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  • 體外培養細胞的染色體標本制備實驗

    實驗材料細胞實驗步驟1. 體外培養的細胞,在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞(傳代后24h,圓形發亮的細胞)時,加入秋水仙素溶液,終濃度為0.3μg/ml培養液; 2. 繼續培養3h; 3. 胰酶消化收集細胞至離心管; 4. 離心1000轉/min,離心10min,去上清; 5. Hanks液洗,離心,去上清; 6. 低滲處理:加入0.075mol/L KCl溶液8ml,置37℃恒溫水浴中30min,用吸管稍吹打(同上); 7. 固定及制片如外周血染色體的制備。 展開 注意事項1. 秋水仙素處理時間過長,分裂細胞多,染色體短小;反之,則少而細長,故秋水仙素的濃度及時間要準確掌握。 2. 固定液應在使用前臨時配制。 3. 載玻片一定要潔凈,否則染色體分散不好。 4. 染色體分裂指數低:患者處于非常時期(放、化療期......閱讀全文

    體外培養細胞的染色體標本制備實驗

    實驗材料細胞實驗步驟1. 體外培養的細胞,在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞(傳代后24h,圓形發亮的細胞)時,加入秋水仙素溶液,終濃度為0.3μg/ml培養液;?2. 繼續培養3h;?3. 胰酶消化收集細胞至離心管;?4. 離心1000轉/min,離心10min,去上清;?5. Hanks液洗,離心

    體外培養細胞的染色體標本制備實驗

    實驗材料?細胞實驗步驟?1. 體外培養的細胞,在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞(傳代后24h,圓形發亮的細胞)時,加入秋水仙素溶液,終濃度為0.3μg/ml培養液;?2. 繼續培養3h;?3. 胰酶消化收集細胞至離心管;?4. 離心1000轉/min,離心10min,去上清;?5. Hanks液洗,

    人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備

    實驗概要本文介紹了人外周血染色體制備和體外培養細胞染色體標本制備的原理、操作流程及注意事項。實驗原理人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下,人外周血小淋巴細胞都處在G1期(或G0期),但在體外給予一定的條件,進行培養,經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種

    人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備1

    一、 人外周血染色體制備實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下,人外周血小淋巴細胞都處在G1期(或G0期),但在體外給予一定的條件,進行培養,經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。在培養液中加入植

    人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備2

    ⑦ 再固定:加固定液8ml,混勻,固定10min。⑧ 離心:同上,吸去上清液。⑨ 制細胞懸液:根據細胞量多少,加入適量固定液,充分混勻,制成細胞懸液。⑩ 滴片:取出預先經冰水浸泡的載玻片,用吸管吸取混勻的細胞懸液在離冰片約30cm距離進行滴片,每片約滴2~3滴細胞懸液,使細胞較好分散。一般每一培養瓶

    正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備

    實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點,掌握其體外生長動態,取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面:1. ?結構異常 ?即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變,包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. ?數目異常 ?由于腫瘤細胞分裂失去應有

    染色體CBG標本制備實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色

    染色體CBG標本制備實驗

    實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部

    染色體GTG標本制備實驗

    非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G 帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪——曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。實驗方法原理非顯

    染色體GTG標本制備實驗

    實驗方法原理 非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪——曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著色

    染色體GTG標本制備實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GT

    羊水細胞染色體標本的制備

    一、原理????人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細

    羊水細胞染色體標本的制備

    一、原理人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細胞在再培

    正常細胞常規核型標本制備_人淋巴細胞染色體標本制備

    實驗方法原理在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質,使染色體清晰且分散良好。再結合離心技術去掉紅細胞碎片,然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標本。實驗材料HeLa細胞

    染色體提前凝集標本制備實驗

    基本實驗實驗方法原理七十年代初,由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子,它無種屬特異性,所以在細胞融合和染色體技術的基礎上,建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期(I期)細胞融合,從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyC

    染色體提前凝集標本制備實驗

    實驗方法原理七十年代初,由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子,它無種屬特異性,所以在細胞融合和染色體技術的基礎上,建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期(I期)細胞融合,從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyConde

    骨髓細胞染色體標本的制備

    一、原理骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者,特別是慢性或急性粒細胞性白血病,因為骨髓反映粒系統細胞增生情況,這些病人不宜用外周血。即使是淋巴細胞性白血病,也不主張用外周血,因為加PHA刺激外周血培養,只能獲得正常淋巴細胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變。骨髓細胞屬不斷增殖的細胞,培養

    經培養外周血細胞的染色體制備實驗

    盡管從其他細胞也可以制備染色體,但人類外周血白細胞是最容易同步化的,從而可以對其染色體進行高分辨分析。實驗材料用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.(25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清)

    經培養外周血細胞的染色體制備實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.(25U ?ml) 的注射 器 獲取肝素化的全血 試

    經培養外周血細胞的染色體制備實驗

    實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.(25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒 完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清)培養基100 X 植物血凝素氨甲蝶呤 脫氧胸嘧啶核苷秋水仙素氯化鉀固定劑儀器、耗材 無菌錐形聚丙烯

    正常細胞常規核型的標本制備實驗_微量全血培養

    正常細胞常規核型的標本制備可應用于:(1)進行核型分析;(2)與腫瘤核型進行對比研究。實驗方法原理采用微量全血培養人體外周血中淋巴細胞,在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的

    染色體CBG標本制備

    一、原理 ????異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗

    染色體GTG標本制備

    一、原理????非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪--曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著

    動物染色體標本的制備

    秋水仙素阻斷細胞分裂法 實驗材料 蟾蜍 試劑、試劑盒 秋水仙素 生理鹽水 甲醇 冰醋

    動物染色體標本的制備

    秋水仙素阻斷細胞分裂法 實驗材料 蟾蜍 試劑、試劑盒 秋水仙素 生理鹽水 甲醇 冰醋

    動物染色體標本的制備

    一、實驗目的1. 了解染色體標本制備的基本原理2. 掌握滴片法制備染色體標本的一般步驟二、實驗原理每一物種的細胞一般都具有一定數目、形狀和大小的染色體,在秋水仙素的作用下可使分裂細胞阻斷在中期,此時染色體形態最典型,然后通過低滲、固定、染色等步驟,便可在顯微鏡下呈現出其形態。三、實驗用品器具:顯微鏡

    染色體CBG標本制備實驗——基本方案

    實驗方法原理異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部分

    羊水標本的制備、培養和分析實驗

    實驗材料羊水試劑、試劑盒乙醇chang 培養基秋水仙胺低滲液甲醛 冰乙酸固定劑Permount 封固劑儀器、耗材用于細胞培養的20ml 注射器或試管15ml 離心管離心機蓋玻片巴氏吸管倒置顯微鏡精細鑷藍墊或紙巾玻片加熱器實驗步驟展

    整裝培養細胞生物膜系統的標本制備及觀察實驗

    實驗方法原理高錳酸鉀固定液能除掉細胞內的蛋白質成份,而保留膜的脂類成分,其結果,細胞骨架和細胞內可溶性蛋白質等被去除,增加了標本的透明度,同時內質網、線粒體、高爾基體、溶酶體等生物膜系統被完整地保存下來。高錳酸鉀固定劑在固定標本的過程中,能形成二氧化錳,可在細胞的各種膜結構的脂類親水端形成微細的沉淀

    整裝培養細胞生物膜系統的標本制備及觀察實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 高錳酸鉀固定液能除掉細胞內的蛋白質成份,而保留膜的脂類成分,其結果,細胞骨架和細胞內可溶性蛋白質等被去除,增加了標本的透明度,同時內質

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