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  • 核酸抽提

    最糟糕的心態 - 實驗失敗了,抱怨試劑不好。實驗人員本來是應該擁有修正主義、機會主義、懷疑論等諸多“不完美的”意識,所以一定要用“完美的”自我批評意識來平衡。我為什么沒有一雙慧眼選擇可靠的供應商?我為什么不做預實驗檢測所購試劑?最糟糕的知識 - RNase A 的作用。RNase A 是內切酶,內切酶的作用結果是產生片段,而不是單個核苷酸,所以,RNase A 作用于 RNA 的結果是:大的 RNA 變成小的 RNA。為什么不同批次或者不同公司的 RNase A 消化 RNA 的結果不一樣呢?因為 RNase A 的純度不同:RNase A 純度越高,則RNA 殘留的片段就越大!事實上,RNase 的粗制品去除 RNA 的效果是最徹底的,但現在幾乎沒有公司銷售了,可能的原因,一是生產粗制品成本更高,二是其中的雜質可能對 DNA 的完整性有影響。最糟糕的試劑 - 水。水是所有實驗都必須用到的試劑,但卻沒有人將她當做試劑。復旦的蒸餾......閱讀全文

    核酸抽提

    mRNA的分離?與rRNA和tRNA不同的是,哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在構建cDNA文庫時,?必須經上述純化步驟制

    核酸抽提

    最糟糕的心態 - 實驗失敗了,抱怨試劑不好。實驗人員本來是應該擁有修正主義、機會主義、懷疑論等諸多“不完美的”意識,所以一定要用“完美的”自我批評意識來平衡。我為什么沒有一雙慧眼選擇可靠的供應商?我為什么不做預實驗檢測所購試劑?最糟糕的知識 - RNase A 的作用。RNase A 是內切酶,內切

    細菌的核酸抽提

    DNA Extraction·?????????DNA Extraction from Bacteria?(Julie B. Wolf,UMBC)Phenol/chloroform method·?????????DNA Extraction From Bacteria (Triton Method

    醇化辦法核酸抽提

    醇化辦法核酸抽提???????PC?抽提/醇沉淀辦法,是一個永不陳舊辦法。牢穩、靠得住、經濟、便捷。PC?抽提可以徹底去除氨基酸,醇沉淀可以去除鹽,對于普通的整潔的樣品(雜質為氨基酸),該辦法足以取得高品質的核酸。固然每每PC?抽提都會虧損一小批核酸(由于沒可能將水相所有移取),以及低液體濃度核酸的

    裂解辦法抽提核酸

    裂解辦法抽提核酸含蛋白酶的裂解辦法,還是可以覺得是抽提基因組DNA?的首選。裂解涵蓋膜蛋白的游離和與基因組DNA?銜接接的氨基酸的游離。蛋白酶的效用是使氨基酸變小,因而對氨基酸的游離有很大的增進效用;同時,很大的基因組DNA?是很容易“纏”住大分子的物品的,氨基酸被蛋白酶克化變小后,則不由得易被基因

    CTAB法抽提核酸

    CTAB 法 ①取0. 2g 各中藥材樣品分別用液氮( Ⅰ) 、玻璃砂( Ⅱ) 、氧化鋁( Ⅲ) 研磨。②加入56 ℃ 10 倍預熱的緩沖液C 于56 ℃溫育30 min , 離心, 取上清液加入等體積氯仿- 異戊醇(24∶1) 抽提(室溫, 不能低于15 ℃, 否則CTAB 會沉淀) , 10 0

    全自動核酸抽提儀

      全自動核酸抽提儀是一種用于基礎醫學、臨床醫學領域的分析儀器,于2016年10月25日啟用。  技術指標  1.采用QIAGEN硅膠膜離心柱技術,2.針對多種生物樣本(包括全血、血漿、血清、尿液、糞便、細胞和FFPE組織或新鮮組織等),可以實現對基因組DNA,病毒核酸,質粒DNA,microRNA

    核酸抽提經驗及原理

    1、核酸抽提原理?簡單地講,核酸抽提包含樣品的裂解和純化兩大步驟。裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程,純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分,如蛋白質、鹽及其它雜質徹底分離的過程。 經典的裂解液幾乎都含有去污劑 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和鹽

    核酸的抽提mRNA提取分離技巧

    與rRNA 和tRNA 不同的是,哺乳動物細胞的絕大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA 中分離mRNA dmonds等,1971;At Leder,1972)。在構建cDNA文庫時, 必須經上述純化步驟制備mRNA

    DNA抽提

    DNA抽提(主要內容如下)·???Working with DNA·???DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms·???DNA Extraction from Cell and Tissue·???Mitochondria DNA Isola

    血與淚的RNA抽提抽提經驗

    對大部分實驗人員來說,RNA 抽提比基因組 DNA 抽提要困難得多。事實上,現有的 RNA 抽提方法/試劑,如果用于從培養細胞中抽提 RNA,比抽提基因組 DNA 更方便,成功率也更高。那為什么同樣的方法用于組織 RNA 的抽提,總會碰到問題呢?組織 RNA 抽提失敗的兩大現象是: RNA 降解和組

    RNA抽提經驗

    對大部分實驗人員來說,RNA 抽提比基因組 DNA 抽提要困難得多。事實上,現有的 RNA 抽提方法/試劑,如果用于從培養細胞中抽提 RNA,比抽提基因組 DNA 更方便,成功率也更高。那為什么同樣的方法用于組織 RNA 的抽提,總會碰到問題呢?  ?組織 RNA 抽提失敗的兩大現象是:

    基因組純化之ABI篇-MagMAX核酸抽提系統

    摘要: Life Technologies公司旗下的ABI推出了MagMAX? 核酸抽提系統,致力于解決所有這些問題,同時為了便于自動化,不使用有機溶劑或者核酸沉淀試劑。該系統采用微磁珠代替濾膜,可消除濾膜核酸分離方法的常見問題,如濾膜堵塞,洗脫體積過大,抑制劑清除不徹底,以及回收率不一致等。??從

    脂肪抽提儀開展脂肪抽提的四個步驟

    脂肪抽提儀是 基于索氏抽提法原理研發生產的一款脂肪測定儀器。由于索氏抽提具有方便快捷的特點,因此脂肪抽提儀采用該原理來測定食品中的脂肪含量等,會更有優勢,應用 會更加廣泛。脂肪抽提儀的工作過程是通過在適當的溫度下試劑對樣品的浸提,最終實現目標物(如脂肪)的分離。應用脂肪抽提儀開展脂肪抽提,主要可以為

    抽提萃取法展望

    展望編輯萃取作為分離和提純物質的重要單元過程,今后還會得到進一步的發展,其主要發展方向是:(1)研究新的萃取體系和新的萃取工藝;(2)合成和篩選高效萃取劑;(3)研究與發展新型萃取設備,重點應放在設備的自動化、連續化上;(4)開展萃取機理及理論的研究。?[2]?

    抽提萃取的特點

      提取親水性強的皂甙則多選用正丁醇、異戊醇和水作兩相萃取。不過,一般有機溶劑親水性越大,與水作兩相萃取的效果就越不好,因為能使較多的親水性雜質伴隨而出,對有效成分進一步精制影響很大。

    抽提萃取的分類

      萃取的機理既有物理的溶解作用,又有化學的配合作用,是一個復雜的物理溶解過程 。一般而言,萃取那些簡單的不帶電荷的共價分子時為物理溶解過程。但在大多數情況下,被萃取物與有機相中一種或多種組分發生化學變化,生成新的化學物種后被萃入有機相,這便屬于化學過程。按照萃取機理的不同,可分為五種類型:  (1

    抽提萃取的概念

      利用化合物在兩種互不相溶(或微溶)的溶劑中溶解度或分配系數的不同,使化合物從一種溶劑內轉移到另外一種溶劑中。經過反復多次萃取,將絕大部分的化合物提取出來。萃取時如果各成分在兩相溶劑中分配系數相差越大,則分離效率越高、如果在水提取液中的有效成分是親脂性的物質,一般多用親脂性有機溶劑,如苯、氯仿或乙

    蛋白抽提指南(TRIZOL)

    在用酒精沉淀出DNA(DNA抽提中的步驟一)后剩余的苯酚—乙醇上清中可以抽提出蛋白。沉淀的蛋白可通過蛋白[質]印跡法對樣品中某一特殊的蛋白質進行分析。試劑所需,但沒有隨同提供的物品:* 異丙醇* 0.3M鹽酸胍(用95%酒精配制)* 無水乙醇* 1% SDS1.蛋白質的沉淀用異丙醇從苯酚—乙醇上清中

    DNA抽提指南(TRIZOL)

    按照RNA 分離操作方案在完全移去水樣層后,勻漿中的DNA 存在于中間層和苯酚層中也可以被分離出來。在沉淀和多次洗脫后,DNA 溶解在8 mM NaOH中。用TRIZOL試劑從組織和培養細胞中完全回收的DNA 可以用來做樣品中DNA 含量的測定。同時抽提的基因組DNA 可以用于對Northern a

    核酸抽提心得

    最糟糕的心態 - 實驗失敗了,抱怨試劑不好。實驗人員本來是應該擁有修正主義、機會主義、懷疑論等諸多“不完美的”意識,所以一定要用“完美的”自我批評意識來平衡。我為什么沒有一雙慧眼選擇可靠的供應商?我為什么不做預實驗檢測所購試劑?最糟糕的知識 - RNase A 的作用。RNase A 是內切酶,內切

    脂肪抽提儀操作須知

    ??? 傳統的脂肪提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分組成,利用的是溶劑回流和虹吸的原理。但是這一儀器有一弊端,各部分連接處容易漏氣,且工作效率不高。今天小編要給大家介紹一下脂肪抽提儀,其根據索氏抽提原理,用重量測定方法來測定脂肪含量,常被用于食品、油密封圈受乙醚變形泄露的問題。脂肪抽提儀在給人們

    RNA抽提指南(TRIZOL法)

    RNA抽提指南(TRIZOL法)注意事項:* 全程佩戴一次性手套。皮膚經常帶有細菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成為RNA酶的來源。培養良好的微生物實驗操作習慣預防微生物污染。* 使用滅菌的,一次性的塑料器皿和自動吸管抽提RNA,避免使用公共儀器所導致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探針的實驗室

    熱浸提和索氏抽提的區別

    粗脂肪含量是糧食、油料、飼料等產品標準中重要質量指標,是評價產品品質,組織生產的重要依據之一。?國內外測定粗脂肪含量方法有十余種之多,索氏抽提法是目前應用廣泛測定方法,是公認的脂肪含量測定的經典方法。?經典索氏提取法原理:測定脂肪是將樣品放在抽提筒內,以水浴蒸餾冷凝的Ether進行回流浸提,一般要十

    RNA抽提和標記實驗

    實驗材料從組織培養收獲的細胞在組織培養中的細胞凍存的整個組織試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液(PBS)TRIzol 試劑乙醇乙酸鈉EDTANaOHTris-ClTE 緩沖液固定化的 oligo-dT 引物儀器、耗材組織勻漿器熱循環儀熒光掃描儀實驗步驟實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材」具體見「其他」1a.

    奶粉脂肪抽提儀操作步

    ??? 脂肪是奶粉中重要的營養物質,也是直接反映奶粉質量的重要指標。近幾年來,乳制品安全問題頻頻曝光,使得消費者對乳制品安全憂心忡忡。所以,高效快速地檢測奶粉我品質,控制奶粉質量是解決問題的關鍵。????? 目前,奶粉脂肪含量測定方法大多為化學檢測技術,這類方法雖然精度高,但耗時費力,操作過程相對復

    RNA抽提和標記實驗

    實驗方法原理 實驗材料 從組織培養收獲的細胞在組織培養中的細胞凍存的整個組織試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液(PBS)TRIzol 試劑乙醇乙酸鈉EDTA NaOHTris-ClTE 緩沖液固定化的 oligo-dT 引物儀器、耗材 組織勻漿器熱循環儀熒光掃描儀實驗步驟 實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材

    蛋白質的抽提實驗

    實驗材料 轉型菌株pQG11 M15 [pREP] 單一菌落試劑、試劑盒 LB amp kan液體培養基IPTGNa3PO4·12H2ONaClEDTATriton X-100液氮儀器、耗材 恒溫震蕩培養箱高速冷凍離心機離心管冰筒實驗步驟 一、儀器用具恒溫震蕩培養箱37℃;高速冷凍離心機及離心管 (

    RNA抽提和標記實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 從組織培養收獲的細胞 在組織培養中的細胞 凍存的整個組織

    索氏抽提的具體介紹

    從固體物質中萃取化合物的一種方法是,用溶劑將固體長期浸潤而將所需要的物質浸出來,即長期浸出法。此法花費時間長.溶劑用量大、效率不高。在實驗室多采用脂肪提取器(索氏提取器)來提取、脂肪提取器(如圖所示)就是利用溶劑回流及虹吸原理,使固體物質連續不斷地被純溶劑萃取,既節約溶利萃取效率又高。萃取前先將固體

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