細胞培養常規操作
常規操作(主要內容如下)· Aseptic Technique· Culture Vessels· Cell Counting· Primary Culture· Maintenance of Cell Line · ......閱讀全文
細胞培養常規操作
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細胞培養常規方法
. 凍存細胞的復蘇應遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調至37-37。5度,取出凍存的細胞迅速放入后將細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化。在無菌臺內將完全培養基加入50ml的小培養瓶內,約5ml左右,然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞,置培養并內輕輕搖晃,使細胞均勻后置培養箱內培養。2. 傳代:對于貼壁細胞
常規細胞培養方法
原理?1? 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。???儀器、材料及試劑?儀器:培養箱(調整至37℃),培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗
常規細胞培養初代消化培養法
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。4.剪切:用眼科剪把
常規細胞培養初代消化培養法
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。4.剪切:用眼科剪把
婦產科手術操作常規
??? 第一章? 婦科手術操作常規??? 第一節? 婦科腹部手術常規??? 一、術前準備??? 1.血液:??? 1)血常規:超過一周者應復查。??? 2)血小板。??? 3)出凝血時間。??? 4)血型。??? 5)肝功能。??? 6)肝炎分型。??? 7)腎功能+離子。??? 8)梅毒+艾滋病毒
尿常規操作規程
(一)檢測原理 通過肉眼觀察判斷尿外觀。透明度,可分為清晰透明、輕度混濁(霧狀)、混濁(云霧狀)、明顯混濁4個等級。 (二)方法學評價 尿色和透明度判斷,受主觀因素影響。尿透明度還易受某些鹽類結晶的影響。臨床應用僅作參考。 (三)質量控制 1.使用新鮮尿尿放置時間過長,鹽類結晶析出、尿膽原
細胞培養的操作步驟
一、原代培養及其操作步驟原代分離細胞培養是指從供體內取出組織后,經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環境,在無菌、適當溫度和一定的營養條件下,生存、生長和繁殖。原代培養細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞
直流高壓發生器常規操作
1、設備連線: ? 在斷開電源的情況下,用提供的線纜將控制箱與倍壓筒對應連接好,再連接地線,然后接上電源線。 ? 注意:控制箱、倍壓筒、放電棒等所有的地線必須集中在被試品的地線上一點接地,不準相互串接。 2、直流高壓發生器空載試驗檢查設備完好性: ? 在開始試驗之前進行空載試驗以檢查設備的完好性。
洗板機常規安裝、操作與維護
洗板機是醫院檢驗科及實驗室的常規設備。以美國伯樂公司生產的1575型洗板機為例,闡述一下洗板機的操作使用、日常管理維護和故障排除,包括了開箱后對儀器的檢查、安裝,簡易操作、編程和一些維護方面的內容。1儀器的安裝和第一次開機1.1板機開箱后,先按以下清單對照,核對是否缺少物品,箱內應該包括有如下部件:
常規色譜柱的操作方法
安裝1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線,同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。2、為了使色譜柱與儀器系統達最佳的連接效果
2A1細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mL2A1細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約 8m
PA1細胞培養操作
PA-1細胞培養操作1)復蘇細胞:將含有 1mLPA-1細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250p
大鼠纖維環細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mL大鼠纖維環細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約
人腎實質細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mL人腎實質細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約 8
巨噬細胞培養操作方法
巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養,難以長期生存。 巨噬細胞也建有無限細胞系,大多來自小鼠,如P331、 S774A.1、RAW309Cr.l
WML2細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mLWML2細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約 8
細胞培養細胞培養的操作步驟及注意事項
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
常規恒溫搖床操作7步法
1.恒溫搖床翻開右側電源總開關,整機通電。2. 按溫度功能鍵,然后按參數修正/承認鍵,再按添加鍵至3.再按溫度功能鍵,儀器進入溫度參數設定狀況,顯現溫度的設定值,一起SV閃亮,按添加鍵或削減鍵改動溫度至所需數值,zui后按參數修正/承認鍵予以承認。3.按轉速功能鍵,然后按參數修正/承認鍵,再按添加鍵
常規恒溫搖床操作7步法
1.恒溫搖床翻開右側電源總開關,整機通電。2. 按溫度功能鍵,然后按參數修正/承認鍵,再按添加鍵至3.再按溫度功能鍵,儀器進入溫度參數設定狀況,顯現溫度的設定值,一起SV閃亮,按添加鍵或削減鍵改動溫度至所需數值,zui后按參數修正/承認鍵予以承認。3.按轉速功能鍵,然后按參數修正/承認鍵,再按添加鍵
全站儀的常規操作與使用
不同型號的全站儀,其具體操作方法會有較大的差異。下面簡要介紹全站儀的基本操作與使用方法。 1.全站儀的基本操作與使用方法 1)水平角測量 (1)按角度測量鍵,使全站儀處于角度測量模式,照準第一個目標A。 (2)設置A方向的水平度盤讀數為0°00′00″。 (3)照準第二個目標B,此時
腦脊液常規檢查的標準化操作
腦脊液常規檢查的標準化操作,適用于腦脊液的常規檢查(物理檢查、蛋白定性、細胞檢查);一、腦脊液標本的采集:?1.標本種類:腦脊液,由臨床醫師進行腰椎穿刺采集,必要時可從小腦延腦池或側腦室穿刺獲得。?2.標本要求:將腦脊液分別收集于3個無菌試管中,第一管作細菌培養,第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管
2B4細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mL2B4細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約 8m
RNc細胞大鼠皮質細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mLRNc細胞大鼠皮質細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,
細胞培養無菌操作技術規范
打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。 4.風淋2分鐘。 5.0.1%過氧乙酸水泡手,擦干。 6. 點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培
LLCMK2細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mLLLC-MK2細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入
原代神經細胞培養操作步驟
1.取出生后1-3天內的大鼠腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍體積的Hank液中,腦組織比較柔軟,反復吹打即可制成細胞懸液。 2.為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5~10分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等
人關節軟骨細胞培養操作
人關節軟骨細胞培養操作:1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,
細胞培養無菌操作注意事項
體外培養細胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是決定培養成功或失敗的首要條件。即便使用設備完善的實驗室。若實驗者粗心大意,技術操作不規范,也會導致污染。因而.為在一切操作中為大可能的保證無菌.每一項工作都必須做到有條不紊和完全靠。? ? 【培養前準備】在開始實驗前要制定好實驗計劃和操作程序。有關數據的計算
原代神經細胞培養操作步驟
1.取出生后1-3天內的大鼠腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍體積的Hank液中,腦組織比較柔軟,反復吹打即可制成細胞懸液。 2.為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5~10分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等