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等,腹瀉者取糞便。  2.分離培養與鑒定:糞便標本直接接種腸道桿菌選擇性培養基。血液需先經肉湯增菌,再轉種血瓊脂平板。其他標本可同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養基。37℃孵育18~24小時后,觀察

    大腸桿菌轉化實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 質粒DNA或重組DNA粘附在細菌細胞表面,經過42攝氏度短時間的熱擊處理,促進吸收DNA.然后在非選擇培養基中培養一代,待質粒上所帶的抗菌素基因表達,就可以在含抗菌素的培養基中生長。

    大腸桿菌轉化實驗

    熱擊法CaCl2轉化法一步法高效率電轉化法實驗方法原理質粒DNA或重組DNA粘附在細菌細胞表面,經過42攝氏度短時間的熱擊處理,促進吸收DNA.然后在非選擇培養基中培養一代,待質粒上所帶的抗菌素基因表達,就可以在含抗菌素的培養基中生長。實驗材料質粒DNA ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

    大腸桿菌介紹(一)

    ? 大腸細菌(E. coli)為埃希氏菌屬(Escherichia)代表菌。一般多不致病,為人和動物腸道中的常居菌,在一定條件下可引起腸道外感染。某些血清型菌株的致病性強,引起腹瀉,統稱病致病大腸桿菌。  一、生物學性狀  (一)形態與染色  大小0.4~0.7×1~3um,無芽胞,大多數菌株有動力

    質粒轉化大腸桿菌

    該實驗主要有兩個用途:1.重組質粒的鑒定。當質粒的重組或其它載體重組后,通常會發生質粒的重組失敗,包括質粒的自身環化。因而要求進行篩選,把重組成功的質粒找出來。在目前常用的質粒和其它載體中含有相應的抗生素抗性基因,一旦重組成功,質粒環化(包括自身環化),抗生素抗性基因表達,被轉化的大腸桿菌便具備抗相

    什么是大腸桿菌

    大腸桿菌是革蘭氏陰性菌,又叫大腸埃希菌,屬于人體內正常菌群,一般不致病。大腸桿菌周身有鞭毛,有菌毛,無芽孢,兼性厭氧,可以發酵葡萄糖等多種糖類,產酸并產氣。致病物質是可以分泌黏附素、外毒素和內毒素。大腸桿菌在正常情況下可以抵御外來致病菌的入侵和定植,對宿主起著保護作用;大腸埃希菌還可以利用人體攝入的

    大腸桿菌破碎壓力

      細菌的破碎在生物行業的應用是細菌培養完成、離心后的一個重要工藝,這其間所涉及的幾個主要技術要點分別是:細菌的重懸,細菌破碎率,溫度控制。  第一, 細菌重懸  細菌的重懸對于每一個做過細菌破碎的用戶來說都是非常熟悉的一件事情,培養好的細菌經離心收集之后在破碎之前必須將收集好的菌泥與緩沖液按照一定

    大腸桿菌超聲破碎

      大腸桿菌的基因工程  一、原理:微生物 細胞在超聲波的作用下,細胞結構受到破壞,而使細胞破碎。  二、材料與試劑:超聲波破碎儀、顯微鏡、燒杯、細胞破碎緩沖液(10mmol/L,PH7.4Tris-HCL緩沖液中含5mmol/L的MgCL2)、細胞懸浮液(取50-100mg)大腸桿菌 濕細胞懸浮在

    質粒轉染大腸桿菌

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 感受態細胞易于接受外來基因成為重組細胞,實驗將質粒加入有感受態細胞的培養皿中,熱擊處理進行質粒轉染。 實驗材料 細胞株 質

    大腸桿菌中毒的表現

    大腸桿菌中毒表現:不同的致瀉性大腸埃希菌引起的中毒,癥狀各不相同。①產腸毒素性大腸埃希菌引起的中毒主要癥狀是水樣腹瀉、腹痛、惡心、低熱。每天腹瀉可達8~12次。②腸道侵襲性大腸埃希菌的中毒癥狀與志賀菌引起的痢疾相似,發熱、劇烈腹痛、水樣腹瀉、糞便中有少量粘液和血。③腸道致病性大腸埃希菌引起的中毒主要

    大腸桿菌中所致疾病

    1.腸道外感染:多為內源性感染,以泌尿系感染為主,如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎、上行性尿道感染多見于已婚婦女。也可引起腹膜炎、膽囊炎、闌尾炎等。嬰兒、年老體弱、慢性消耗性疾病、大面積燒傷患者,大腸桿菌可侵入血流,引起敗血癥。早產兒,尤其是生后30天內的新生兒,易患大腸桿菌性腦膜炎。2.急性腹瀉:某些血

    大腸桿菌可能誘發癌癥

      人腸道中數萬億的可能導致肥胖并帶來糖尿病等疾病風險。而今天公布的研究報告稱,這個組與癌癥也有關系。 ? ?   研究人員說,有炎性腸道疾病的老鼠體內有更多可能導致結腸直腸癌的可產生毒素的細菌。而且,相比健康人,患有結腸直腸癌的人也更容易存有這些細菌。 ? ?   這一結果

    關于大腸桿菌的簡介

      大腸桿菌是動物腸道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定條件下引起疾病。大腸桿菌的血清型能夠引起人體或動物胃腸道感染,主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的,除胃腸道感染以外,還會引起尿道感染、關節炎、腦膜炎以及敗血型感染等 [1] 。

    大腸桿菌的基本介紹

      大腸桿菌(Escherichia coli),又叫大腸埃希氏菌,Escherich在1885年發現的。大腸桿菌是條件致病菌,在一定條件下可以引起人和多種動物發生胃腸道感染或尿道等多種局部組織器官感染。  大腸桿菌是動物腸道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定條件下引起疾病 。大腸桿菌的血清型能夠

    大腸桿菌生長曲線測定

    實驗方法原理 測定微生物生長曲線的方法很多,有血球計數法、平板菌落計數法、稱重法、比濁法等。本實驗采用比濁法測定,由于細菌懸液的濃度與混濁度成正比,因此,可利用光電比色計測定菌懸液的光密度來推知菌液的濃度,并將所測得的光密度值(OD值)與其對應的培養時間作圖,即可繪出該菌在一定條件下的生長曲線。現已

    鑒別大腸桿菌的原理

      運用伊紅-美藍鑒別培養基。在培養基中加入伊紅和美藍,可以用來鑒別是否存在大腸桿菌:如果有大腸桿菌,其代謝產物(有機酸)就會與伊紅和美藍結合,使菌落出現深紫色,并帶有金屬光澤。

    大腸桿菌的菌落形態

    大腸桿菌在普通瓊脂培養基上面都是一樣的,圓形邊緣整齊,表面光滑,半透明,小凸起;典型的大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂平板上的特征為:深紫黑色、光滑、濕潤、帶有金屬光澤的圓形菌落。大腸桿菌是動物腸道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定條件下引起疾病 。大腸桿菌的血清型能夠引起人體或動物胃腸道感染,主要是由特定

    大腸桿菌的檢測方法

    ? 隨著人們生活水平的提高,食品安全問題受到越來越多的重視,在不斷被報道的食品安全事故中,大腸桿菌是引起這些事件的主要的影響因素之一,是判斷食品污染程度的一個重要參數,因此采用快速、可靠、簡便的方法來準確檢測食品中大腸桿菌數量是否超標是至關重要的。本文綜述了大腸桿菌的傳統檢測方法以及最新的檢測方法,

    大腸桿菌活化步驟方法

    1、種子接種:將凍干管或甘油管種子接種到LB培養基搖瓶中進行活化,一般可以加抗性標記對應的抗生素。然后搖床恒溫培養。2、發酵培養基準備:搖瓶的話好說,滅菌鍋就行。發酵罐的話,要先將罐子清洗干凈,然后配料,然后滅菌。3、將培養好的種子液,按一定的接種量接到發酵培養基中。如果是搖瓶發酵的話一般不用中控,

    大腸桿菌的致病物質

    1、定居因子(Colonizationfactor,CF):也稱粘附素(Adhesin),即大腸桿菌的菌毛。致病大腸桿菌須先粘附于宿主腸壁,以免被腸蠕動和腸分泌液清除。使人類致瀉的定居因子為CFAⅠ、CTAⅡ(ColonizationfactorantigenⅠ、Ⅱ),定居因子具有較強的免疫原性,能

    大腸桿菌定性測試儀

    大腸桿菌定性測試儀,采樣量為0-3000CFU/100mls,溫度為35±0.5℃。1.m307183能夠識別并認可基于MPN的方法;2.24小時以內檢測大腸桿菌及E.大腸桿菌的總量;并提供0-3000CFU/100mls采樣量;3.整個溫孵期溫度恒定在35±0.5℃;4.內部時鐘追蹤溫孵[1]?過

    宜家銷毀大腸桿菌超標蛋糕

      昨日,有消息稱,近兩噸瑞典宜家進口的巧克力蛋糕已被上海出入境檢驗檢疫局銷毀,原因是大腸菌群超標。   記者多方了解到,在國家質量監督檢驗檢疫總局上月公布的2013年1月進境不合格食品、化妝品信息中,該批次蛋糕的銷毀已進行了公布。記者發現,上海宜家家居有限公司進口的該批杏仁

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