活化劑裂解方法制備細胞核實驗
用活化劑裂解方法從懸浮培養的HeLa細胞中制備細胞核實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒TM-2 緩沖液儀器、耗材塑料離心瓶Corex 管實驗步驟1. 轉瓶培養 4 升 HeLa 細胞，便細胞濃度達到 1.0x106 細胞/ml。2. 細胞在 1 L 的塑料離心瓶中，用 Sorvall 的 RC-3B 離心機，H-600A 轉頭，3000 r/min 離心 5 分鐘。3. 在 30 ml 的 Corex 管中，用 10 ml 冰預冷的 PBS 清洗各細胞沉淀。4. 細胞沉淀用 10 ml TM-2 緩沖液重懸浮，室溫孵育 1 分鐘。TM-2 緩沖液：0.01 mol/L Tris-HCl ( pH 7.4)0.002 mol/L MgCl20.0005 mol/L PMSF（臨用前添加）5. 將裝有 TM-2 懸浮液的試管放到一個含冰水的燒杯中冰浴 5 分鐘。6. 加入 Tritron X-100 至終濃度為 0.5%，......閱讀全文
活化劑裂解方法制備細胞核實驗
用活化劑裂解方法從懸浮培養的HeLa細胞中制備細胞核 實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 TM-2 緩沖液 儀器、耗材 塑料離心瓶Corex 管 實驗步驟 1. 轉瓶培養 4 升 HeLa 細胞，便細胞濃度達到 1.0x106?細胞/ml。
活化劑裂解方法制備細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 TM-2 緩沖液 儀器、耗材
活化劑裂解方法制備細胞核實驗
用活化劑裂解方法從懸浮培養的HeLa細胞中制備細胞核實驗材料HeLa 細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒TM-2 緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
活化劑裂解方法制備細胞核實驗
實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 TM-2 緩沖液儀器、耗材 塑料離心瓶Corex 管實驗步驟 1. 轉瓶培養 4 升 HeLa 細胞，便細胞濃度達到 1.0x106 細胞/ml。2. 細胞在 1 L 的塑料離心瓶中，用 Sorvall 的 RC-3B 離心機，H-600A 轉頭，3000 r/
制備細胞裂解液
實驗流程：1. 收集胰蛋白酶消化的細胞并離心，用PBS清洗。2. 用100μl 裂解緩沖液冰浴溶解沉淀10min（每500000個細胞20μl裂解緩沖液）。3. 10000rpm，4°C離心10min，取上清轉移至新管。4. 用考馬斯亮藍法檢測蛋白質濃度。5. 用裂解緩沖液將溶液濃度調到5mg/ml
細胞裂解液的制備
一、試劑準備1、新鮮配制冷的 RIPA 裂解緩沖液:? ?? ?150 mM NaCL? ?? ?1% NP-40 (去垢劑)? ??? ?? ?0.1% SDS (去垢劑)? ?? ?2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)? ?? ?2ug/ml Leupeptin (
細胞/組織裂解液的制備
溶液準備 2×樣品緩沖液：130mM Tris-HCl （ pH8.0 ） , 20% （ v/v ） 甘油 , 4.6% （ w/v ） SDS , 0.02% 溴酚藍 , 2%DTT PBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4 ，50
滲透溶脹法制備細胞核實驗
實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 Earle’s 平衡鹽溶液RSB 儀器、耗材 玻璃蓋玻片 實驗步驟 1. 懸浮培養出 HeLa 細胞，600 g 離心 5 分鐘收集細胞。 2. 沉淀細胞用 5 倍體積 4℃ 預冷的 Earle’s 平衡鹽溶液
從肝臟組織中制備細胞核實驗
實驗材料大鼠試劑、試劑盒裂解緩沖液濃蔗糖溶液儀器、耗材超速離心機組織研磨器實驗步驟1. 配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解緩沖液：0.25 mol/L 蔗糖網織紅細胞標準緩沖液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超級純）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
從肝臟組織中制備細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 大鼠 試劑、試劑盒 裂解緩沖液 濃蔗糖溶液
滲透溶脹法制備細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 Earle’s 平衡鹽溶液 RSB
滲透溶脹法制備細胞核實驗
用滲透溶脹法從HeLa細胞懸浮培養物中制備細胞核實驗材料HeLa 細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒Earle’s 平衡鹽溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
滲透溶脹法制備細胞核實驗
實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 Earle’s 平衡鹽溶液RSB儀器、耗材 玻璃蓋玻片實驗步驟 1. 懸浮培養出 HeLa 細胞，600 g 離心 5 分鐘收集細胞。2. 沉淀細胞用 5 倍體積 4℃ 預冷的 Earle’s 平衡鹽溶液重新懸浮。3. 重懸浮的細胞在 4℃，600 g 離心 5
細胞裂解方法：化學裂解、酶裂解和機械裂解
裂解方法包括化學裂解、酶裂解和機械裂解。化學裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法，通常會很少使DNA 斷裂。這兩種方法（包括SDS 和溶菌酶處理等）提取純化DNA中常用的方法。機械裂解可以更均一的裂解細胞，同化學裂解相比，機械處理具有更高的裂解效率和更低的選擇性。機械處理可以更劇烈和全面的裂解細胞，
苯的制備方法介紹蒸汽裂解
蒸汽裂解是由乙烷、丙烷或丁烷等低分子烷烴以及石腦油、重柴油等石油組份生產烯烴的一種過程。其副產物之一裂解汽油富含苯，可以分餾出苯及其他各種成分。裂解汽油也可以與其他烴類混合作為汽油的添加劑。裂解汽油中苯大約有40-60%，同時還含有二烯烴以及苯乙烯等其他不飽和組份，這些雜質在貯存過程中易進一步反應生
培養細胞標記和裂解物的制備實驗——溫和去污裂解法
實驗材料培養細胞試劑、試劑盒DMEMHClTBSTris儀器、耗材微量離心管Plexiglas盒吸頭細胞刮子冷凍離心機實驗步驟1. ?培養待標記的細胞至適當的生長期。?對于貼壁細胞：?2a. ?吸去培養液，用37℃的含血清不加標記物的標記培養液洗盡殘存的含磷酸鹽培養液，吸盡該培養液。?3a. ?加入
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
溫和去污裂解法 SDS煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 培養細胞 試劑、試劑盒
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
溫和去污裂解法 SDS煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 培養細胞 試劑、試劑盒
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
實驗材料?培養細胞試劑、試劑盒?DMEMHClTBSTris儀器、耗材?微量離心管Plexiglas盒吸頭細胞刮子冷凍離心機實驗步驟 1.? 培養待標記的細胞至適當的生長期。?對于貼壁細胞：?2a.? 吸去培養液，用37℃的含血清不加標記物的標記培養液洗盡殘存的含磷酸鹽培養液，吸盡該培養液。?3a.
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法小量制備質粒DNA
這個方法 [ 根據 Holmes 和 Quigley 的方法（1981) 修訂而成 ] 是將細菌懸浮于含有 Triton X-100 和能消化細胞壁的溶菌酶的緩沖液中，然后加熱到 100℃ 使其裂解。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法大量制備質粒DNA
實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處理可從大量（500 ml ) 細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒通過柱層析或 CsCl-溴化乙錠梯度離心可進一步純化。試劑、試劑盒抗生素乙醇異丙醇乙酸鈉STETTE溶菌酶儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培養液沸水浴實驗步驟一
不用Trizol裂解細胞提取RNA的方法
1、方法一試劑：（1）變性液組成：25 g異硫氰酸胍溶于33 ml CSB中（42 mmol/L pH4.0乙酸鈉、0.83%十二烷基肌氨酸鈉、0.2 mmol/L β-巰基乙醇），65 ℃溶解，過濾滅菌，4 ℃預冷。（2）酸性酚配制：55 ℃時，500 g酚溶入500 ml 50 mmol/L，p
紅細胞裂解的實驗方法步驟
IntroductionPrior to using lymphoid tissue cell suspensions for flow cytometric analysis and/or for?in vitro?functional assays, it is recommended to r
菌體/細胞裂解的常用方法和配方
、反復凍融法：1.? 將細胞在-20度以下冰凍，室溫融解，反復幾次，由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細胞結構破碎。2.? 至少3次以上凍溶。3.? IFCC推薦法：收集細胞懸液，4℃低溫離心（3000rpm，5min），棄上清，加入一定量PBS（200ul），輕輕吹打混勻，-2
菌體/細胞裂解的常用方法和配方
一、反復凍融法：1. ?將細胞在-20度以下冰凍，室溫融解，反復幾次，由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細胞結構破碎。2. ?至少3次以上凍溶。3. ?IFCC推薦法：收集細胞懸液，4℃低溫離心（3000rpm，5min），棄上清，加入一定量PBS（200ul），輕輕吹打混勻，-
SDS堿裂解法制備質粒DNA——中量制備
實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從中度規模（20~50 ml）的細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的 DNA 產物可用于電泳分析或限制性內切核酸酶消化，經柱層析進一步純化之后，還可用于轉染哺乳動物細胞。試劑、試劑盒堿裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培
SDS堿裂解法制備質粒DNA——小量制備
用堿和 SDS 處理可以從細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可以用電泳或限制性核酸內切酶消化的方法鑒定；經聚乙二醇處理進一步純化后，其可以用做 DNA 測序反應的模板。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從小量 ( 1~2 ml）細菌培養物中
SDS堿裂解法制備質粒DNA——大量制備
實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從大規模（500 ml）的細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或 CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化。試劑、試劑盒堿裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培養液實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶液(1) 堿
質粒的制備實驗——堿裂解法
實驗方法原理質粒是攜帶外源基因進入細菌中擴增或表達的主要載體，它在基因操作中具有重要作用。質粒的分離與提取是最常用、最基本的實驗技術。質粒的提取方法很多，大多包括3個主要步驟：細菌的培養、細菌的收集和裂解、質粒DNA的分離和純化。本實驗以堿裂解法為例，介紹質粒的抽提過程。在pH 12.0 ~ 12.
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗方法原理用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗步驟材料：緩