組織的分離實驗_EDTA消化分離法
實驗方法原理EDTA是一種非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。關于EDTA的作用機制一般認為是:一些組織,尤其是上皮組織,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能維持組織的完整性。EDTA能從這些組織生存環境中吸收這些離子,形成螯合物,能促進細胞相互分離。EDTA 作用比胰蛋白酶緩和,很少用于單獨消化新鮮組織(傳代細胞可單用),如與胰蛋白酶按不同比例相混合并用,消化作用更好。EDTA 最適消化傳代細胞,也多與胰蛋白酶混合使用(1:1 或2:1)。實驗材料營養液試劑、試劑盒EDTA胰蛋白酶Hanks儀器、耗材恒溫箱吸管實驗步驟用ETDA 和胰蛋白酶混合消化法傳代的過程如下1. 吸出培養瓶內營養液,注入EDTA(0.02%)和胰蛋白酶(0.25%)混合液(1:1),注入量以能覆蓋細胞為度,置37 ℃溫箱或室溫中作用3 分~5 分鐘。在消化過程中,要在鏡下隨時監視細胞狀態,當見到細胞胞質回縮......閱讀全文
組織的分離實驗_EDTA-消化分離法
實驗方法原理EDTA是一種非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。關于EDTA的作用機制一般認為是:一些組織,尤其是上皮組織,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能維持組織的完整性。EDTA能從這些組織生存環境中吸收這些離子,形成螯合物,能促進細胞相互分離。EDTA 作
組織的分離實驗_胰蛋白酶消化消化分離法
實驗方法原理胰蛋白酶適于消化細胞間質較小的軟組織,如胚胎組織、羊膜、上皮組織、肝、腎等軟組織,對傳代細胞也非常好。用于消化纖維性組織或較硬的癌組織則較差。Ca2+和Mg2+對胰蛋白酶的活性有一定抑制作用,故需用不含這些離子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用,因此在做細胞傳代時,用胰蛋白酶消
組織的分離實驗_膠原酶消化分離法
實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性,但膠原酶對細胞間質有好的消化作用,可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害,效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗
組織的分離實驗_離心分離法
實驗方法原理如培養物為血液、羊水、腹水和胸水等細胞懸液時,可采用離心法分離。一般用低速500~1000 轉/分速度,離心5~10 分鐘即可。如懸液量大,離心時間可適當延長,但如離心速度過大和時間太長,易壓擠細胞使之受損或死亡。微量全血法淋巴細胞培養時,可不必進行淋巴細胞分離,可采用全血培養法。在需用
實驗中常用分離法介紹
蒸餾、升華、結晶、沉淀、溶劑萃取、離子交換、色譜分離、離心分離、電滲析、電化學分離方法、鹽析。
植物組織滲透勢測定質壁分離法
實驗概要本實驗介紹了植物組織滲透勢(osmotic potential)測定-質壁分離法的原理及操作步驟等。實驗原理將植物組織置于對其無毒害的一系列不同濃度的溶液里處理一定時間,然后鏡檢發生質壁分離的細胞數,通常視野中有50%的細胞發生質壁分離時定為初始質壁分離,細胞初始質壁分離時壓力勢為零,因而可
組織的分離實驗
機械分散法 胰蛋白酶消化消化分離法 膠原酶消化分離法 離心分離法 EDTA 消化分離法 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒
組織的分離實驗
試劑、試劑盒 Hanks儀器、耗材 鑷子網篩碟皿吸管注射器培養瓶實驗步驟 一、切割分離法在進行組織塊培養時,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的塊。具體操作如下:1. ?無菌切取1 cm3組織一塊,置入青霉素瓶或小燒杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或彎剪(剪柄較長為好)伸入容器中,反復剪切組
微生物分離純化實驗——平板劃線分離法
實驗方法原理該方法操作簡便,普通用于微生物的分離與純化。其基本原理包括兩方面:1. 選擇適合于待分離微生物的生長條件,如營養、酸堿度、濕度和氧等要求或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長,而抑制其他微生物生長的環境,從面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固體培養基上生長形成的單個菌落可以是由一個
微生物分離純化實驗——簡易單孢子分離法
實驗方法原理簡易單孢子分離法是一種不需顯微單孢操作器,直接在普通顯微鏡下利用低倍鏡分離單孢子的方法。它采用很細的毛細管吸取較稀的萌發的孢子懸浮液滴在培養皿蓋的內壁上,在低倍鏡下逐個檢查微滴。將只含有一個萌發孢子的微滴放一小塊營養瓊脂片,使其發育成微菌落。再將微菌落轉移到培養基中,即可獲得僅由單個孢子
植物組織滲透勢(osmotic-potential)測定質壁分離法
[原 理]將植物組織置于對其無毒害的一系列不同濃度的溶液里處理一定時間,然后鏡檢發生質壁分離的細胞數,通常視野中有50%的細胞發生質壁分離時定為初始質壁分離,細胞初始質壁分離時壓力勢為零,因而可把引起細胞初始質壁分離的外界溶液稱之為等滲溶液,其溶液具有的滲透勢即為細胞的滲透勢。由于很難正好找到引起5
薄層色譜分離法分離原理
薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
分離法之升華
升華固態物質不經液態直接轉變成氣態的現象,可作為一種應用固-氣平衡進行分離的方法。可分為常壓升華、真空升華和低溫升華。
薄層色譜分離法
(一)薄層色譜法的特點 設備簡單,操作方便。只須一塊玻璃板和一個層析缸。分析原理與經典柱上色譜相同、但是在敞開的薄層上可以檢查混合物的成分是否分開可觀察。快速,展開的時間短。比紙上色譜快速。一般紙上色譜需要幾小時至幾十小時薄層色譜一般只需十幾分鐘或幾十分鐘。使用無機吸附劑,薄層色譜可以采用腐
薄層色譜分離法
(一)薄層色譜法的特點 ??? 設備簡單,操作方便。只須一塊玻璃板和一個層析缸。分析原理與經典柱上色譜相同、但是在敞開的薄層上可以檢查混合物的成分是否分開可觀察。快速,展開的時間短。比紙上色譜快速。一般紙上色譜需要幾小時至幾十小時薄層色譜一般只需十幾分鐘或幾十分鐘。使用無機吸附劑,薄層色譜
分離法之蒸餾
蒸餾利用液體混合物中各組分揮發性的不同,將它們分離的方法和過程,它可以將液體混合物中各組分部分地或全部地分離。除了簡單的蒸餾技術外,還有分餾、減壓蒸餾、共沸蒸餾、水汽蒸餾、萃取蒸餾、等溫蒸餾和亞沸點蒸餾等。
生物樣品分離技術膜分離法
膜分離技術包括超濾、反滲析、電滲析、微孔過濾等。利用膜分離技術可將樣品小分子化合物和大分子的蛋白質很好地分離。超濾是一種除去樣品中蛋白質和其他大分子的方法,是能用分子分離的薄膜分離技術,依靠薄膜兩側壓力差作為推動力來分離溶液中不同分子量的物質。與沉淀法相比,其優點是適用于小量樣品,不用稀釋樣品也不用
從豌豆組織分離葉綠體實驗_葉綠體分離
實驗材料葉子組織試劑、試劑盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 制備 Percoll 梯度(1) 兩個 50 ml 的聚碳酸酯離心管中分別加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
電荷流分離法的概念
中文名稱電荷流分離法英文名稱charge flow separation;CFS定 義利用細胞表面的電荷不同,在電場力的作用下有不同的遷移速度而達到分離細胞目的的方法。是近年來發展起來的一種較新的方法,可以區分不同的細胞類型,而且分離迅速,被分離的細胞有活性,分離過程不需要抗體。應用學科細胞生物學
利用篩網的機械分離法
實驗方法原理用力使培養基中的組織通過一系列篩孔尺寸逐漸減小的篩網,直到產生單細胞或小組織塊的理想懸液,懸液可直接稀釋并培養。儀器、耗材生長培養基鑷子篩網皮氏培養皿手術刀一次性塑料注射器培養瓶實驗步驟1. 清洗后切割組織(見方案 12. 5 的步驟 1 和步驟 2),將組織切碎為 3~5 mm3?大小
利用篩網的機械分離法
方案12.9 利用篩網的機械分離法實驗方法原理用力使培養基中的組織通過一系列篩孔尺寸逐漸減小的篩網,直到產生單細胞或小組織塊的理想懸液,懸液可直接稀釋并培養。儀器、耗材生長培養基 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
生物分子的透析分離法
一、生物分子透析分離的原理:天然或人工半透膜只允許小分子通過而阻礙大分子通過,當膜的兩側存在小分子濃度差時,小分子從高濃度一側向低濃度一側擴散直到平衡。通過離心機分離不斷去除擴散出來的小分子,從而達到分離純化的目的。二、影響生物分子透析分離的因素:1、半透膜的通透性:半透膜的通透性取決于膜孔徑的大小
常用分離法蒸餾的分類
1.按方式分:簡單蒸餾、平衡蒸餾 、精餾、特殊精餾2.按操作壓強分:常壓、加壓、減壓3.按混合物中組分:雙組分蒸餾、多組分蒸餾4.按操作方式分:間歇蒸餾、連續蒸餾
常用分離法蒸餾的分類
1.按方式分:簡單蒸餾、平衡蒸餾 、精餾、特殊精餾2.按操作壓強分:常壓、加壓、減壓3.按混合物中組分:雙組分蒸餾、多組分蒸餾4.按操作方式分:間歇蒸餾、連續蒸餾
電荷流分離法的特點
中文名稱電荷流分離法英文名稱charge flow separation;CFS定 義利用細胞表面的電荷不同,在電場力的作用下有不同的遷移速度而達到分離細胞目的的方法。是近年來發展起來的一種較新的方法,可以區分不同的細胞類型,而且分離迅速,被分離的細胞有活性,分離過程不需要抗體。應用學科細胞生物學
常用分離法蒸餾的分類
1.按方式分:簡單蒸餾、平衡蒸餾 、精餾、特殊精餾2.按操作壓強分:常壓、加壓、減壓3.按混合物中組分:雙組分蒸餾、多組分蒸餾4.按操作方式分:間歇蒸餾、連續蒸餾
生物分子的透析分離法
一、生物分子透析分離的原理:天然或人工半透膜只允許小分子通過而阻礙大分子通過,當膜的兩側存在小分子濃度差時,小分子從高濃度一側向低濃度一側擴散直到平衡。通過離心機分離不斷去除擴散出來的小分子,從而達到分離純化的目的。二、影響生物分子透析分離的因素:1、半透膜的通透性:半透膜的通透性取決于膜孔徑的大小
利用篩網的機械分離法
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用力使培養基中的組織通過一系列篩孔尺寸逐漸減小的篩網,直到產生單細胞或小組織塊的理想懸液,懸液可直接稀釋并培養。 儀器、耗材
內電解分離法介紹
在酸性溶液中,利用金屬氧化-還原電位的不同,可以組成一個內電解池,即不需要外加電壓就可以進行電解。例如要從大量鉛中分離微量銅,在硫酸溶液中Cu比Pb先還原,因此可將鉛板作為一個電極,與鉑電極相連,組成一個內電解池,它產生一個自發的電動勢,來源于Pb的氧化和Cu的還原。這個電動勢使反應能夠進行,直到電
什么是膜分離法?
膜分離法 ( Separation Membrane) 氣體膜分離技術是20世紀70年代開發成功的新一代氣體分離技術,其原理是在壓力驅動下,借助氣體中各組分在高分子膜表面上的吸附能力以及在膜內溶解-擴散上的差異,即滲透速率差來進行分離的。現已成為比較成熟的工藝技術,并廣泛用于許多氣體的分離,提