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    染色體CBG標本制備實驗

    基本方案 實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部分DNA,Giemsa染色后可見效果良好的C帶。 抽取DNA的過程由三個連續操作形成。首先,酸處理可使DNA脫嘌呤,但未使DNA骨架斷裂;其次熱堿處理可使DNA變性,促進繼發的DNA溶解;最后,熱鹽溶液使DNA骨架斷開并使碎片溶解進入溶液中。因此,最終以Giemsa染料顯示出DNA的不同分布。在優良的C帶標本中,常染色......閱讀全文

    染色體CBG標本制備實驗——基本方案

    實驗方法原理異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部分

    用比較基因組雜交描述染色體結構異常實驗

    實驗方法原理比較基因組雜交(CGH)是一種能夠在一步全基因組篩查程序,描述G帶不能發現的細胞遺傳物質增加或減少的分子細胞遺傳學技術。CGH優于進行全染色體涂染(wcp)的常規熒光原位雜交(FISH)和多色FISH之處,是它不僅能夠識別增加的未知片段的染色體來源,而且還可將該片段定位于特定的染色體區帶

    多重端粒熒光原位雜交實驗

    實驗方法原理實驗材料永生化淋巴細胞株試劑、試劑盒青霉素谷氨酰胺胎牛血清植物血球凝集素胸苷秋水仙胺KCl甲醇冰乙酸檸檬酸鈉SSC甘油生物素-16-dUTP地高辛-11- dUTP10 XdNTP 混合物儀器、耗材超凈臺細胞培養瓶Nunc 管培養基相差顯微鏡染色缸加熱板裝有Pinkel濾光片輪的CCD顯

    光譜染色體核型分析實驗

    基本方案             實驗方法原理 光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗

    光譜染色體核型分析實驗

    實驗方法原理光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗中可以觀察到每一條染色體。該技術以光譜成像和傅里葉光譜學原理為基礎。對流式分選的染色體進行PCR標記,直接標記熒光素或間接標記半抗原。5種光譜學不同的純色染料進行組合得到獨特的染色體探針混合物。探針混合物與中期染色

    FISH-熒光原位雜交實驗

    實驗概要通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原

    FISH-熒光原位雜交實驗(原位雜交)

    1. 實驗目的        通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理     &

    彩色顯帶實驗

    種間彩色顯帶技術是一種簡單快速地檢測用 G 顯帶無法識別的染色體異常的方法。當 GTG 顯帶不能給單條染色體涂染探針分析提供足夠線索時,該技術尤其有用。另外,彩色顯帶技術能夠檢測染色體內部的異常,如倒位、重復和用其他多重 FISH 技術(如 M-HSH 和 SKY) 不能檢測到的微小缺失。實驗材料常

    彩色顯帶實驗

                實驗材料 常規細胞遺傳學方法制備的染色體標本 試劑、試劑盒 RxFISH

    染色體 G 顯帶核型分析

    核型分析簡介染色體是細胞分裂期高度凝集的 DNA 蛋白質纖維,是間期染色質結構緊密盤繞折疊的結果。核型是指一個體細胞內的全部染色體按其大小、形態特征排列起來構成的圖像。將待檢細胞進行染色體數目、形態結構分析,確定其核型是否與正常核型一致,稱為核型分析。染色體核型分析,是遺傳學科學研究和輔助臨

    腫瘤細胞的熒光免疫表型和 FISH 共分析實驗

    染色體畸變通常在大多數血液腫瘤和各種實體瘤中檢測到,在臨床病理上,經常與判定腫瘤的直接形態和免疫表型特征有關。染色體畸變的檢測為逐條診斷和腫瘤遺傳分類奠定了基礎。尤其在白血病和淋巴瘤中,許多主要的染色體畸變與疾病的臨床分期有關。另外,在腫瘤預后過程中,還將發生其他染色體的畸變。因此,細胞遺傳學結果對

    組織學研究方法

    (一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混

    小白鼠骨髓細胞染色體制片技術

    實驗概要1、掌握哺乳動物骨髓細胞染色體玻片標本的制備方法。 2、觀察動物染色體的形態特征,統計小白鼠體細胞中染色體數目。實驗原理制備染色體標本是細胞遺傳學最基本的技術,優良的染色體制片是進行染色體顯帶、組型分析、原位雜交等的先決條件。 制備動物染色體標本原則上可以從所有發生有絲分

    染色體制備

    一、 人外周血染色體制備 1. 實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下,人外周血小淋巴細胞都處在G1期(或G0期),但在體外給予一定的條件,進行培養,經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。

    人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備

    實驗概要本文介紹了人外周血染色體制備和體外培養細胞染色體標本制備的原理、操作流程及注意事項。實驗原理人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下,人外周血小淋巴細胞都處在G1期(或G0期),但在體外給予一定的條件,進行培養,經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種

    妊娠產物及其他固體組織來源樣本的培養及制備實驗

    實驗材料組織樣本試劑、試劑盒含標準抗生素的 HBSS 溶液儀器、耗材完全培養基培養皿解剖器械塑料組織培養瓶實驗步驟基本方案1.用無菌解剖器械將組織標本放入含有5 mlHBSS及5倍濃度抗生素的35 mm 培養皿中。室溫下放置>30 min。2.將組織標本轉移至一個新的含有約 2 ml 完全培養

    多色熒光原位雜交實驗

                實驗方法原理 試劑、試劑盒 DAPI 復染液 乙醇 SSC

    姊妹染色單體互換標本制備與分析實驗

    姐妹染色單體是由一個著絲點連著的并行的兩條染色單體,是在細胞分裂的間期由同一條染色體經復制后形成的,在細胞分裂的間期、前期、中期成對存在,其大小、形態、結構及來源完全相同。實驗方法原理5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc簡稱BrdU)是胸腺嘧啶核苷的類似物。人體淋巴細胞在含有

    姊妹染色單體互換標本制備與分析實驗

    基本方案             實驗方法原理 5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc簡稱BrdU)

    姊妹染色單體互換標本制備與分析實驗

    基本方案             實驗方法原理 5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc簡稱BrdU)

    染色體G顯帶技術

    實驗概要本文介紹了染色體G顯帶技術的原理、實驗步驟及注意事項等。實驗原理人們用物理、化學因素處理后,再用染料對染色體進行分化染色,使每條染色體上出現明暗相間,或深淺不同帶紋的技術稱為顯帶技術(banding   technique)。染色帶的數目、部位、寬窄和著色深淺均具有相對穩定性,所以

    FISH 基本技術和問題解決

    熒光原位雜交(FISH) 技術可以對染色體、細胞和組織中的特異核酸序列進行檢測。明確檢測到全染色體或染色體某個特定區域的結構或拷貝數發生改變是人類疾病重要的預兆因子。應用于染色體分析的 FISH 可以分為中期 FISH 和間期 FISH,兩者的主要區別在預處理和雜交前的細胞制備工作。用于中期分析的細

    臨床分子病理實驗室二代基因測序檢測專家共識

      中華病理學雜志2017年3月第46卷第3期  近年二代基因測序(next-generation sequencing,NGS)技術快速發展,其應用已進展至臨床檢測,如遺傳疾病、實體腫瘤、血液腫瘤、感染性疾病、人類白細胞抗原分析及非侵襲性產前篩查等。國內外有關學會已出臺相關共識與指南以推動其在臨床

    常用的分子生物學基本技術

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    FISH 技術基本實驗

    實驗方法原理試劑、試劑盒70%乙醇SSC磷酸鹽緩沖溶液(PBS)Hemo-De清理試劑蛋白酶溶液儀器、耗材水浴鍋增濕器玻片實驗步驟一、制備培養的中期細胞標本1.在一個獨立小室里放置一個水浴鍋和一臺增濕器。濕度應大約50%,如果房間濕度計顯示低于45%,則應使用加濕器。2.預熱水浴鍋至67℃±2℃,在

    FISH 技術基本實驗

    基本方案             實驗方法原理 試劑、試劑盒

    姐妹染色單體分化染色實驗

    實驗方法原理細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體D

    應用細胞融合技術制備染色體提前凝集標本

    實驗概要通過細胞融合技術,初步了解染色體提前凝集標本制備原理、方法及間期細胞三種時相的提前凝集染色體特點。實驗原理在自然條件下或用人工的方法(物理、化學或生物)將兩個或兩個以上的同種或不同種細胞融合成一個細胞的過程稱為細胞融合。七十年代初,由于發現M  期細胞內有某種促進染色體凝集因子,它

    銀染核仁形成區的光鏡和電鏡標本制備及觀察

    實驗原理 在細胞分裂中期核型中,人的端著絲粒染色體短臂區和在間期細胞核的核仁中有與銀離子特異親合物質,通過銀染可以顯示它們的致量,因此一直被人們所關注。近年來發現,雖然人的端著絲粒染色體短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位,稱核仁形成區(Nucleolar orga

    PCR-ELISA端粒酶檢測法

    端粒是真核生物染色體末端的特異DNA-蛋白結構,端粒DNA是一系列重復的富含G的DNA序列,這一序列在生物進化中有高度的保守性(人重復序列為TTAGGG)。已確認端粒在保護基因組DNA不被降解、防止染色體有害的結合(如染色體末端融合、重排、染色體移位和染色體缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能復

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