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動物RNA提取可用于：（1）研究生物體基因調控機制；（2）分子克隆和基因表達以獲得該性狀基因；（3）可以對特定的基因表達進行定量的檢測，從分子水平精確的了解細胞生命活動的規律。實驗方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養細胞和白細胞中提取純化完整總RNA，方法簡單、快速。該系統以膜為基礎，根據組織類型的不同，每次最多可純化60 mg 組織。系統包含DNase 處理步驟，直接在小離心柱的濾膜上完成，大大降低了會干擾擴增反應的基因組DNA 的污染。純化中不需使用苯酚: 氯仿抽提及乙醇沉淀，最后RNA 樣品中沒有DNase 殘留。 實驗材料實驗魚試劑、試劑盒乙醇DEPCSV RNA Lysis BufferSV RNA dilution BufferSV RNA Wash SolutionYellow core BufferMnCl20.09MD......閱讀全文
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
類似方案 1、方案 2 描述了在真核表達載體上進行 cDNA 文庫構建與篩選的方法, 流程分為以下兩個階段：1. 在真核表達載體上構建 cDNA 文庫；2. 在真核表達載體上構建的 cDNA 文庫的篩選。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）上冊，作者：黃培堂。實驗材料宿主細胞質粒或λ噬菌體表達載體
實驗材料 宿主細胞 質粒或λ噬菌體表達載體 包裝提取物 電轉化感受態大腸桿菌
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
RT-PCR實驗有三步：抽提RNA，RT，PCR。 要求：1.做RT前必需測RNA濃度，逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求，常用500ng或1ug。2. RT按要求做，一般不會出太大問題。 3. PCR，按常規。但如需擴長片段，則對前兩步要求較高，需要有完整的cDNA存在，不是單
IS PCR的技術特點 （1）既具有PCR的特異性與高靈敏性，又具有原位雜交的定位準確性；（2）測到低于2個拷貝量的細胞內特定DNA序列，甚至可檢測出單一細胞中的僅含一個拷貝的原病毒DNA；（3）有助于細胞內特定核酸序列定位與其形態學變化的結合分析；（4）可用于正常或惡性細胞，感染或非感染細胞的鑒定
Kim應當不會預測到，他在1994年發明的TRAP會那么受歡迎，被一代又一代的研究者奉為端粒酶 活性檢測首選方法。不過，TRAP法雖然靈敏度高，卻同樣存在瑕疵。下面為大家介紹的是根據TRAP法適當改良的研究專用試劑盒具體情況和使用方法以及常見問題解答。本品與通常的端粒 酶活性測定法相比較，具有以下特
實驗概要本實驗介紹了樣品總RNA的提取方法。完整RNA的提取和純化，是進行RNA方面的研究工作，如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過程中都有五個關鍵點，即：樣品細胞或組織的有效破碎；有效地使核蛋白復合體變性；對內源RNA酶的
直接研磨法 液氮研磨法 實驗方法原理 通過裂解液β-巰基乙醇迅速裂解細胞和滅活細胞RNA
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被
水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒一、簡介水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒適合于快速從水生動物組織勻漿液中提取高純度的病毒基因組核酸。試劑盒基于硅膠柱純化技術，提取過程中無需使用有毒的酚氯仿抽提，也無需進行耗時的醇類沉淀，獲得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern雜
水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒一、簡介水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒適合于快速從水生動物組織勻漿液中提取高純度的病害基因組核酸。試劑盒基于硅膠柱純化技術，提取過程中無需使用有毒的酚氯仿抽提，也無需進行耗時的醇類沉淀，獲得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern雜
強迫游泳、懸尾和曠場實驗相關-溫陽解郁湯對抑郁模型大鼠HPA軸的影響溫陽解郁湯對抑郁模型大鼠HPA軸的影響摘要：目的：研究溫陽解郁湯對慢性應激抑郁大鼠HPA軸的影響，初步探討其抗抑郁作用的機制。方法：雄性Wistar大鼠，隨機分為6組，正常對照組和模型對照組灌胃0.9%氯化鈉溶液，溫陽解郁湯高、中、
從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工等一系列問題。總之
第一節 概 述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工
想要研究蛋白質，首先要得到高度純化且具有生物活性的目的物質，因此，蛋白樣品的制備是重要前提。蛋白提取的質量和效果對后續的研究分析有重要影響。不同種類的樣本在制備過程中，存在一些差異，要根據樣本特征調整實驗方案和操作細節。基本原則樣品處理盡量簡單，減少蛋白損失；盡量避免蛋白的降解；盡可能提高樣品蛋白的
實驗概要本實驗詳細介紹了顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程。實驗原理轉基因小鼠制備的基本原理是將改建后的目的基因(或基因組片段)用顯微注射法注入供體小鼠的受精卵(或著床前胚胎細胞)，然后將此受精卵(或著床前胚胎細胞)再植入受體動物的輸卵管(或子宮)中，使其發育成攜帶有外源基因的轉基因動物，通過分
完整RNA的提取和純化,是進行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有
生物谷： RT-PCR實驗有三步：抽提RNA，RT，PCR。 要求：1.做RT前必需測RNA濃度，逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求，常用500ng或1ug。2. RT按要求做，一般不會出太大問題。 3. PCR，按常規。但如需擴長片段，則對前兩步要求較高，需要有完整的cDNA存
問題一：Real time PCR mRNA的相對定量和絕對定量的選擇；測定mRNA, 一般采用相對定量，因為絕對定量，標準品的制備和定量是有難度的，具體可以參考這篇文獻：http://www.biotnt.com/news/news_105.htm；“Analysis of Relative Ge
在前面的文章（Soil molecular biology），圍繞提取土壤樣品DNA、RNA相關問題做了簡單的引導介紹，比如PCR抑制因子、裂解注意事項等。今天將詳細介紹土壤微生物DNA提取的細節，以及如何使用MO BIO PowerSoil? DNA Isolation Kit獲得更好的提取效果。
摘 要： RACE是一種快速克隆cDNA末端的方法，目前, 該方法被廣泛應用于未知堿基序列基因的克隆，尤其是SMART RACE技術更為人們所青睞。本文總結了我們實驗室用SMART RACE技術克隆基因的一些心得體會，希望對用RACE方法克隆基因的同行有些幫助。關鍵詞： RACE; RN
Real-time PCR實驗注意事項實驗中的一些好習慣加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均移液槍用完之后要歸到zui大計量的位置，防止久而久之彈簧失去彈性一定要記著關水浴箱，切記切記多和大家討論，同時多關注別人討論的經驗，這幾乎是zui快提高的捷徑了所有的試劑都自己配，出了問題才好
實驗中的一些好習慣加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均移液槍用完之后要歸到最大計量的位置，防止久而久之彈簧失去彈性一定要記著關水浴箱，切記切記多和大家討論，同時多關注別人討論的經驗，這幾乎是最快提高的捷徑了所有的試劑都自己配，出了問題才好找原因防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器
一、防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均應在使用前于180℃的高溫下干烤6hr或更長時間。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用lv 仿沖洗（注意：有機玻璃器具因可被lv 仿腐蝕，故不能使用）。3. 有機玻璃的電泳槽等，可先用去污劑洗滌，雙蒸水沖洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2O2
以生物磁珠為載體提取核酸，所有反應是在液體體系中進行的，但生物樣本多種多樣，有液體也有固體，或者固液混合體，大多數生物樣本在進行核酸提取純化之前需要進行一定的前處理，液化、富集、除雜等都是常見的前處理方式。一、液化將固體樣本轉化為液體樣本是zui重要的樣本前處理方法，固體樣本是很難直接在試劑盒的作用
以生物磁珠為載體提取核酸，所有反應是在液體體系中進行的，但生物樣本多種多樣，有液體也有固體，或者固液混合體，大多數生物樣本在進行核酸提取純化之前需要進行一定的前處理，液化、富集、除雜等都是常見的前處理方式。一、液化將固體樣本轉化為液體樣本是最重要的樣本前處理方法，固體樣本是很難直接在試劑盒的作用下用
基因編輯更快更準更簡單 1973年，斯坦利?N?科恩(Stanley N. Cohen)和赫伯特?W?博耶(Herbert W. Boyer)找到了改變生物體基因組的方法，成功將蛙的DNA插入到細菌中。20世紀70年代末，博耶的基因泰克(Genetech)公司對大腸桿菌進行基因改造，使其帶有一
第一節 概 述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了
提取植物DNA時遇到多糖成分的干擾， DNA質量一直不高，如何消除多糖的影響？ 參考見解：一般來說，SDS法提取的DNA會還有較多的多糖，使DNA成膠凍狀。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比較高，可用以下方法試一試： 1、 在 DNA 未溶出之前，先用一