蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP) 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 緩沖鹽清洗液 抽提緩沖液 實驗步驟 一、組織/細胞制備和提取1. 配制下列溶液:(1) 緩沖鹽清洗液:20 mmol/L 的 MOPS 緩沖液,pH 7.5(配成 100 ml)5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 N......閱讀全文
目前動物用單抗,在動物疫病診斷和檢疫、妊娠檢測、性別鑒定等方面有廣泛的應用,大多以診斷試劑(盒)的形式提供,其中核心試劑為標記的單抗。下面將介紹最常用的幾種標記技術。1.酶標記(1)辣根過氧化物酶(HRP)標記辣根過氧化物酶(HRP)標記單抗和多克隆抗體的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖基用
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和生物素標記)(3)移入透析袋中,在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸鹽緩沖液中,4℃透析過夜,更換三次緩沖液,注意避光。 (4)吸取上述醛化好的HRP溶液3ml,加入5mg IgG的碳酸鹽緩沖液1ml,室溫輕攪2-3小時,避光
實驗材料樣品試劑、試劑盒胞內緩沖液透化緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟1. 分離細胞器。2. 于 4℃ 用胞內緩沖液清洗細胞器樣品 3 次,將相當于 1 mg 蛋白質的樣品轉至帶螺帽的小離心管,放入冰盒。3. 離心,吸去上清,加 200 μl 預熱至 37℃ 的透化緩沖液,輕輕混勻,放入 37℃ 水浴
化學發光免疫分析是將化學發光與免疫分析方法相結合,綜合了化學發光的高靈敏度和免疫分析的高選擇性,被廣泛應用到臨床檢測和藥物分析中。隨著新的發光試劑,新固相材料的研制以及新標記技術應用,化學發光免疫分析方法的靈敏度,重現性將大大提高。 在分析化學中,化學發光是當基態分子吸收化學反應中
摘要:化學發光免疫分析是將化學發光與免疫分析方法相結合,綜合了化學發光的高靈敏度和免疫分析的高選擇性,被廣泛應用到臨床檢測和藥物分析中。隨著新的發光試劑,新固相材料的研制以及新標記技術應用,化學發光免疫分析方法的靈敏度,重現性將大大提高。 在分析化學中,化學發光是當基態分子吸收
摘要: 化學發光免疫分析是將化學發光與免疫分析方法相結合,綜合了化學發光的高靈敏度和免疫分析的高選擇性,被廣泛應用到臨床檢測和藥物分析中。隨著新的發光試劑,新固相材料的研制以及新標記技術應用,化學發光免疫分析方法的靈敏度,重現性將大大提高。 在分析化學中,化學發光是當基態分子
(1)什么是凝膠遷移或電泳遷移率實驗?凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記
實驗方法原理 本分析方法是一種簡單、快速和極為靈敏的用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白的方法。在電泳時,與末端標記的DNA片段特異結合的蛋白質阻滯了片段的遷移,因而產生對
本實驗主要用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白。實驗方法原理本分析方法是一種簡單、快速和極為靈敏的用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白的方法。在電泳時,與末端標記的DNA片段特異結合的蛋白質阻滯了片段的遷移,因而產生對應于蛋白-DNA復合物的清晰電泳條帶。實驗材料質粒DNA試劑、
凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)可以:(1)研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用;(2)可用于DNA定性和定量分析;(3)用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。實驗方法原理一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初
實驗方法原理 凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列
以下問題是以Promega公司試劑盒為例。凝膠遷移實驗1)什么是凝膠遷移或電泳遷移率實驗?凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互
酸性磷酸酶染色的原理與臨床意義: (1)原理:血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下,將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解,釋放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI與六偶氮付品紅偶聯,形成不溶性紅色沉淀,定位于胞質內,如果血細胞的胞質呈紅色為陽性反應,無紅色為陰性反應。抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制備2
酶聯免疫檢測技術的應用 真菌毒素的檢測:黃曲霉毒素 B 1 、 M 1 以及 T-2 毒素,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素 DON ),二乙酰草鐮刀菌烯醇( DAS ),玉米赤霉烯酮,赫曲霉毒素 A ( OA )。 農藥的檢測:主要有除草劑與殺蟲劑兩大類,例如殺暝松( FN )、甲
(征求意見稿) 酶聯免疫診斷試劑是指在酶標板上包被相關的抗原(或抗體)后,利用直接或間接的方法與待測樣品中的相關抗體(或抗原)反應,形成的抗原抗體復合物再與相應的酶標記的抗體或抗原進一步反應,經過酶催化底物發生顯色反應,由形成的顏色的強弱來判斷樣本中相應的抗體或抗原的存在。 為了規
Western Blot 現在仍然是檢測和分離蛋白最常用的一種實驗方法,但是要想得到較好的結果并不容易,只有找到合適的實驗條件并進行優化,才能以更少的時間得到更多的結果,達到事半功倍的效果!下面是 R&D Systems 品牌為您推薦的免疫印跡優化步驟和實驗涉及參考數據:一抗濃度對實
一、實驗目的1.掌握酶分離純化的一般步驟及相關原理;2.悉堿性磷酸酶的分離純化的方法步驟。二、實驗原理有機溶劑分級沉淀是分離蛋白質的常用方法之一。有機溶劑能使許多溶于水的酌生物大分子發生沉淀,其主要作用是降低水溶液的介電常數。例如20℃時水的介電常數為80,82%的乙醇溶液的介電常數為40。溶液的介
實驗概要掌握ELISA樣品制備的基本方法。主要試劑1. 細胞/組織提取緩沖液配方 1) 100 mM Tris, pH 7.4 2) 150 mM NaCl 3) 
實驗概要掌握ELISA樣品制備的基本方法。主要試劑1. 細胞/組織提取緩沖液配方 1) 100 mM Tris, pH 7.4 2) 150 mM NaCl 3) 
近期,來自中科院動物研究所、首都師范大學和深圳大學等處的研究人員,在國際遺傳學權威期刊《PLOS Genetics》發表題為“Protein Phosphatase 6 Protects Prophase I-Arrested Oocytes by Safeguarding Genomic Inte
3.1.3 包被用抗原 用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養物等,須經提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取,一般的細菌和病毒抗原可以從其培養物中提取,蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中提取等(例如A
ELISA原理 ELISA利用抗原抗體之間專一性結合之特性,對標本進行檢測;由于結合與固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計 其結合 機制後,配合酵素顯色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用顯色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與結合機制的不同,ELI
據《中華人民共和國藥典》記載,“菊苣”特指菊科植物毛菊苣(Cichorium glandulosum Bioss. et Huet.)和菊苣(Cichorium intybus L.)。菊苣是一種用途廣泛的植物,并且具有較高的藥用價值。菊苣系維吾爾族習用藥材,具有清肝利膽,健胃消食
目前,免疫學檢驗中的標記技術主要包括酶免疫技術、熒光免疫技術、放射免疫技術、金免疫技術、化學發光免疫技術等。其中酶免疫技術是以酶標記的抗體(抗原)作為主要試劑,將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的高效性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術。作為經典的三大標記技術之一,酶免疫技術在檢驗醫學中得到廣
實驗方法原理 實驗材料 E.coli MC 1061 (Bio-Rad)硫氧還蛋白表達載體質粒DNA 洗脫液試劑、試劑盒 DNA 聚合酶DNA 連接酶小牛腸堿性磷酸酶(CIP)限制性內切核酸酶反應緩沖液 4dNTPTris·Cl培養基儀器、耗材 QIAquick 膠回收試劑盒質粒制備試劑盒DNA 合
3.2 結合物 結合物即酶標記的抗體(或抗原),是ELISA中最關鍵的試劑。良好的結合物應該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當的分子比例,在結合試劑中應盡量不含有或少含有游離的(未結合的)酶或游離的抗體(或抗原)。此外,結合物尚要
在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定。ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制
堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶(APAAP)免疫組化染色技術檢測淋巴細胞表面標記 活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶(APAAP)免疫組化染色技術檢測淋巴細胞表面標記 活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
實驗概要掌握非放射性地高辛標記DNA探針法。 實驗原理以往人們是用放射性同位素來標記探針DNA。近年來,非同位素標記方法發展很快,已有取代同位素標記法的趨勢。地高辛配基隨機標記DNA探針法,是較為成功的一種非同位素標記方法(Saiki等,1985)。其原理是:用化學方法把類固醇