細胞周期測定實驗——流式細胞儀測定法
實驗方法原理流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細胞柱。通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測,得到該細胞的光散射和熒光指標,分析出其體積、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等物理及化學特征。 細胞內的DNA含量隨細胞周期進程發生周期性變化,如G0/G1期的DNA含量為2C,而G2期的DNA含量是4C。利用PI標記的方法,通過流式細胞儀對細胞內DNA的相對含量進行測定,可分析細胞周期各時相的百分比。實驗材料HeLa細胞試劑、試劑盒乙醇RNase-APIPBS儀器、耗材流式細胞儀細胞培養設備離心機水浴冰箱注射器離心管封口膜微量移液器實驗步驟一、取對數生長期細胞,倒去培養液,胰酶適度消化細胞,用培養液吹打,800 rpm,離心 15 min去上清。 二、PBS洗2次,加0.5 mL PBS吹勻,務必吹散。&n......閱讀全文
細胞周期測定實驗——流式細胞儀測定法
實驗方法原理流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細胞柱。通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測,得到該細胞的光散射和熒光指標,分析出其體積、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等物理及化學特征。?
細胞周期測定實驗
細胞計數法 BrdU滲入法 流式細胞儀測定法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養細胞 生長、分裂繁殖的能力,可用分裂指數來表示。它與生長曲線有一定的
細胞周期測定實驗
細胞計數法 BrdU滲入法 流式細胞儀測定法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養細胞 生長、分裂繁殖的能力,可用分裂指數來表示。它與生長曲線有一定的
酶測定法實驗
在本單元中,用一種較簡單的方法測定它對核心 RNA 聚合酶自非特異性模板 poly(dAT) 起始轉錄的刺激作用。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒核心 RNA 聚合酶純σ32 標準品純化的 σ32 樣品核心 RNA 聚合酶-σ32 復合物樣品[α-32P]UTP終止液
酶測定法實驗
酶測定法實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 核心 RNA 聚合酶 純σ32 標準品 純化的 σ32 樣品
酶測定法實驗
試劑、試劑盒 核心 RNA 聚合酶純σ32 標準品純化的 σ32 樣品核心 RNA 聚合酶-σ32 復合物樣品[α-32P]UTP終止液DEAE-纖維素(DE81) 紙片P04 清洗緩沖液乙醇反應液儀器、耗材 水浴鍋實驗步驟 材料與設備核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)純σ32 標準品 (
細胞周期測定實驗(一)
標簽: 細胞周期 體外培養 周期測定細胞周期測定可以:(1)作為生物相容性評價指標;(2)用于研究細胞凋亡;(3)作為選擇細胞的依據。實驗方法細胞計數法BrdU滲入法流式細胞儀測定法實驗方法原理流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單
細胞周期測定實驗(二)
一、常見問題1. ?Q:要做胃粘膜組織的DNA含量及倍體檢查,但取材后要等幾個星期才會做流式細胞術檢查,請問:胃組織要怎樣保存好呢?用低溫保存,還是用乙醇固定?或者固定后再低溫下保存??A:我做過乳腺細胞的DNA含量測定,取得組織以后,先處理成單細胞懸液,然后再加70%冰乙醇固定,要保證冰乙醇的最終
實驗技巧:流式細胞儀細胞周期結果分析
張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。*張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比*張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期是基于細胞處于不同分
實驗技巧:流式細胞儀細胞周期結果分析
*張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。*張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比*張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期是基于細胞處于不同
活體細胞線粒體腫脹流式細胞儀測定法
主要用途? ? ? ?我 公司血液硫化氫含量比色法定量檢測試劑是一種旨在通過堿性苦味酸與肌酐反應,產生藍色產物所呈現的吸光峰值的變化,即采用比色法來測定樣品中硫化氫含量的而經典的技術方法。該技術經過精心改良亞甲基藍方法、成功實驗證明的。其適用于各種人體、動物血液(包括血清或血漿)樣品等硫化氫水平檢測
細胞周期測定實驗_細胞計數法
細胞周期測定可應用于:(1)作為生物相容性評價指標;(2)研究細胞凋亡;(3)作為選擇細胞的依據。實驗方法原理體外培養細胞 生長、分裂繁殖的能力,可用分裂指數來表示。它與生長曲線有一定的聯系,如隨著分裂指數的不斷提高,細胞也就進入了指數生長期。?分裂指數指細胞 群體中分裂細胞 所占的百分比,它是測定
細胞周期測定實驗——BrdU滲入法
實驗方法原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。?單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。?BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經
脲酶的測定實驗——光度計測定法
實驗方法原理實驗材料脲酶試劑、試劑盒磷酸鉀脲ADPNADHα-酮戊二酸谷氨酸脫氫酶脲酶儀器、耗材分光光度計實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 脲酶 25℃、340 nm 處吸收值降低,ε340=6.3×103?l/(mol·cm)。展開?注意事項其他試劑:
蛋白酶的測定實驗——Anson-測定法
實驗方法原理血紅蛋白不是很貴,被用來做這個實驗。由于處于天然結構的蛋白質通常可以抵制蛋白酶的攻擊,因此首先用尿素使血紅蛋白失活。分離非水解蛋白質后,利用 Folin-Ciocaheau 試劑的上清液測量消化產物。這種試劑優先識別色氨酸和酪氨酸,但是也可以識別半胱氨酸和組氨酸。'實驗溫度取決于
Fe(II)EDTA保護測定法實驗
Fe(II)-EDTA 能夠催化 RNA 或 DNA 的斷裂,是 RNase 保護分析的一個補充方法,其優點是很少或沒有堿基序列的特異性,其沿著整個長度的 RNA 或 DNA 鏈的剪切幾乎是一致的,它可被用于解釋一些 RNA 的較高級的折疊方式。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方
Fe(II)EDTA保護測定法實驗
實驗方法原理 Fe(II)-EDTA 能夠催化 RNA 或 DNA 的斷裂,是 RNase 保護分析的一個補充方法,其優點是很少或沒有堿基序列的特異性,其沿著整個長度的 RNA 或 DNA 鏈的剪切幾乎是一致的,它可被用于解釋一些 RNA 的較高級的折疊方式。試劑、試劑盒 RNA洗脫緩沖液退火緩沖液
Fe(II)EDTA保護測定法實驗
方案5.9 Fe(II)-EDTA保護測定法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Fe(II)-EDTA 能夠催化 RNA 或 DNA 的斷裂,是 RNase 保護分析的一個補
流式細胞儀細胞周期結果分析
第一張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。第一張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期?):21.7%第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比第一張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期?是基于細
蛋白酶的測定實驗——酪蛋白測定法
實驗方法原理實驗中的氨基酸由蛋白酶從酪蛋白中水解下來。在分離出 TCA 沉淀中未分解的蛋白質后,用分光光度測定的方法對其上清液分析,氨基酸來自于酪蛋白。依據酪蛋白校準曲線,已對其量化。這個鑒定不是很敏感。實驗材料酶樣品試劑、試劑盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物儀器、耗材分光
發光免疫測定法的實驗目的
中文名稱發光免疫測定英文名稱luminescent immunoassay;LIA定 義以發光物質標記抗原或抗體,免疫反應后引發發光反應,根據發光強度對抗體或抗原進行的測定。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
維生素B2-(核黃素)-熒光測定法實驗_熒光測定法2
實驗方法原理核黃素在pH 4~9 的條件下,用450 nm波長的光激發,可發出波長為520 nm的熒光。在核黃素的含量為0.1~10 μg范圍內,熒光的強度,與核黃素濃度成正比,硫代硫酸鈉可消除核黃素的熒光性。實驗材料核黃素試劑、試劑盒熒光紅鈉 硫代硫酸鈉 鹽酸儀器、耗材熒光分光光度計 容量瓶實驗步
維生素B2-(核黃素)-熒光測定法實驗_熒光測定法1
實驗方法原理核黃素能形成一種具有黃綠色熒光的黃色溶液。它在稀溶液中,440~500 nm波長下測定的熒光強度與核黃素的濃度成正比。根據其在還原后的熒光差數,可測定核黃素的含量。實驗材料核黃素試劑、試劑盒高錳酸鉀溶液 熒光紅鈉 硫代硫酸鈉 冰醋酸儀器、耗材熒光分光光度計 玻璃器實驗步驟溶液配制:1.
如何利用流式細胞儀檢測細胞周期
? ?? 首先我們這邊先來看下這樣的問題:新消化獲得的細胞直接染色立馬上機檢測,這一步是不是必須的?RnaseA的作用包不包括去處胞內的雙鏈RNA?是的話,RnaseA能直接穿膜嗎?不是的話,胞內的雙鏈RNA不管了?陰參的設定是不是健康成人外周血的淋巴細胞就可以了?? ? ? ?根據這樣的染色方法而
如何利用流式細胞儀檢測細胞周期
? ?首先我們這邊先來看下這樣的問題:新消化獲得的細胞直接染色立馬上機檢測,這一步是不是必須的?RnaseA的作用包不包括去處胞內的雙鏈RNA?是的話,RnaseA能直接穿膜嗎?不是的話,胞內的雙鏈RNA不管了?陰參的設定是不是健康成人外周血的淋巴細胞就可以了?? ? ? ?根據這樣的染色方法而定,
流式細胞儀細胞周期結果判斷QA
請幫忙分析一下第一張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。能說明轉染后的細胞增值能力強了嗎,怎么看出來的。據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比第一張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期是基于細胞處于不同分裂時期具有不同的DNA含量而分析細胞處于不同的時期的方法。確切的說結果
如何利用流式細胞儀檢測細胞周期
首先我們這邊先來看下這樣的問題:新消化獲得的細胞直接染色立馬上機檢測,這一步是不是必須的?RnaseA的作用包不包括去處胞內的雙鏈RNA?是的話,RnaseA能直接穿膜嗎?不是的話,胞內的雙鏈RNA不管了?陰參的設定是不是健康成人外周血的淋巴細胞就可以了?? ? ? ?根據這樣的染色方法而定,原理都
麻醉大鼠動脈血壓的測定實驗(直接測定法)
實驗材料 大鼠試劑、試劑盒 氨基甲酸乙酯戊巴比妥鈉普魯卡因注射液肝素儀器、耗材 大鼠實驗臺聚乙烯醫用塑料導管壓力換能器多通道生理信號采集記錄儀器實驗步驟 (1)頸總動脈測量動脈血壓:取體重為200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥鈉注射液0.2
麻醉大鼠動脈血壓的測定實驗(直接測定法)
實驗材料大鼠試劑、試劑盒氨基甲酸乙酯戊巴比妥鈉普魯卡因注射液肝素儀器、耗材大鼠實驗臺聚乙烯醫用塑料導管壓力換能器多通道生理信號采集記錄儀器實驗步驟(1)頸總動脈測量動脈血壓:取體重為200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥鈉注射液0.2ml/1
蛋白酶的測定實驗——偶氮酪蛋白測定法
實驗方法原理酪蛋白的敏感性鑒定可以通過這個實驗得到很大程度的改善。含氮的基團與酪蛋白的共價鍵被蛋白水解時切斷,用 TCA 上清液測定它們的顏色變化。實驗材料蛋白酶溶液試劑、試劑盒磷酸鉀偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸儀器、耗材分光光度計實驗步驟0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液