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  • 平滑肌細胞的分離和培養

    實驗材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液試劑、試劑盒平滑肌培養液儀器、耗材Petri培養皿手術刀和10號手術刀片解剖剪組織鑷實驗步驟1. 從小牛取胸主動脈。2. 將胸主動脈浸入 Hanks 液。3. 分離細胞之前將動脈放在冰上。4. 將動脈放入 150 mm × 25 mm Petri 培養皿。5. 用解剖剪沿長軸剪開動脈。6. 用手術刀片輕刮動脈內腔面,以除去內皮細胞。7. 將動脈的中膜與內膜和外膜分離。8. 將中膜切成約 1 cm2 大小的組織塊。9. 將中膜組織塊放入 60 mm × 15 mm Petri 培養皿,內膜側朝下。10. 讓組織塊貼壁約 10 min。11. 直接在組織塊上注 1 ml SMCM(平滑肌培養液(smooth muscle cell medium,SMCM):DMEM 添加 20 % FBS,100 U/ml 青霉素和 100 μg/ml 鏈霉素)。12. 將組織塊放入濕潤的培養箱,......閱讀全文

    平滑肌細胞的分離和培養

    實驗材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液試劑、試劑盒平滑肌培養液儀器、耗材Petri培養皿手術刀和10號手術刀片解剖剪組織鑷實驗步驟1. 從小牛取胸主動脈。2. 將胸主動脈浸入 Hanks 液。3. 分離細胞之前將動脈放在冰上。4. 將動脈放入 150 mm × 25 mm Petri 培養皿。5

    平滑肌細胞的分離和培養

    實驗材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒平滑肌培養液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?儀

    小鼠支氣管平滑肌細胞的分離培養方法

    平滑肌即無紋肌的通稱,平滑肌是由長紡錘形的單核細胞構成。它不構成獨立的器官,而只是成為構成體壁和內臟壁的因素(肌層)。平滑肌細胞互相連接,形成管狀結構或中空器官;在功能上可以通過縮短和產生張力使器官發生運動和變形,也可產生連續收縮或緊張性收縮,使器官對抗所加負荷而保持原有的形狀。小鼠支氣管平滑肌細胞

    平滑肌細胞培養方法

    貼壁法原代培養1.1 細胞培養1.1.1 培養液配制 DMEM(美國Gibco公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),鏈霉素(100mg/ml),優質胎牛血清(原代培養濃度20%,傳代培養濃度10%,美國Hyclone)。1.1.2 培養器皿 25cm2塑料培養瓶(Cost

    兔膀胱平滑肌細胞培養實驗——酶分離法

    兔膀胱平滑肌細胞培養可以:(1)分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞;(2)進行細胞學鑒定研究;(3)用于細胞學其他研究。實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長

    平滑肌細胞培養方法2

    1 材料與方法1.1 材料 9~12d新生健康清潔級KM小鼠,雌雄不限,購自重慶醫科大學實驗動物中心。RPMI-1640干粉培養基,D-Hanks粉,標準胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均購自Hy-Clone公司;青霉素鈉、硫酸鏈霉素購自華北制藥廠;鼠抗兔平滑肌α肌動蛋白單克隆抗體,購自Zymed

    平滑肌細胞培養方法4

    ?動脈平滑肌細胞培養的幾個問題組織塊大小邊緣密度翻面時間觀察時間對原代細胞萌發的影響對于貼塊法的原代培養來源,由于細胞并非直接獲得,而是從組織塊邊緣長出,其中有一“突破過程”,且細胞萌發后尚需一定的細胞密度才能使其存活、增殖,故組織塊大小、邊緣、密度均影響細胞萌出與否及細胞存活、增殖。公認的方法是將

    平滑肌細胞培養方法3

    2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來(見圖1),但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出,離組織塊較遠的區域也可以看到細胞,此為平滑肌細胞的漂移性生長特性(見圖2),細胞形態多樣,大小不一,多為長梭形

    兔膀胱平滑肌細胞培養

    實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況,同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析,并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒

    兔膀胱平滑肌細胞培養實驗

    酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離

    兔膀胱平滑肌細胞培養實驗

    酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離

    原代培養結腸平滑肌細胞(HCSMC)

    實驗步驟:(一)、取SD 大鼠一只,實驗時斷椎處死。(二)、在無菌條件下快速自肛門上2 cm 取結腸10 cm 左右,生理鹽水中反復灌腸沖洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 鏈霉素的HepesRinger緩沖液中浸泡,腸段內外各15 min。(四)、將經抗生素浸泡過的腸段移入

    雞胚胎成肌細胞的分離和培養實驗

    細胞培養物的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 HBSS 胰酶溶液 膠原溶液

    雞胚胎成肌細胞的分離和培養實驗

    細胞培養物的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 HBSS 胰酶溶液 膠原溶液

    人臍動脈平滑肌細胞培養實驗

    消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。

    人臍動脈平滑肌細胞培養實驗

    消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。

    基底動脈平滑肌細胞原代培養方法

    原代細胞培養:取5kg左右兔空氣栓塞法處死后斷頭,于無菌條件下從枕大孔處用大止血箝扳開顱骨暴露并小心取出腦組織放入裝有DMEM的培養皿中,用眼科鑷分離基底動脈后按常規平滑肌方法貼塊培養。傳代:(1)吸除培養瓶內舊培養液。(2)D-Hanks液沖洗2遍。(3)加入消化液少許,以能覆蓋瓶底為限。(4)倒

    大鼠主動脈平滑肌細胞培養

    實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料 SD大鼠試劑、試劑盒 PBSFBSDMEM儀器、耗材 手術剪手術鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術刀培養皿實驗步驟 一、實驗步驟1. SD 大鼠(150

    人血管平滑肌細胞的培養和保存要怎么做?

     人血管平滑肌細胞的培養操作步驟:  1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;?  2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板或培養皿中;?  3.在距離紫外燈直射范圍內20-30厘米處照射2-3小時;?  4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片完全浸在培養液中;? 

    心肌細胞的分離及培養材料和過程

    器械:飯盒、燒杯、彎頭解剖剪(2)、小鑷子(2)、平皿(4)、毛玻片、濾網、離心管(15ml)、移液管、培養瓶、廢液缸、PE手套、橡膠手套、冰盒溶液:PBS、DMEM(含血清)、DMEM(free)、胰酶動物:小鼠準備:用酒精棉球擦拭臺面后把物品擺放好,開紫外線燈照30分鐘后開鼓風機吹至實驗結束,提

    平滑肌細胞的結構和收縮的介紹

      平滑肌雖然也具有同骨骼肌類似的肌絲結構,但由于它們不存在像骨骼肌那樣平行而有序的排列(平滑肌的肌絲有它自己的“有序的”排列),它的特點是細胞內部存在一個細胞骨架,包含一些卵圓形的稱為致密體的結構,它們也間隔地出現于細胞膜的內側,稱為致密區,并且后者與相鄰細胞的類似結構相對,而且兩層細胞膜也在此處

    大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗

    貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。

    從成年骨骼肌分離和培養成肌細胞實驗——分離培養細胞

    骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞,可用于(1)肌細胞的結構研究(2)肌細胞功能研究(3)對肌細胞的相關課題研究(4)臨床細胞移植。實驗方法原理骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞。在培養條件下,成肌細胞仍繼續表達一些分化特征。成肌細胞稱衛星細胞,分

    關于平滑肌細胞的簡介

      平滑肌細胞是指構成平滑肌的組織。平滑肌即無紋肌的通稱,是被視為較橫紋肌原始的一種肌肉。平滑肌除作為無脊椎動物的軀體肌而有廣泛分布外,在脊椎動物除心肌之外而大部分內臟肌也是由平滑肌組成的。

    骨骼肌細胞培養和肌細胞培養

    骨骼肌細胞培養 1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。 2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養基加10%小牛血清培養,為促進分化可加1%的胎汁。 3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化

    人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——消化法

    人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原

    正常大兔主動脈平滑肌細胞培養

    實驗材料:1.?正常大兔主動脈2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.23.?消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%膠原酶Ⅰ4.?細胞培養瓶(T25)5.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.?網篩(100目)7.?離心管(15m

    正常大鼠原代主動脈平滑肌細胞培養

    一、實驗試劑?1、培養基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

    大鼠平滑肌細胞的另一種培養方法

    顯微器械:眼科剪一把,直彎眼科鑷各一把,細結鑷一把,手術刀一把,針頭諾干殺老鼠器械:手術剪一把,大鑷子一把,彎眼科鑷一把,組織鉗一把,50ml燒杯一個(錫紙包好)另外:10ml離心管兩個,培養皿兩個,10ml的瓶子三個,小濾器兩個,硅膠板一塊,培養瓶蓋子諾干貳。試劑D-HANKS液250ml,雙抗2

    雞胚胎成肌細胞的分離和培養實驗——細胞培養物的制備

    試劑、試劑盒HBSS胰酶溶液膠原溶液儀器、耗材解剖顯微鏡不銹鋼深盤Dumom 5 號鉗子柳葉刀精細彈簧剪紙巾大燒杯試管架移液管血細胞計數板實驗步驟器材準備1. 在培養室實驗臺上放置下列物品:解剖顯微鏡表面和透射照明用的顯微鏡燈泡裝有 70% 酒精的帶蓋不銹鋼深盤Dumom 5 號鉗子,至少兩把柳葉刀

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