TUNEL方法
Terminal deoxynucleotidyl Transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) is an in situ method for detecting the 3'-OH ends of DNA exposed during the internucleosomal cleavage that occurs during apoptosis. Incorporation of biotinylated dUTP allows detection by immunohistochemical procedures. The labeled apoptotic cells may be visualized by light microscopy.Reference: Gavrieli ......閱讀全文
TUNEL－方法
Terminal deoxynucleotidyl Transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) is an?in situ?method for detecting the 3'-OH ends of DNA exposed dur
TUNEL檢測的實驗方法
對于貼壁細胞或細胞涂片a. PBS或HBSS洗滌一次。b. 如果細胞貼得不牢，可以干燥樣品使細胞貼得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生產的免疫染色固定液(P0098)固定細胞30-60分鐘。d. 用PBS或HBSS洗滌一次。e. 加入含0.1%?Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分鐘。f
TUNEL檢測的實驗方法
a. PBS或HBSS洗滌一次。b. 如果細胞貼得不牢，可以干燥樣品使細胞貼得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生產的免疫染色固定液(P0098)固定細胞30-60分鐘。d. 用PBS或HBSS洗滌一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分鐘。f. 轉步驟5。 a.
TUNEL檢測的實驗方法
a. PBS或HBSS洗滌一次。b. 如果細胞貼得不牢，可以干燥樣品使細胞貼得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生產的免疫染色固定液(P0098)固定細胞30-60分鐘。d. 用PBS或HBSS洗滌一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分鐘。f. 轉步驟5。 a.
TUNEL檢測的實驗方法
對于貼壁細胞或細胞涂片a. PBS或HBSS洗滌一次。b. 如果細胞貼得不牢，可以干燥樣品使細胞貼得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生產的免疫染色固定液(P0098)固定細胞30-60分鐘。d. 用PBS或HBSS洗滌一次。e. 加入含0.1%?Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分鐘。f
細胞凋亡（TUNEL，TUNEL染色）檢測技術
細胞凋亡是指為維持內環境穩定，??生物體內細胞在特定的內源或外源信號誘導下，其死亡途徑被激活，并在有關基因的調控下發生的程序性死亡過程。細胞凋亡是程序性死亡過程的一種主要形式，它涉及染色質凝聚和外周化、細胞質減少、核片段化、細胞質致密化、與周圍細胞聯系中斷、內質網與細胞膜融合，最終細胞片段化形成許多
TUNEL－labeling
In Situ Cell Death (Apoptosis) Detection by TUNEL labeling by Boehringer Mannheim (Catalog No. 1684809), modified by Josiah N. Wilcox and José C. Rod
TUNEL－assay
PROTOCOL:?Deparaffinize and rehydrate slides:3 x 3′ Xylene3 x 2′ 100% ethanol1 x 2′ 95%, 80%, 70% ethanol (each)1 x 5′ 1x PBS?Microwave antigen retrie
TUNEL分析實驗——組織切片的－TUNEL－染色
實驗材料組織試劑、試劑盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液儀器、耗材Parafilm 膜實驗步驟1. 取下組織，立即用新制備的 4% 甲醛固定，室溫過夜。用多聚甲醛制備 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通風櫥中加熱至 50~60℃，加幾滴 1
Tunel－Procedure－in－Bovine－Embryos－牛胚胎TUNEL檢測凋亡
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution:?Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go highe
TUNEL分析實驗——貼壁細胞的－TUNEL－染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSTdT 反應混合液儀器、耗材Parafilm 膜實驗步驟1. 用無菌鑷子將一無菌蓋玻片放入 35 mm 培養皿中。2. 將大約 1X104 細胞接種于無菌蓋玻片上，培養 24~48 小時。凋亡誘導時，細胞鋪滿不超過 80%。如細胞貼壁不太好，可以用纖連蛋白、聚賴氨酸或血
TUNEL分析實驗
組織切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式細胞計量術分析 貼壁細胞的 TUNEL 染色 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 組織
TUNEL分析實驗
組織切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式細胞計量術分析 貼壁細胞的 TUNEL 染色 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 組織
Detection－by－TUNEL－labeling
In Situ Cell Death (Apoptosis) Detection by TUNEL labelingby Boehringer Mannheim (Catalog No. 1684809), modified by Josiah N. Wilcox,José C. Rodriguez
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
原理 在細胞凋亡的過程中，基因組DNA會斷裂產生雙鏈、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段，這些DNA鏈的缺口可以利用沒標記法來識別。試劑盒就是通過催化DNA斷端，來標記缺口。酶底物顯色后，可以光鏡檢查被染色的細胞。
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
? ? ? ?細胞凋亡中染色體DNA的斷裂是個漸進的分階段的過程，染色體DNA首先在內源性的核酸水解酶的作用下降解為50-300kb的大片段。然后大約30?﹪的染色體DNA在Ca?2?和Mg2?依賴的核酸內切酶作用下，在核小體單位之間被隨機切斷，形成180～200bp核小體DNA多聚體。??????
TUNEL－PROCEDURE－IN－BOVINE－EMBRYOS
Materials 8% (w/v) paraformaldehyde stock solution:??Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go h
TUNEL－PROCEDURE－IN－BOVINE－EMBRYOS
Materials 8% (w/v) paraformaldehyde stock solution:??Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go h
TUNEL檢測的原理
細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfera
TUNEL分析實驗——TUNEL－染色的流式細胞計量術分析
實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒PBS甲醛檸檬酸鈉溶液儀器、耗材流式細胞計量儀實驗步驟1. 凋亡誘導之后，200 g 離心 5 分鐘收集 1X106?懸浮細胞，用冷的 PBS 洗 2 次，重復離心。2. 用 2 ml 2% 的甲醛 PBS 溶液固定細胞沉淀，室溫下在水平搖床上孵育 30 分鐘。3. 20
Apoptosis－TUNEL－assay－(Paraffin－Sections)
Protocol for Paraffin Sections: Dewax paraffin sections: Incubate slides, 55°C, 30 min. Xylenes, 2 times, 2 min. each 100% EtOH, 2 times, 2 min.
Apoptosis－TUNEL－Assay－(frozen－sections)
Protocol for Frozen Sections:Warm 150ml 4% Paraformaldehyde/1x PBS to RT. Fix slides in it, 20 min., RT.1x PBS rinse, 2 times.1x PBS, 30 min., RT. Beg
關于TUNEL檢測的介紹
基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TU
TUNEL檢測的實驗原理
細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfera
簡述TUNEL檢測的原理
細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfe
TUNEL檢測的實驗目的
基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素?(FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TUNE
TUNEL細胞凋亡檢測程序
實驗概要本實驗用TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測試劑盒檢測了組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。實驗原理其原理是熒光素（fluorescein）標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT Enzyme）的作用下，可
Whole－mount－TUNEL－analysis－of－Xenopus－embryos
Fixation and pretreatmentDejelly albino embryos carefully in 2% Cystein (pH 7.8).Remove the vitellin membrane with two pairs of tweezers???????? (or c
TUNEL檢測的常見問題
出現非特異性熒光標記a. 有些細胞或組織，例如平滑肌細胞或組織，nuclease或polymerase的酶活性水平較高，易導致出現非特異性的熒光標記。解決方法是，取細胞或組織后立即固定并且要充分固定，以阻止這些酶導致假陽性。b. 使用了不適當的固定液，例如一些酸性固定液，導致出現假陽性。建議采用推薦
TUNEL檢測的常見問題
a. 有些細胞或組織，例如平滑肌細胞或組織，nuclease或polymerase的酶活性水平較高，易導致出現非特異性的熒光標記。解決方法是，取細胞或組織后立即固定并且要充分固定，以阻止這些酶導致假陽性。b. 使用了不適當的固定液，例如一些酸性固定液，導致出現假陽性。建議采用推薦的固定液。c. TU