核酸染色實驗——DNA
核酸是細胞內的一種大分子化合物,核酸不僅存在于細胞核內,也存在于細胞質中,動物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)。經過染料和化學試劑,能夠清楚地顯示 DNA 和核仁組成區嗜銀蛋白(AgNOR)物質。實驗方法原理在一般情況下,通過鹽酸水解后使 DNA 殘基分解堿基,然后從碳鍵處打斷糖苷鍵而游離出醛基,再與無色復紅液(Schiff)進行反應,形成紫紅色的復合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚爾根染色法)。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒Schiff 試劑染色液濃鹽酸蒸餾水二甲苯無水乙醇中性樹膠儀器、耗材滴管實驗步驟Schiff 試劑染色液(見糖原部分)。5mol/L 鹽酸液:濃鹽酸(相對密度 1.19)42 ml,蒸餾水加至 100 ml。1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。2. 蒸餾水洗 2 min,5mol/L 鹽酸液中水解 30 min。3. 蒸餾水......閱讀全文
核酸染色實驗——DNA
核酸是細胞內的一種大分子化合物,核酸不僅存在于細胞核內,也存在于細胞質中,動物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)。經過染料和化學試劑,能夠清楚地顯示 DNA 和核仁組成區嗜銀蛋白(AgNOR)物質。實驗方法原理在一般情況下,通過鹽酸水解后使 DNA 殘基
核酸染色實驗
實驗方法原理 在一般情況下,通過鹽酸水解后使 DNA 殘基分解堿基,然后從碳鍵處打斷糖苷鍵而游離出醛基,再與無色復紅液(Schiff)進行反應,形成紫紅色的復合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚爾根染色法)。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 Schiff 試劑染色
DNA核酸濃度的測定實驗
實驗方法原理 構成核酸的嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵,使核苷核和核酸在紫外線光具有特征性的吸收光譜,最大吸收峰為260nm。窄光帶紫外分光光度計,長260nm.,比色杯光徑1cm,1個吸光度值(1A)相當于50ug/ml雙螺DNA,40ug/m1單螺旋DNA或RNA),20ug/ml寡核苷酸實驗材料
DNA核酸濃度的測定實驗
DNA核酸濃度的定量實驗可以用于(1)對純化的PCR產物進行濃度測定;(2)對純化的酶切產物進行濃度測定;(3)對提取的質粒進行濃度測定。實驗方法原理寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA可以定量溶于緩沖液,構成核酸的嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵,使核苷核和核酸在紫外線光具有特征性的吸收光譜,最大吸收
DNA的化學檢測項目介紹核糖核酸染色
核糖核酸染色介紹: 核糖核酸在蛋白質合成中起重要作用,與細胞的分裂增生能力有密切關系,是細胞中的重要物質。與特殊染液作用后,可觀察其含量。核糖核酸染色正常值: 血細胞在發育和成熟過程中,核糖核酸的含量有明顯的規律性變化。原始階段的細胞核仁和胞質含有豐富的核糖核酸,至幼稚階段時核糖核酸的含量較前降
DNA熒光染色的樣品制備實驗
試劑、試劑盒PBS儀器、耗材DNA熒光染料流式細胞儀實驗步驟DNA是細胞內含量比較恒定的參量,隨著細胞增殖周期的各時相而發生變化。熒光染料(如PI)可選擇性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的雙螺旋堿基之間,與細胞特異性結合,DNA含量與熒光染料的結合量成正比,因此通過測定熒光強度可獲知細胞的增殖情況
DNA熒光染色的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PBS 儀器、耗材 DNA熒光染料 流式細胞儀 實驗步驟
DNA熒光染色的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PBS 儀器、耗材 DNA熒光染料 流式細胞儀 實驗步驟
核酸染色實驗——核仁組成區嗜銀蛋白
實驗方法原理核仁組成區是 DNA 的襻,具有核糖體基因(rDNA),在一定條件下可用銀反應法進行定位,是通過銀的聚合物沉積于胱氨酸和半胱氨酸的雙硫鍵位置上,所以在鏡下能夠清楚可見顆粒狀的核仁組成區嗜銀蛋白(AgNOR)。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水明膠粉雙蒸水硝酸銀儀
核酸的染色介紹
核酸染色法一般可將凝膠先用三氯乙酸、甲酸—乙酸混合液、氯化高汞、乙酸、乙酸鑭等固定,或者將有關染料與上述溶液配在一起,同時固定與染色。有的染色液同時染DNA及RNA,如stains-all、溴乙錠、掊花青-鉻礬法等,也有RNA、DNA各自特殊的染色法。1.RNA染色法(1)熒光染料溴乙錠(ethid
DNA的化學檢測項目介紹脫氧核糖核酸染色
脫氧核糖核酸染色介紹: 脫氧核糖核酸是組成細胞核的成分,與特殊染液作用,被染成淺紅色或紫紅色。脫氧核糖核酸染色正常值: 幼稚血細胞脫氧核糖核酸顆粒堆積、聚集、染色深、成熟血細胞脫氧核糖核酸顆粒分布均勻,細小,染色淺。脫氧核糖核酸染色臨床意義: (1)鑒別細胞的成熟程度,如小原粒細胞與成熟淋巴細
DNA裂解分析實驗_乙醇固定后PI染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒EDTA-PBS洗滌緩沖液乙醇RNA 酶PI 溶液儀器、耗材流式細胞計量術實驗步驟1. 在 5 mmol/L EDTA-PBS 中洗 1X106?細胞,重懸于 300 μl 洗滌緩沖液中。加 700 μl 100% 的冰冷乙醇,滴加,并輕微攪拌。旋轉攪拌混勻。2. 14000
核酸染色觀察及分布
DNA用甲基綠染色呈綠色,主要分布與細胞核,線粒體、葉綠體也有少量分布;RNA用吡羅紅染色呈紅色,主要分布在細胞質中。
微核實驗在染色體水平檢測DNA損傷實驗(二)
注意事項(1)在我們進行 CBMN 實驗過程中,最容易產生問題的是在玻片的制備和染色環節 ,因為計數結果的好壞依賴于制片的質量。主要注意事項:(a) 在將細胞置于玻片前應輕輕吹打,避免細胞結塊;(b)細胞密度適中,這樣才容易辨認細胞質邊界;(c) 在染色所有玻片前先試染一張,以確定染色合適。(2)要
微核實驗在染色體水平檢測DNA損傷實驗(一)
實驗步驟一、材料1. 胞質分裂阻滯微核試驗2. 微核的著絲點檢測(1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。(2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。(3) 過氧化物酶標記的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基聯苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于
DNA的限制性核酸內切酶酶切實驗和連接實驗
一)酶切實驗 本實驗學習用限制性核酸內切酶(Restriction endonuclease)EcoRI 切割λDNA及質粒pBR322DNA,瓊脂糖凝膠電泳后觀察酶切結果。? 【原理】? λDNA 是大腸桿菌的一種溫和噬菌體DNA,雙股線狀,分子大小為48.5 kb。 EcoRI酶可識別DN
DNA瓊脂糖核酸電泳
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 帶電荷的物質在電場中的趨向運動稱為電泳。核酸電泳是進行核酸研究的重要手段,是核酸探針、核酸擴增和序列分析等技術所不可或缺的組成部分。核酸電泳通常 在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進行,濃度不同的瓊脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子篩網
DNA瓊脂糖核酸電泳
1. 用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈,放在制膠平板上,封閉模具邊緣,架好梳子;2. 根據欲分離 DNA 片段大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的瓊脂糖凝膠:準確稱量瓊脂糖干粉,加入到配膠用的三角燒瓶內,定量加入電泳緩沖液(一般20~30 ml) ;3. 放入到微波爐內加熱熔化。冷卻片刻,加入一滴熒光染料
DNA瓊脂糖核酸電泳
核酸電泳是進行核酸研究的重要手段,可以用于:(1)核酸探針;(2)核酸擴增;(3)序列分析等技術。實驗方法原理帶電荷的物質在電場中的趨向運動稱為電泳。核酸電泳是進行核酸研究的重要手段,是核酸探針、核酸擴增和序列分析等技術所不可或缺的組成部分。核酸電泳通常 在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進行,濃度不同
FFPE樣本核酸(DNA/RNA)制備
福爾馬林固定、石蠟包埋(FFPE)組織切片的存檔代表了珍貴且來源廣泛的生物醫學研究材料。隨著越來越多的研究人員轉向 FFPE 樣品的分子分析,開發特定的操作步驟,考慮這些樣品的獨特性質就變得越來越重要。QIAGEN 在 FFPE 樣本純化及下游檢測整個流程中都提供完善的解決方案。QIAamp
核酸純度、濃度與分子量測定實驗——Ethidium-bromide染色法
實驗方法原理利用一系列不同濃度的DNA標準溶液(0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml),或已知濃度的DNA marker,和未知濃度DNA樣品一起進行瓊脂糖凝膠電泳,以EB染色后,在凝膠圖象分析儀上觀察,比較標準濃度及未知濃度的亮度,來求取DNA 的含量;比較DNA樣品與DNA
糖類染色實驗——糖原染色
實驗方法原理糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙重蒸餾水
核酸免疫實驗
基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 種DNA在免疫前應先閱讀動物處理(附 錄 2C) 和 接 種 的(附 錄 2E) 指導說明。在正式實驗之前需先進行肌肉和皮下注射練習; D N A 的精準注射對于免疫成功起關鍵作用。可以 用 India ink (或相同的染料)來定位注射的部位是否正確。材料2
核酸電泳實驗
瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度離心法)所無法分離的DNA片段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶EB(德元國際Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外
核酸免疫實驗
介紹了用表達抗原的 DNA 增強免疫應答的途徑。介紹了核酸免疫的兩種方法:①注射含有 DNA 表達載體的生理鹽水;② 用 基 因 槍 注 射 DNA。還包括了基因槍方法中使用的 DNA 包被金珠的制備和保存方法。實驗步驟基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 種DNA在免疫前應先閱讀動物處理(附 錄
染色體外DNA的定義
中文名稱染色體外DNA英文名稱extrachromosomal DNA定 義存在于染色體外的DNA。包括線粒體DNA、葉綠體DNA和質粒DNA等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
染色體外DNA的定義
中文名稱染色體外DNA英文名稱extrachromosomal DNA定 義存在于染色體外的DNA。包括線粒體DNA、葉綠體DNA和質粒DNA等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
DNA的Feulgen染色法
1.目的與原理實驗目的: 學習DNA的Feulgen染色方法,觀察染色結果,了解反應原理。實驗原理: DNA經弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤堿和脫氧核糖之間的鍵打開,使脫氧核糖的一端形成游離的醛基,這些醛基在原位與Schiff試劑(無色品紅亞硫酸溶液)反應,形成紫紅色的化合物,
染色體DNA的提取
一、實驗目的與原理DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學研究的主要對象。DNA的提取是分子生物學實驗技術中的最重要、最基本的操作。本實驗通過植物樣品在液氮下研磨以粉碎組織,通過裂解液裂解細胞,有機溶劑反復抽提,使DNA進入水相與蛋白質成分分開,在RNase作用下,降解RNA以純
DNA的Feulgen染色法
1.目的與原理 實驗目的: 學習DNA的Feulgen染色方法,觀察染色結果,了解反應原理。 實驗原理: DNA經弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤堿和脫氧核糖之間的鍵打開,使脫氧核糖的一端形成游離的醛基,這些醛基在原位與Schiff試劑(無色品紅亞