實驗概要免疫組織化學 (IHC) 是確定組織切片上是否存在蛋白及其位置的一種方法。盡管這種方法在定量分析時靈敏度較免疫印跡法或 ELISA 等免疫測定方法低,但它能了解整個組織的情況。適用于癌癥等疾病發展及治療情況的評估。因此,從 IHC 獲得的信 息結合顯微技術提供了一副“宏圖”,使來自其它方法的數據有據可依。免疫組織化學染色是抗體識別目標抗原的過程。抗體具有高度特異性,只與組織切片上相應的蛋白抗原結合。應用顯色檢測法即能顯示抗原-抗體反應,一種顯色方法是酶結合抗體作為底物,在蛋白抗原位點產生色素沉著,另一種方法是熒光檢測法,即 將熒光染料結合到抗體上,應用熒光顯微技術檢測。實驗步驟1. 固定正確的固定是免疫組織化學法的關鍵。最常用的是 10% 中性甲醛溶液 (NBF)。Abcam 說明書推薦 IHC-P 使用該固定劑,另有說明的除外。其它不常用的固定劑還有多聚甲醛 (......閱讀全文
腫瘤的個體化治療基因檢測已在臨床廣泛應用,實現腫瘤個體化用藥基因檢測標準化和規范化,是一項意義重大的緊迫任務。 為進一步提高腫瘤個體化用藥基因檢測技術的規范化水平,7月31日,國家衛生計生委個體化醫學檢測技術專家委員會,在廣泛征求意見的基礎上,制訂了《腫瘤個體化治療檢測技術指南(試行)》。
1:抗體查詢常用名詞Reactivity (物種與抗體反應):Species with which the antibody reactsHost Species (宿主):Host in which
免疫組織化學的概念: 免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學。 免疫組化實驗所用的抗體有哪些? 免疫組化實驗中
(6)結果判斷免疫組化的結果判斷有兩種方法:一是對以檢測結果陽性細胞指數來定性(如核抗原的標記),判斷方法是以一個規野中陽性細胞數不總細胞癿百分比,再取10個相同視野算取平均指數。另一種方法以染色陽性強度和陽性檢出率相結合而定,一般陽性細胞數在0-25為陰性,25-50為十,50-75為十十,75以
提到基因檢測,前幾年,臨床醫生在向患者推薦時還心存疑慮,而近兩年,基因檢測已成為癌癥診療的標準動作,基本上每一個癌癥患者都有一套自己的基因檢測報告。 不得不說,一個患者一套方案的個體化診療時代已經到來。比如,一位患者患了癌癥,不僅要做病理診斷還要做全基因檢測,發現突變位點,進而為患者制定包括化療
現今,科技發展的齒輪正在高速運轉,每隔2-3年就會出現一個重大的技術變革引領生命科學走向更精細、更微觀、更真實的水平,這其中也包括蛋白的研究。在疾病的致病機理、分子機制、信號通路、藥物篩選以及新型診斷標志物的發現中,傳統的蛋白研究“金標準”方法如Co-IP、Western blot、ELISA、
一抗的選擇要點1.選擇單克隆還是多克隆抗體?由一種B細胞產生的單一特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就像導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種B細胞產生抗體,形成抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中,一般單克隆
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它們都是用于定位檢測抗原表達的免疫檢測技術,由于技術相對簡單且直觀,在科研和臨床上都得到了大量使用。但是影響最終檢測效果的變量非常多;每一個具體的檢測都會遇到多個需要調整的變量。具體到選擇何種方法來保存組織樣本;固定標本該用醇還是醛;如何選擇最合適的一抗;抗原修
(8)熒光顯示: ①生物素標記DNA探針的熒光顯示。 1)應用PBS含5%無脂干奶(5μl每張蓋片),也可用1%牛血清白蛋白(BSA)-PBS覆蓋孵育5min室溫,以封閉非特異性結合部位。 2)移除多余液體,加抗生素-FITC(5μg/ml在PBS含5%奶粉或1%BSA,5μl/cm2)。在濕
2018年5月4日,北京——安捷倫科技公司(NYSE: A)日前宣布推出用于 Dako Omnis 的 EBER RNA CISH、κ 和 λ mRNA CISH 探針,以此擴展其原位雜交探針產品組合。此外還推出了用于淋巴瘤的手動 IQFISH 基因組合,該組合在歐洲擁有代表體外診斷的 CE 標
免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的一項技術。IHC的實驗流程和方法總體不難,但做出漂亮的染色結果卻不容易,
西土有一名寺,昂迪·賽司騰姆寺,有大師。一日,來了一位東土小鮮肉。鮮肉問大師:“學業有惑,可解?”大師反問:“你術業可是生物?”鮮肉驚奇:“是,大師神奇,何以得知?”大師指鮮肉鞋履:“鞋上兩塊藍斑,乃考馬斯亮藍,其漬尚新,你近來必在搗弄蛋白,對否?”鮮肉羞赧:“正是近日檢測蛋白,跑膠無數,不慎滴上。
前言制備高質量的病理切片需要一定的技巧和經驗—但我們都須從頭開始學習。該教程的目的是協助初學者熟悉石蠟切片的制備,以及作為經驗更豐富的技術專家的進修課程。涵蓋輪轉式切片機制備石蠟切片的設置和操作相關的基本內容。同時對切片過程中的部分常見故障進行具體說明,并提供故障排除建議。13學習厚薄一致、高質量、
基因擴增經常在人腫瘤細胞中被檢測到并在腫瘤發生中起重要的作用。用比較基因組雜交對腫瘤細胞進行全基因組掃描,揭示出在實體腫瘤基因組的許多區域有基因拷貝數的改變。對改變區域 DNA 的深入研究顯示在實體瘤中復雜的 DNA 重排涉及多個基因并跨越幾個 Mb。在染色體倍體變化中,經常伴有基因重排。盡管研究
試劑、試劑盒 胃蛋白酶 中性福爾馬林緩沖液 甲酰胺 乙醇
實驗方法原理LSAB 法或稱 S-P 法、SABC 法,它是采用生物素標記的第二抗體與結合有 HRP 或 AKP 酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質,相對分子質量 60000,不含糖鏈,等電點 pI 為 6.0~6.5
根據世界衛生組織(WHO)統計數據,全世界約有60%的人死于癌癥、糖尿病、心血管疾病、慢性呼吸系統疾病這4大類疾病,而癌癥則是最主要的死因之一。2008年全球死于癌癥的患者達760萬人,占全球死亡人數的13%,我國衛生部第三次全國死因調查結果也顯示,癌癥已成為我國僅次于心腦血管疾病的第二大死亡原
腫瘤異質性(Tumor heterogeneity)是腫瘤發生發展機制研究及腫瘤細胞根除治療方法探尋所面臨的巨大挑戰。腫瘤異質性廣泛存在于各種腫瘤(尤其是乳腺癌和前列腺癌具有高度異質性),但是檢測和評估方法尚欠缺。目前的技術如RT-PCR, gene chips, protein chi
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法,它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質,相對分子質量60000,不含
SPA 可為多種示蹤物(如熒光素、酶、膠體金、鐵蛋白)所標記,應用較廣泛的為酶標記 SPA 和金標記 SPA 技術。標記 SPA 常用的酶為 HRP,可應用于間接法染色,SPA 在 PAP 法中可代替橋抗體。實驗方法原理SPA 除與標記物結合后用于代替第二抗體外,其本身可作為橋抗體用于 PAP 染色
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突變和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表達和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
標簽: 組織病理組織學技術包括、組織學制片技術、胚胎學制片技術、組織化學技術、熒光組化及免疫組化技術、組織培養技術、各種特殊顯微技術、電鏡組織學技術。組織學技術不但應用于組織學本學科,并且廣泛應用于其他多學科,如生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等。實驗方法石蠟切片法冰凍切片實驗方法
分析測試百科網訊 在新冠肺炎COVID-19疫情肆虐全球之際,PCR技術在快速篩查中已大顯神威,但進入臨床后如何更早地區分輕癥和重癥患者,從而更準確地治療和用藥?5月27日中國研究人員在《Cell》發表文章,利用蛋白質組學和代謝組學的全景式分析,發現了重癥患者體內應對病毒進攻特征性的分子改變,并
一、實驗原理 顯微標本的制作技術是組織學,胚胎學,生理學及細胞學等學科研究觀察細胞、組織的生理、病理形態變化的一種主要方法。大多數的生物材料,在自然狀態下是不適合顯微觀察的,也無法看到其內部結構。因為材料較厚,光線不易透過,以致不易看清其結構,另外細胞內的各個結構,由于其折射率相差很小,即
一、實驗原理 顯微標本的制作技術是組織學,胚胎學,生理學及細胞學等學科研究觀察細胞、組織的生理、病理形態變化的一種主要方法。大多數的生物材料,在自然狀態下是不適合顯微觀察的,也無法看到其內部結構。因為材料較厚,光線不易透過,以致不易看清其結構,另外細胞內的各個結構,由于其折射率相差很小,即
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
什么是FFPE福爾馬林固定石蠟包埋技術(Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE)是一種組織保存技術。這種技術為了維持細胞核蛋白結構,先用福爾馬林固定然后將組織用固體石蠟包埋,以供切片后作組織學診斷或研究使用。FFPE技術的應用福爾馬林由于可以與蛋白氨基發
石蠟包埋組織的DNA提取蠟包埋組織DNA提取的基本方法影響DNA提取質量的因素提高DNA提取質量的方法 近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和
等電聚焦和二維凝膠電泳實驗 試劑、試劑盒 樣品緩沖液
對于復雜混合物,如全細胞裂解物或富集的亞細胞組分,通過兩步正交的分離 (orthogonalseperation),二維凝膠 (2D 膠)電泳可以很好地分離成幾百個至上千個單個蛋白質。第一次分離基于電荷,即使用變性等電聚焦電泳; 第二次分離基于表觀分子質量,即使用變性十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電