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    離子細胞化學實驗 ——鈣離子細胞化學具體方法

    離子細胞化學可用來顯示細胞內離子定位分布,目前用得比較多的是顯示細胞內鈣的分布,通常需結合EDX能譜分析。細胞內鈣離子分布是高度隔室化的,形成鈣離子濃度不同的鈣池,正常情況下,細胞內胞漿、線粒體、核等部位都有鈣的分布;在大多病理情況下(如缺血、缺氧、中毒等),細胞內鈣可升高,并且進入到細胞內的鈣很多進入到線粒體內。細胞內鈣離子細胞化學的原理是:首先用磷酸鹽或草酸鹽與鈣離子反應,在原位形成沉淀,然后再用焦銻酸鹽反應,替代磷酸鹽或草酸鹽形成焦銻酸鈣,焦銻酸鈣在電子顯微鏡下為電子致密物質。實驗材料組織試劑、試劑盒磷酸鉀戊二醛蔗糖焦銻酸鉀鋨酸實驗步驟1. 組織切成約 1 mm3 的小塊,用 0.09 mol/L 磷酸鉀(或草酸鉀)-3% 戊二醛(pH 7.3,用 0.1%~1% KOH 調 pH)固定 4 h 以上,4℃。也有人推薦固定早期用微波照射,以加速固定液滲入細胞內部(關于微波照射使用情況參見有關章節)。2. 固定后用......閱讀全文

    流式細胞術常用樣品的制備方法

    實驗概要流式細胞術的實驗檢測對象是單細胞懸液,因此,在組織化學和免疫組織化學實驗中欲對待測樣品細胞進行分類計數,也需把樣品制備成細胞懸液,并要求被檢細胞大小為0.2~80pm,每個樣品中至少有20 000個細胞,細胞濃度為105~107個/ml。制備成的單細胞懸液經熒光或免疫熒光標記即可上機檢測。本

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