NorthernBlot 是一項用于檢測特異性 RNA 的技術, 在變性瓊脂糖凝膠中將 RNA 分子按大小分開后,將其轉移至硝酸纖維素膜或尼龍膜上,用一個放射性同位素標記或酶標記 DNA 或 RNA 櫬針與固定的 RNA 進行雜交。探針通過配對序列僅與特異的 RNA 結合,雜交 RNA 的大小和 RNA 量可通過放射性肖顯影或酶促反應的顏色來顯示。試劑、試劑盒20XMOPS 緩沖液20XSSC50XDenhardt 液雜交液10%SDS儀器、耗材水平電泳裝置水浴硝酸纖維素膜或尼龍膜3 MM 濾紙紫外交聯儀雜交管雜交爐[32P] 標記的 DNA 或 RNA 探針實驗步驟一、材料與設備1) 水平電泳裝置2) 水浴3) 硝酸纖維素膜或尼龍膜4)3 MM 濾紙5) 紫外交聯儀6) 雜交管7) 雜交爐8)[32P] 標記的 DNA 或 RNA 探針9)20XMOPS 緩沖液:4l.86 gMOPS,8 g 乙酸鈉,72 gEDTA,加 D......閱讀全文
實驗方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合物(RNP,核糖核蛋白顆粒)的方法,無論是對于粗提物還是提純后的樣品,對分析 RNP 的結構域的結構都非
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。 蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾
Northern blot 是一種通過檢測RNA的表達水平來檢測基因表達的方法,通過northernblot的方法可以檢測到細胞在生長發育特定階段或者脅迫或病理環境下特定基因表達情況。Northern blot 首先通過電泳的方法將不同的RNA分子依據其分子量大小加以區分,然后通過與特定基因
實驗方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合物(RNP,核糖核蛋白顆粒)的方法,無論是對于粗提物還是提純后的樣品,對分析 RNP 的結構域的結構都非常有效。實驗材料 蛋白酶 KAMV 反轉錄酶試劑、試劑盒 緩沖液DNase ⅠDNase Ⅰ 緩沖液酚氯仿溶液乙酸鈉R
寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合物(RNP,核糖核蛋白顆粒)的方法,無論是對于粗提物還是提純后的樣品,對分析 RNP 的結構域的結構都非常有效。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合
與Southern Blot或Northern Blot雜交方法類似,但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附
第一節 原位雜交組織化學概述 一、核酸分子雜交技術 1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動
現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。 一、GST pull-down實驗 GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗
Northern Blot Northern Blot 試劑、試劑盒
Northern blot技術 Northern Blot 實驗方法原理 將RNA樣品通
(2)硝酸纖維素濾膜吸印。①將膠切成合適大小,切去右上角作為記號。②將膠放進盛有變性緩沖液(1.5mol/l NaCl, 0.5mol/L NaOH)的盤中輕搖動15min。③換到中和緩沖液(1mol/L Tris·HCl , pH8.0, 1.5mol/L NaCl)中輕搖動30min。④裁一張硝
五、核酸分子雜交的類型 隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板
五、核酸分子雜交的類型 隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板
RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”,但越來越多的證據清楚的表明,RNA在生命的進程中扮演的角色遠比我們早前設想的更為重要。RNA 干擾(RNA interference)的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識,更因為可以簡化/替代基因敲除而成為研究基因功能的有力工具,
美國UVP的BioSpectrum 2D凝膠成像系統為全自動、計算機控制系統,是專門為快速獲取二維(如DIGE膠)成像所設計,并可直接進行分析。 系統特點: 使用該凝膠成像系統可獲得高分辨率的2D 圖像。全自動的制冷CCD(830萬像素)與激光掃描相比,靈敏度
Northern blot 可用于:(1)檢測不同組織、器官;(2)生物體不同發育階段以及脅迫環境或病理條件下特定基因的表達樣式。如northern blot被大量用于檢測癌細胞中原癌基因表達量的升高及抑癌基因表達量的下降,器官移植過程中由于免疫排斥反應造成某些基因表達量的上升,Northern b
動物總RNA的提取與電泳I.實驗目的與要求A. 理解和掌握提取和純化動物總RNA的技術原理和操作方法。B. 理解和掌握通過電泳鑒定提取所得的動物總RNA的技術原理和操作方法。II. 實驗原理和背景知識A. RNA是生命活動中基因表達過程非常重要的生物大分子,如mRNA,它攜帶了DNA的全部編碼信息。
動物總RNA的提取與電泳 I. 實驗目的與要求 A. 理解和掌握提取和純化動物總RNA的技術原理和操作方法。 B. 理解和掌握通過電泳鑒定提取所得的動物總RNA的技術原理和操作方法。 II. 實驗原理和背景知識 A. RNA是生命活動中基因表達過程非常重要的生物
一、顯微切割技術出現的背景 在分子病理學研究中,常常遇到兩個比較棘手的問題: 一是選取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同質性。我們人體的各種組織絕大多數是由多種不同細胞組成的異質性的細胞群,這種選取同質性的研究材料問題在對人體組織的深入研究中常常遇到卻又不易解
一、顯微切割技術出現的背景 在分子病理學研究中,常常遇到兩個比較棘手的問題: 一是選取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同質性。我們人體的各種組織絕大多數是由多種不同細胞組成的異質性的細胞群,這種選取同質性的研究材料問題在對人體組織的深入研究中常常遇到卻又不易解
一、顯微切割技術出現的背景 在分子病理學研究中,常常遇到兩個比較棘手的問題: 一是選取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同質性。我們人體的各種組織絕大多數是由多種不同細胞組成的異質性的細胞群,這種選取同質性的研究材料問題在對人體組織的深入研究中常常遇到卻又不易解
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。 與Southern Blo
免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。Western Blot是檢測單一細胞蛋白表達量最好的方法;若要對表達蛋白進行細胞定位,confocal應是首選的方
分析測試百科網訊 2020年11月16日,慕尼黑上海分析生化展(analytica China)于上海拉開帷幕。上海易孛特光電技術有限公司開展首日便獲得不少關注,主要得益于公司在展會上正式推出的全球首款接觸式無損定量WESTERN BLOT成像設備。此款設備一經面世就斬獲德國紅點設計大獎,并在2
未來要解決的問題miRNAs在多個物種中廣泛被發現,而且在進化上高度保守。這些“小玩意兒”留給我們一大堆謎團:miRNA的確切功能是什么?它的目標靶是什么?作用機制是什么?也許需要對植物或者線蟲的基因組進行miRNAs突變株的篩選,在果蠅中可以用targeted-disruption缺失miRNA序
未來要解決的問題miRNAs在多個物種中廣泛被發現,而且在進化上高度保守。這些“小玩意兒”留給我們一大堆謎團:miRNA的確切功能是什么?它的目標靶是什么?作用機制是什么?也許需要對植物或者線蟲的基因組進行miRNAs突變株的篩選,在果蠅中可以用targeted- disruption缺失miR
上海大學生命科學學院、上海市能源作物育種及應用重點實驗室的研究人員證實,玉米Pro1基因(Zm P5CS2)的突變造成了突變體細胞中脯氨酸(proline)合成受阻,從而導致proline積累的減少。突變體中proline的缺乏引起了相應的轉運RNA(tRNApro AGG)空載形式(uncha