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  • 醋酸鈉乙醇沉淀法核酸純化實驗

    實驗方法原理核酸是多聚陰離子的水溶性化合物,可以與許多1價、2價離子結合形成鹽類,后者在有機溶劑中不溶解也不變性.在較低溫度下形成沉淀.實驗材料待純化樣本試劑、試劑盒醋酸鈉緩沖液無水乙醇70%乙醇實驗步驟實驗試劑:1. 3mol/L醋酸鈉緩沖液,pH5.2:稱取醋酸鈉(NaAC·3H20)408.1g,由于800ml水中,用冰醋酸調節至pH5.2,加重蒸餾水至1000ml.分裝后高壓滅菌(以下稱3mol/L醋酸鈉緩沖液).2.無水乙醇及70%(V/V)乙醇.實驗操作:1. 將含核酸的溶液用移液器轉至一新的Eppendorf離心管,同時測量合算溶液的體積.2. 加入1/10體積的3 mol/L醋酸鈉緩沖液。使醋酸鈉的終濃度為0.3mo1/L.3. 下顛倒混勻后,準確加入2倍體積(RNA為2.5倍體積)的預冷無水乙醇,顛倒混勻,置冰浴中15-30 min或一20℃30 min。4. 4℃12000 r/min,離心15 min.5.......閱讀全文

    醋酸鈉乙醇沉淀法核酸純化實驗

    實驗方法原理 核酸是多聚陰離子的水溶性化合物,可以與許多1價、2價離子結合形成鹽類,后者在有機溶劑中不溶解也不變性.在較低溫度下形成沉淀.實驗材料 待純化樣本試劑、試劑盒 醋酸鈉緩沖液無水乙醇70%乙醇實驗步驟 實驗試劑:1. 3mol/L醋酸鈉緩沖液,pH5.2:稱取醋酸鈉(NaAC·3H20)4

    醋酸鈉乙醇沉淀法核酸純化實驗

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    DNA測序醋酸鈉/乙醇法純化PCR產物

      1. 將混合物離心,將擴增產物轉移到1.5 ml EP管中。  2. 加入25 μl醋酸鈉/乙醇混合液,充分振蕩,置冰上10 min以沉淀DNA。12 000 r/min于4℃離心30 min,小心棄上清。  3. 加70%(V/V)的乙醇50 μl洗滌沉淀2次。12 000 r/min于4℃離

    乙醇在核酸純化中的作用

    DNA在乙醇的溶解度很小,可以用來提純DNA,不過在用乙醇提純DNA之前要需要用的氯化鈉溶液,因為不同濃度的氯化鈉溶液,對DNA的溶解度不同,利用DNA的這種特性,先對DNA進行提純,到最后在用乙醇做最后的提純。

    沉淀DNA的實驗——乙醇沉淀法

    沉淀DNA的實驗可應用于分離DNA。實驗方法原理DNA 溶液是DNA以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混 合,其乙醇的最終含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代懈水乙醇(因為無水乙醇的價格遠遠比9

    乙醇沉淀法純化放射性標記的寡核苷酸實驗

    試劑、試劑盒 乙酸銨乙醇TE放射性標記的寡核苷酸純化的原料實驗步驟 材料溶液和緩沖液稀釋貯存液至適當濃度。乙酸銨(1mol/L)乙醇TE(pH7.6)核酸和寡核苷酸放射性標記的寡核苷酸純化的原料是方案 2(步驟 3 或步驟 5) 的反應混合液,T4 噬菌體多核苷酸激酶巳在 68°C 加熱后滅活。方法

    乙醇沉淀法純化放射性標記的寡核苷酸實驗

    如果放射性標記的寡核苷酸只是用作雜交探針的話,一般不必完全除去未摻入的放射性標記物。然而,為了使本底降至最低,應該將未摻入的大部分放射性標記物與放射性標記的寡核苷酸分離。如果寡核苷酸長度超過 18 個核苷酸(本方案),則絕大部分未反應的放射性前體物質可通過乙醇分級沉淀除去。本實驗來源于分子克隆實驗指

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    核酸分離純化實驗技術指南

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    乙醇分級沉淀法的原理

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    聚乙二醇沉淀法純化質粒DNA實驗

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    這種方法最早由 Richaed Treisman ( 英國,倫敦,ICRF) 參照 Lis 的工作而設計。Lis 是最早用聚乙二醇(PEG ) 分離不同大小 DNA 的人。Treisman 法被廣泛用于堿裂解法制備的質粒 DNA 的純化。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理這

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    核酸純化的原理

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