細胞RNA含量檢測
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細胞RNA含量檢測
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細胞RNA含量檢測
實驗步驟展開
細胞RNA含量檢測
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培養細胞中RNA檢測
實驗概要掌握培養細胞中RNA的檢測方法。實驗步驟1．制膠(1％)：??瓊脂糖 2.5g??? 10×Mops緩沖液 25.0ml??? H2O 192.0ml2．在微波爐中加熱煮沸使膠完全溶于水并滅菌。3．取出膠冷卻到60℃，于通風柜中加45ml甲醛，混勻。4．加20μl溴化乙錠，混勻。5．令膠液再
細胞RNA含量樣品的制備及分析
? ? ? ? ? ? 實驗材料 單細胞懸液 試劑、試劑盒 PY 試劑 醋酸緩沖液 磷酸
細胞RNA含量樣品的制備及分析
實驗材料單細胞懸液試劑、試劑盒PY 試劑醋酸緩沖液磷酸緩沖液DNA 酶消化液實驗步驟一、試劑配制1. PY 試劑的配制：PY 1.0 g 以 100 ml 蒸餾水溶解，配成母液，置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液：取 1 ml PY 母液，加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸緩沖液 100 ml
細胞RNA－含量樣品的制備及分析
實驗材料 單細胞懸液試劑、試劑盒 PY 試劑醋酸緩沖液磷酸緩沖液DNA 酶消化液實驗步驟 一、試劑配制1. PY 試劑的配制：PY 1.0 g 以 100 ml 蒸餾水溶解，配成母液，置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液：取 1 ml PY 母液，加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸緩沖液 100
細胞RNA含量樣品的制備及分析
細胞RNA含量樣品的制備及分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 單細胞懸液 試劑、試劑
培養細胞中RNA檢測－Northern－Blot
培養細胞中RNA檢測－Northern Blot1．制膠：（1％）瓊脂糖????????????????2.5g10×Mops緩沖液???25.0mlH2O???????????????192.0ml2．在微波爐中加熱煮沸使膠完全溶于水并滅菌。3．取出膠冷卻到60℃，于通風柜中加45ml甲醛，混勻。
動物組織/細胞總RNA的制備及檢測
實驗目的：使學生掌握采用Trizol抽提法從動物新鮮組織或細胞制備總RNA的實驗技術，以及用紫外分光光度法檢測RNA的純度及定量、用瓊脂糖電泳法檢測RNA的完整性及質量。實驗原理：Trizol是一種新型的總RNA即用型制備試劑，適用于從各種組織或細胞中快速分離總RNA。Trizol 試劑是由苯酚
活細胞RNA檢測－一步輕松實現
一提到RNA的檢測，大家的腦海中可能會立即浮現出：RT-PCR、FISH、Northern blot等。的確，這些都是檢測RNA的經典方法，但它們需要裂解、固定、RNA抽提等，頗為繁瑣。其實，RNA的檢測完全可以更smart。默克密理博最新推出的SmartFlare? RNA“靈光”技術
用細胞爬進行RNA－FISH檢測的實驗操作
用細胞爬片進行 RNA FISH 檢測的實驗流程?1. 細胞在蓋玻片上進行培養，細胞長好后用 CSK 緩沖液簡單洗滌。?2. 細胞爬片用 4% 多聚甲醛在 4℃ 固定 10 min。?3. 用含有 0.5% TritonX-100,，10 mM VRC 的 CSKBuffer 溶液在 4℃ 處理 1
如何測量RNA的純度和含量
RNA膠（凝膠成像）檢測。例如：原核生物的核糖體所含的rRNA有5S、16S及23S三種。在膠上就有三條明顯大小不一的條帶。凝膠遷移分析。可以用來研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是：結合了蛋白的RNA在凝膠中的遷移速率更慢，因而可以區分出結合蛋白與未結合蛋白的RNA條帶。RNA-seq即轉錄組測序
提取懸浮細胞RNA
提取RNA器械：離心管2支，吸管4個，酒精燈，打火機，記號筆，200ul,1000UL槍，DEPC泡過的槍頭EP管，紫外照過的手套。濾紙，DEPC純水（750ml無水乙醇＋150mlDEPC水,劇烈振蕩，使勁的搖晃，直至混勻），氯仿，75％酒精，異丙醇，Trizol，預冷的離心機（兩種），EP管架（
RNA提取心得（組織RNA提取和培養細胞的RNA提取）
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后
動物總RNA的提取及含量測定
一、實驗目的（1）了解制備RNA幾種方法的原理及優缺點（2）掌握稀堿法提取兔肝RNA的原理和操作技術二、實驗原理?細胞內大部份RNA均與蛋白質結合在一起，并且多以核蛋白的形式存在。因此，分離制備RNA時，首先遇到的是必須使RNA與蛋白解離，并除去蛋白質。由于RNA的種類來源和存在形式不同，所用的制備
地衣酚顯色法測定RNA含量
原理?核糖核酸與濃鹽酸共熱時，即發生降解，形成的核糖繼而轉變為糠醛，后者與3，5-二羥基甲苯（地衣酚）反應呈鮮綠色，該反應需用三氯化鐵或氯化銅作催化劑，反應產物在670nm處有最大吸收。RNA在20～250μ?g范圍內，光吸收與RNA的濃度成正比。地衣酚反應特異性較差，凡戊糖均有此反應，DNA和其他
細胞化學詞匯互補RNA
中文名稱：互補RNA英文名稱：complementary RNA定 義：能與另一條核酸(DNA或RNA)鏈互補的RNA分子。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
細胞化學詞匯RNA沉默
中文名稱：基因沉默外文名稱：RNA silencing定?????? 義：基因沉默是指在真核生物（植物、動物、真菌）中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。
細胞化學詞匯RNA靶向
中文名稱：RNA靶向英文名稱：RNA targeting定 義：(1)針對RNA分子設計的一種定向作用技術。包括一些小分子化合物(如抗生素)、反義核酸、反式作用核酶、適配體、干擾小RNA等的應用。(2)由于RNA分子本身具有較大的柔性，能專一地與RNA、DNA和蛋白質相互作用，而成為一種特異的靶向
細胞化學詞匯分支RNA
中文名稱：分支RNA英文名稱：branched RNA定 義：通過直鏈RNA中特定部位的2′-羥基與另一直鏈RNA(或同一RNA分子)的末端5′-磷酸基形成磷酸酯鍵而得到的RNA，見于Ⅱ型內含子自剪接和真核信使核糖核酸(mRNA)內含子剪接的中間體。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸
細胞化學詞匯RNA復制
中文名稱：RNA復制外文名稱：RNA replication定?????? 義：RNA復制是以RNA為模板合成RNA的過程，是除了逆轉錄病毒以外的其他RNA病毒的復制方式。有些生物,像某些病毒的遺傳信息貯存在RNA分子中，當它們進入宿主細胞后，靠復制而傳代，當它們以RNA模板時，在RNA復制酶作用下
細胞化學詞匯微RNA
中文名稱：微RNA外文名稱：microRNAs別?????? 名：又譯小分子RNA解?????? 釋：內生的長度約20-24個核苷酸小RNA所屬分類：真核生物定???????義：微RNA（microRNAs；miRNA，又譯小分子RNA）是真核生物中廣泛存在的一種長約21到23個核苷酸的RNA分子，
細胞化學詞匯核RNA
中文名稱：核RNA英文名稱：nuclear RNA定 義：細胞核內的RNA。如核內不均一RNA、核小RNA、核仁小RNA等。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
細胞化學詞匯RNA輸出
中文名稱：RNA輸出英文名稱：RNA export定 義：真核生物RNA從細胞核輸送到細胞質的過程。游離RNA及其前體是不能直接通過核孔的，需要與許多RNA結合蛋白生成核糖核蛋白復合體，才能輸出到細胞質行使功能。不同種類RNA需要不同的結合蛋白。核內的信使核糖核酸在切除內含子后才能輸出。應用學科：
細胞化學詞匯間隔RNA
中文名稱：間隔RNA英文名稱：spacer RNA定 義：初級轉錄物中由基因間序列編碼產生的RNA序列。如哺乳動物核糖體核糖核酸(rRNA)的初級轉錄物位于18S rRNA和28S rRNA間的一段序列，這些序列不出現在成熟的rRNA中。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級
細胞化學詞匯RNA重組
中文名稱：RNA重組英文名稱：RNA recombination定 義：RNA分子內或分子間發生的共價重新組合。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
細胞化學基礎轉移RNA
轉移RNA（tRNA）在蛋白質合成過程中負責轉運氨基酸、解讀mRNA遺傳密碼。tRNA占細胞總RNA的10%~15%，絕大多數位于細胞質中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和 Hoagland于1957年鑒定。1.tRNA一級結構具有以下特點：①是一類單鏈小分子RNA，長
細胞化學詞匯RNA構象
中文名稱：RNA構象英文名稱：RNA conformation定 義：RNA分子的空間結構，構象改變并不導致共價鍵的斷裂和生成。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
細胞化學詞匯RNA運輸
中文名稱：RNA運輸英文名稱：RNA trafficking定 義：將RNA引導到細胞的特定區域。細胞內的RNA運輸對細胞的生理功能至關重要。核內RNA運輸影響RNA的加工成熟和核輸出；胞質RNA運輸影響RNA的定位、運輸和基因表達的水平。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二