正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備
實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點,掌握其體外生長動態,取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面:1. 結構異常 即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變,包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. 數目異常 由于腫瘤細胞分裂失去應有的調控,可出現亞二倍體、超二倍體和多一倍體數目異常現象。腫瘤細胞染色體制備技術在細胞生物學、醫學遺傳學的基礎研究和臨床診斷、愈后觀察等方面均有廣泛用途。實驗材料HL—60細胞HeLa細胞試劑、試劑盒640培養液肝素溶液秋水仙素胰蛋白酶EDTAPHAKCl甲醇冰醋酸Giemsa原液磷酸緩沖液生理鹽水儀器、耗材超凈臺鑷子離心機水浴箱天平離心管顯微鏡載玻片平皿實驗步驟1. 以1.6x 105個/ml 細胞濃度將FL-60細胞接種于培養瓶內。2. 48小時后以終濃度為0.04ug......閱讀全文
正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備
實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點,掌握其體外生長動態,取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面:1. ?結構異常 ?即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變,包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. ?數目異常 ?由于腫瘤細胞分裂失去應有
正常細胞常規核型標本制備_人淋巴細胞染色體標本制備
實驗方法原理在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質,使染色體清晰且分散良好。再結合離心技術去掉紅細胞碎片,然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標本。實驗材料HeLa細胞
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養人淋巴細胞染色體標本制備腫瘤細胞的染色體標本制備人體染色體常規核型的分析實驗方法原理采用微量全血培養人體外周血中淋巴細胞,在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
正常細胞常規核型的標本制備_人體染色體常規核型分析
實驗材料染色體儀器、耗材顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟一、人體染色體的觀察1. ?取制備較好的染色體玻片標本,先在低倍鏡下觀察。2. ?在標本中選擇一個染色體之間分散較好,互不重疊的中期分裂相,置于視野中央,然后換油鏡仔細觀察。3. ?每個染色體都含有兩條染色單體,兩單體連接處為著絲粒。4. ?計數時
正常細胞常規核型的標本制備實驗_微量全血培養
正常細胞常規核型的標本制備可應用于:(1)進行核型分析;(2)與腫瘤核型進行對比研究。實驗方法原理采用微量全血培養人體外周血中淋巴細胞,在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細胞在再培
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理????人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細
骨髓細胞染色體標本的制備
一、原理骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者,特別是慢性或急性粒細胞性白血病,因為骨髓反映粒系統細胞增生情況,這些病人不宜用外周血。即使是淋巴細胞性白血病,也不主張用外周血,因為加PHA刺激外周血培養,只能獲得正常淋巴細胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變。骨髓細胞屬不斷增殖的細胞,培養
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料細胞實驗步驟1. 體外培養的細胞,在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞(傳代后24h,圓形發亮的細胞)時,加入秋水仙素溶液,終濃度為0.3μg/ml培養液;?2. 繼續培養3h;?3. 胰酶消化收集細胞至離心管;?4. 離心1000轉/min,離心10min,去上清;?5. Hanks液洗,離心
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料?細胞實驗步驟?1. 體外培養的細胞,在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞(傳代后24h,圓形發亮的細胞)時,加入秋水仙素溶液,終濃度為0.3μg/ml培養液;?2. 繼續培養3h;?3. 胰酶消化收集細胞至離心管;?4. 離心1000轉/min,離心10min,去上清;?5. Hanks液洗,
染色體CBG標本制備
一、原理 ????異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗
染色體GTG標本制備
一、原理????非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪--曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備
實驗概要本文介紹了人外周血染色體制備和體外培養細胞染色體標本制備的原理、操作流程及注意事項。實驗原理人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下,人外周血小淋巴細胞都處在G1期(或G0期),但在體外給予一定的條件,進行培養,經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種
動物染色體標本的制備
秋水仙素阻斷細胞分裂法 實驗材料 蟾蜍 試劑、試劑盒 秋水仙素 生理鹽水 甲醇 冰醋
動物染色體標本的制備
秋水仙素阻斷細胞分裂法 實驗材料 蟾蜍 試劑、試劑盒 秋水仙素 生理鹽水 甲醇 冰醋
動物染色體標本的制備
一、實驗目的1. 了解染色體標本制備的基本原理2. 掌握滴片法制備染色體標本的一般步驟二、實驗原理每一物種的細胞一般都具有一定數目、形狀和大小的染色體,在秋水仙素的作用下可使分裂細胞阻斷在中期,此時染色體形態最典型,然后通過低滲、固定、染色等步驟,便可在顯微鏡下呈現出其形態。三、實驗用品器具:顯微鏡
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備1
一、 人外周血染色體制備實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下,人外周血小淋巴細胞都處在G1期(或G0期),但在體外給予一定的條件,進行培養,經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。在培養液中加入植
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備2
⑦ 再固定:加固定液8ml,混勻,固定10min。⑧ 離心:同上,吸去上清液。⑨ 制細胞懸液:根據細胞量多少,加入適量固定液,充分混勻,制成細胞懸液。⑩ 滴片:取出預先經冰水浸泡的載玻片,用吸管吸取混勻的細胞懸液在離冰片約30cm距離進行滴片,每片約滴2~3滴細胞懸液,使細胞較好分散。一般每一培養瓶
染色體CBG標本制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色
胸腹水染色體標本制備
一、原理????某些腫瘤細胞可脫落入胸腹水中,并繼續生長、增值。因此,由胸腹水細胞可制備較好的染色體標本。胸腹水細胞染色體分析對惡性腫瘤具有輔助診斷的價值。如分裂相多,異倍性,有結構畸變,常支持陽性診斷。二、用品和試劑????同外周血染色體制備。三、操作步驟????l.新鮮胸腹水20—40毫升,以1
染色體CBG標本制備實驗
實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部
染色體提前凝集標本制備
實驗方法原理 七十年代初,由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子,它無種屬特異性,所以在細胞融合和染色體技術的基礎上,建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期(I期)細胞融合,從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyCond
染色體GTG標本制備實驗
非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G 帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪——曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。實驗方法原理非顯
染色體GTG標本制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GT
染色體GTG標本制備實驗
實驗方法原理 非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪——曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著色
水稻根尖染色體標本制備
實驗概要? ? ? ? 水稻根尖染色體標本制備實驗步驟1.取材: 選取水稻種子,充分浸種后,將它們擺在鋪有濾紙的培養皿內,在約28℃條件下發芽培養,當胚根長至1~1.5cm時,剪下備用。2.預處理?? ? 壓片法:采用0.1%秋水仙素處理2h左右? ? 去壁低滲法可采用以下四種方法處理 ? ? ??
水稻根尖染色體標本制備
1.取材: 選取水稻種子,充分浸種后,將它們擺在鋪有濾紙的培養皿內,在約28℃條件下發芽培養,當胚根長至1~1.5cm時,剪下備用。2.預處理?壓片法:采用0.1%秋水仙素處理2h左右去壁低滲法可采用以下四種方法處理處理方法 0.002mol/L8-羥基喹啉 α-溴萘飽和溶液 低溫(-4℃) 卡諾氏
胸腹水染色體標本制備
某些腫瘤細胞可脫落入胸腹水中,并繼續生長、增值。因此,由胸腹水細胞可制備較好的染色體標本。胸腹水細胞染色體分析對惡性腫瘤具有輔助診斷的價值。如分裂相多,異倍性,有結構畸變,常支持陽性診斷。二、用品和試劑同外周血染色體制備。三、操作步驟1. 新鮮胸腹水20-40毫升,以1000rpm離心10分鐘。棄去