銀染實驗
試劑、試劑盒甲醇（50% 和5%v v)二硫蘇糖醇AgNO3檸檬酸（固態)顯影液實驗步驟試劑甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫蘇糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)檸檬酸（固態)顯影液操作程序此操作程序是根據Merril(1987)的方法修改而成。室溫下，凝膠在旋轉平臺上緩慢搖動，并進行下列步驟。1)在50% 甲醇溶液中浸泡2次，每次15 min。2)在5% 甲醇溶液中浸泡10 min。3)用H2O迅速洗3次。4)在10umol/L DTT溶液中浸泡20 min。5)在0.1%AgNO3溶液中浸泡20min。6)先用H20快速洗1次，然后用顯影液洗2次，每次不超過15s。7)在顯影液中浸泡數分鐘，直至顯現蛋白質帶。8)加入固體檸檬酸（雙水合物）（每200 ml顯影液加約10 g檸檬酸)，停止顯影。9)用鋁箔蓋住凝膠（使避光)，繼續浸泡10 min。10)用H2O徹底清洗。凝膠在鋁箔下（在暗處）H2O中浸泡10......閱讀全文
關于DNA測序技術的測序凝膠的銀染介紹
染色過程要求凝膠浸在塑料盤中。因而至少使用兩個盤子，大小與玻璃板類似。在盤中加入新鮮溶液之前須用高質量的水洗滌盤子。 1.電泳完畢后用一個塑料片子小心地分開兩板，凝膠應該牢固地附著在短玻璃板上。 2. 固定凝膠：將凝膠(連玻璃板)放入塑料盤，用固定/停止溶液浸沒,充分振蕩20分鐘或直至樣品中
低背景的蛋白質銀染(silver－staining)方法
我們做蛋白質電泳的人都知道，銀染色很靈敏，有很強的說服力，但通常膠背景較深，不易掃描。在這里介紹一下低背景的蛋白質銀染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 tim
銀染后的膠打質譜蛋白很少的原因
你指的蛋白很少是指分析出來的蛋白個數少，還是蛋白量低啊？銀染靈敏度高，如果切單條帶，蛋白含量本來就低，所以后續處理再損失一部分，打譜出來后，有些蛋白因為量實在太低了，低于檢測下限，就沒法檢測出來了。建議先增加蛋白用量，另外也要查詢打譜后的數據，看酶切處理是不是完全，有沒有可能是不完全酶切，導致大片段
PAGE凝膠快速銀染試劑盒操作手冊
PAGE凝膠快速銀染試劑盒貨號: G7210規格: 1L保存: 室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12個月。試劑盒內容： G7210硝酸銀 2g染色液A 100ml顯色液B 100ml顯色液C 100ml終止液D 100ml注：1L 規格指可配制的硝酸銀染色液的體積，實際使用次數根據PAGE
基于PCR的基因分型實驗—用銀染的方法無放射性的分析SSLP
實驗材料PCR 擴增 SSLP 的變性聚丙烯酰胺凝膠試劑、試劑盒乙醇硝酸硝酸銀染色溶液顯色液乙酸儀器、耗材Whatman 濾紙染色儀器80℃真空電爐實驗步驟1.電泳后，小心的打開儀器，分開玻璃板。將有膠的那塊板子放于染色一起的底部，仔細地將上面的架子和墊圈放置于膠邊緣的上面，擰緊閂子。膠里如果有小空
銀染核仁形成區的光鏡和電鏡標本制備及觀察
實驗原理?在細胞分裂中期核型中，人的端著絲粒染色體短臂區和在間期細胞核的核仁中有與銀離子特異親合物質，通過銀染可以顯示它們的致量，因此一直被人們所關注。近年來發現，雖然人的端著絲粒染色體短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位，稱核仁形成區(Nucleolar organizer
脂染介導的－DNA－轉染實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 指數生長的哺乳動物細胞培養物 試劑、試劑盒 脂染試劑 NaCl 枸櫞酸鈉
脂染介導的－DNA－轉染實驗
下述方法是 Mark Evans 所研究的一種方法的改進（Alexion Pharmaceuticals,New Haven,Connecticut)。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W.拉塞爾。實驗材料指數生長的哺乳動物細胞培養物試劑、試劑盒脂染試劑N
免疫組化雙染實驗protocol
第一抗體的染色：??1、?將切片浸在3％H2O2甲醇溶液（新鮮配制）中10分鐘，PBS沖洗2分鐘×3次??2、?加100ul（2滴）血清封閉溶液（試劑1）到切片上，室溫孵育10分鐘，倒掉（不能沖洗）??3、?加入一抗（按照說明推薦濃度和孵育條件）??4、?使用含有0.05％吐溫20的PBS(?TPB
免疫組化雙染實驗流程
一、脫蠟和水化方法同SP法。二、第一抗體的染色1、將切片浸在3%H2O2甲醇溶液（新鮮配制）中10 min，PBS沖洗3 min×3次；2、加100 ul（2滴）血清封閉溶液（試劑1）到切片上，室溫孵育10 min，倒掉（不能沖洗）；3、加入一抗（按照說明書推薦濃度和孵育條件）；4、使用含有0.05
異染顆粒染色配制及染色方法實驗
異染顆粒染色配制及染色方法實驗可以用于：（1）檢測白喉桿菌的存在；（2）異染顆粒與菌體對比度好。實驗方法原理用于白喉棒狀桿菌染色，異染顆粒可明顯地被顯示出來，標本直接涂片或細菌涂片均可用改良阿伯特法染色來觀察異染顆粒。實驗材料白喉桿菌試劑、試劑盒甲苯胺蘭孔雀綠冰醋酸乙醇儀器、耗材培養基載玻片實驗步驟
異染顆粒染色配制及染色方法實驗
實驗方法原理 用于白喉棒狀桿菌染色，異染顆粒可明顯地被顯示出來，標本直接涂片或細菌涂片均可用改良阿伯特法染色來觀察異染顆粒。實驗步驟 實驗試劑：甲液：甲苯胺蘭：0.15g ? 孔雀綠：0.2g冰醋酸： ? ?lml ? 95%乙醇：2ml蒸餾水： ?100ml將各染料先溶于乙醇，然后加入水與冰醋酸的
聚丙烯酰胺凝膠(PAGE膠電泳)電泳的方法與銀染方法
PAGE膠電泳（聚丙烯酰胺凝膠電泳 ）主要是以PAGE為介質，根據DNA分子大小和電荷分離DNA分子。PAGE膠電泳采用銀染法進行顯色。銀染的原理：一、銀離子（一般是AgNO3 )和DNA結合;二、還原劑甲醛把Ag+ 還原成銀顆粒，最終DNA呈現為黑褐色。聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持
DNA測序技術（非同位素銀染測序系統操作技術與T7－DNA聚...
3、質粒膜板制備：參照第一章所述的方法。（二）超螺旋質粒DNA 的堿變性：1、取4mg（約2pmol）超螺旋質粒DNA 至一eppendorf管中，加無離子水到終體積18ml。2、加2ml 2mmol/L NaOH/2mmol/L EDTA 溶液，置于室溫(25℃下）保溫5分鐘。3、加2ml 2mo
銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產品使用說明
主要用途YIJI銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑是一種旨在通過端粒酶體外合成端粒重復序列的引物延展方法，繼而進行多聚酶聯擴增反應，在非變性聚丙烯酰胺電泳上，通過經典的銀染技術，呈現六堿基相間的階梯圖像，以分析和評價活細胞端粒酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。廣
細胞凋亡檢測實驗——AnnexinVFITC－單染法
實驗方法原理細胞凋亡或稱程序性細胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是細胞的生命現象之一，它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴細胞的清除等方面起著十分重要的作用。細胞凋亡調節的失控可導致臨床各種疾病的發生。如老年性癡呆與神經細胞凋亡過度有關，自身免疫性疾病和腫瘤與
C280成像系統在考馬斯藍和銀染蛋白膠成像中的應用
Azure Biosystems c系列數字成像系列產品是行業領先產品，用戶界面友好、應用靈活。 在本應用中，我們展示了一些可以在c系列家族最新成員Azure Biosystems c280上完成的新應用。 簡介 Azure Biosystems c280數字成像儀是數字化學發光成像
DNA測序技術（非同位素銀染測序系統操作技術與T7－DNA...4
7. 在超純水中浸洗凝膠兩次，每次2分鐘，注意在本操作中戴手套拿著膠板邊緣避免在膠上印上指紋。8. 將凝膠置于室溫干燥或用抽氣加熱法干燥。在可見光燈箱或亮白，黃色背景(如紙)上觀察凝膠，若需永久保存的記錄，則可用EDF膠片保留實驗結果。[注意] 測序產物的銀染是顯現序列信息的一種新方法，本系統的成敗
DNA測序技術（非同位素銀染測序系統操作技術與T7－DNA...6
3、為阻止Taq DNA 聚合酶延伸非特異性退火引物， 熱循環儀必須預熱至95℃。溫度變換應越快越好。下面的循環時間不包括變溫時間。如果你無法確定使用何種模式，建議從模式1開始。 ? 模式1：適用于引物
C280成像系統在EtBr、SYBR－Green、考馬斯藍和銀染蛋白膠成像...
C280成像系統在EtBr、SYBR Green、考馬斯藍和銀染蛋白膠成像中的應用Azure Biosystems c系列數字成像系列產品是行業領先產品，用戶界面友好、應用靈活。 在本應用中，我們展示了一些可以在c系列家族最新成員Azure Biosystems c280上完成的新應用。簡介Azur
DNA測序技術（非同位素銀染測序系統操作技術與T7－DNA...7
在分子生物學研究中，DNA 的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于測序的技術主要有Sanger等（1977）發明的雙脫氧鏈末端終止法和Maxam和 Gilbert（1977）發明的化學降解法。這二種方法在原理上差異很大，但都是根據核苷酸在某一固定的點開始，隨機在某一個特定的堿基
DNA測序技術（非同位素銀染測序系統操作技術與T7－DNA...3
二、材料待測的DNA 模板，可用雙鏈或單鏈模板。 三、設備高壓電泳儀，測序用電泳槽，照相顯影用大號塑料盆，制膠設備，吹風機，放射自顯影盒，X-光片。 四、試劑 1、5×T7 DNA 聚合酶緩沖液：200mmol/L Tris?Cl，pH7.5，100mmol/L MgCl2，
DNA測序技術（非同位素銀染測序系統操作技術與T7－DNA...5
（三）電泳：1、預電泳（1）當凝膠聚合完全后，撥出鯊魚齒梳，將該梳子反過來，把有齒的一頭插入凝膠中，形成加樣孔。（2）立即將膠板固定在測序凝膠槽中，一般測序凝膠槽的上下槽是分開的，因而只有在固定好凝膠板后，方能加入TBE緩沖液。（3）稀釋10×TBE緩沖液至1×TBE，將該緩沖液加入上下二個電泳槽中
DNA測序技術（非同位素銀染測序系統操作技術與T7－DNA...2
（1）過夜培養的宿主細胞(如NM522或JM101)用3ml TYP肉汁培養基以1:100稀釋。在37℃強烈震蕩1小時之后，細胞進入對數早期。此時，將一個合適的含有重組M13的噬菌斑(連同瓊脂)用滴管轉入該細胞培養液中。（2）37℃強烈震蕩(300rpm) 培養6小時。（3）把細胞培養液轉入兩只1.
淺談預染蛋白Marker與未預染蛋白Marker
在Western實驗中，蛋白Marker可以監控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移，監控蛋白的轉膜效率，確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是western?blot實驗成功的必備條件之一。蛋白Marker分為兩種：一種是未預染的Marker，即寬分子量蛋白標準，高分子量蛋白標準及低分子量蛋
異染性染料
中文名稱異染性染料英文名稱metachromatic dye定 義使細胞或組織染色后顯示出顏色差異的染料。如甲苯氨藍、天青A等，它們可用于顯示肥大細胞硫酸黏多糖（肝素）的含量。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
鞭毛染色實驗——硝酸銀染色法
細菌的鞭毛很纖細，其直徑通常為 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少數能形成鞭毛束（由多根鞭毛構成）的細圈可以用相差顯微鏡直接觀察到鞭毛束的存在外，一般細菌的鞭毛均不能用光學顯微鏡直接觀察到，而只能用電子顯微鏡觀察。要用普通光學顯微鏡觀察細菌的鞭毛，必須用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，本實驗
核酸染色實驗——核仁組成區嗜銀蛋白
實驗方法原理核仁組成區是 DNA 的襻，具有核糖體基因（rDNA），在一定條件下可用銀反應法進行定位，是通過銀的聚合物沉積于胱氨酸和半胱氨酸的雙硫鍵位置上，所以在鏡下能夠清楚可見顆粒狀的核仁組成區嗜銀蛋白（AgNOR）。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水明膠粉雙蒸水硝酸銀儀
進行硝酸銀分解反應實驗時應如何控制實驗條件？
進行硝酸銀分解反應實驗時，控制實驗條件可以從以下幾個方面考慮：光照控制：選擇穩定且強度可調節的光源，如專用的實驗燈或可調節亮度的臺燈。保持光源與反應容器的距離固定，以獲得相對穩定的光照強度。如果研究不同波長光的影響，可以使用濾光片來獲取特定波長的光。溫度控制：盡量在恒溫環境中進行實驗，例如在恒溫箱或
如何通過實驗測定硝酸銀的摩爾質量？
以下是一種通過實驗測定硝酸銀摩爾質量的可能方法：準確配制一定濃度的硝酸銀溶液：使用分析天平精確稱取一定質量的硝酸銀固體，溶解在容量瓶中配制成準確濃度的溶液。進行沉淀反應：向一定體積的硝酸銀溶液中加入過量的已知濃度的氯化鈉溶液，發生沉淀反應：AgNO? + NaCl → AgCl↓ + NaNO? ，