RNA標記
RNA標記是將標記物（如放射性同位素、熒光素或酶）共價地連接到RNA，通過檢測標記物，進而實現對RNA鑒別和檢測的目的。RNA標記在分子探針領域應用廣泛，在疾病診斷方面也很有前景。 理想的RNA標記方法應符合以下要求： 1. 操作簡單，靈敏度高 2. 不影響堿基配對的特異性 3. 不影響RNA活性 4. 對酶促反應活性無影響或影響不大 5. 檢測方法具有高度靈敏性和高度特異性 6. 標記物對人體無害 RNA標記方法： 按反應機制分如下四類：直接標記法，加尾標記法，基于逆轉錄反應的標記方法，基于RNA克隆擴增的標記方法。 常用于RNA標記的方法按標記物性質分為： 放射性同位素標記：32P、35S、3H 非放射性標記：半抗原熒光素化學發光物質 地高辛 地高辛標記RNA常用的方法是將DIG與UTP共價結合形成DIG-UTP，以DIG-UTP、ATP、CTP......閱讀全文
RNA標記
RNA標記是將標記物（如放射性同位素、熒光素或酶）共價地連接到RNA，通過檢測標記物，進而實現對RNA鑒別和檢測的目的。RNA標記在分子探針領域應用廣泛，在疾病診斷方面也很有前景。 理想的RNA標記方法應符合以下要求： 1. ?操作簡單，靈敏度高 2. ?不影響堿基配對的特異性 3. ?不影響RN
RNA標記
RNA labeling?(Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes??32P-pCp 3' End-labeling
miRNA研究之RNA標記
RNA標記RNA標記是將標記物（如放射性同位素、熒光素或酶）共價地連接到RNA，通過檢測標記物，進而實現對RNA鑒別和檢測的目的。RNA標記在分子探針領域應用廣泛，在疾病診斷方面也很有前景。 理想的RNA標記方法應符合以下要求：1. ?操作簡單，靈敏度高2. ?不影響堿基配對的特異性3. ?不影響R
常用RNA標記方法介紹
RNA標記方法：按反應機制分如下四類：直接標記法，加尾標記法，基于逆轉錄反應的標記方法，基于RNA克隆擴增的標記方法。常用于RNA標記的方法按標記物性質分為：放射性同位素標記：32P、35S、3H非放射性標記：半抗原熒光素化學發光物質地高辛地高辛標記RNA常用的方法是將DIG與UTP共價結合形成DI
RNA－放射性標記
? ? ? ? ? ? 實驗材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml 10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶 (γ32P)ATP
RNA－放射性標記
實驗材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶(γ32P)ATP 牛小腸磷酸酶T4RNA 連接酶 [32P]pCpATP2Oumol L 無 tRNA 酶的牛血清白蛋白試劑、試劑盒 10XT4 多核苷酸激酶緩沖液 DEPC 處理的
3.4－RNA－放射性標記
轉錄過程中的 RNA 分子內標記，轉錄后利用 T4 多核苷酸激酶的 RNA5＇端標記和利用 T4RNA 連接酶的 RNA3＇端標記。實驗材料[α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml10mCi ml)UTP 或 CTPT4 多核苷酸激酶(γ32P)ATP牛小腸磷酸酶T4RNA 連接酶[32P]
RNA抽提和標記實驗
實驗材料從組織培養收獲的細胞在組織培養中的細胞凍存的整個組織試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液（PBS）TRIzol 試劑乙醇乙酸鈉EDTANaOHTris-ClTE 緩沖液固定化的 oligo-dT 引物儀器、耗材組織勻漿器熱循環儀熒光掃描儀實驗步驟實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材」具體見「其他」1a.
RNA抽提和標記實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 從組織培養收獲的細胞 在組織培養中的細胞 凍存的整個組織
RNA抽提和標記實驗
實驗方法原理 實驗材料 從組織培養收獲的細胞在組織培養中的細胞凍存的整個組織試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液（PBS）TRIzol 試劑乙醇乙酸鈉EDTA NaOHTris-ClTE 緩沖液固定化的 oligo-dT 引物儀器、耗材 組織勻漿器熱循環儀熒光掃描儀實驗步驟 實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材
地高辛標記RNA常用的方法介紹
地高辛標記RNA常用的方法是將DIG與UTP共價結合形成DIG-UTP，以DIG-UTP、ATP、CTP、GTP為底物通過RNA聚合酶T7、SP6經體外轉錄合成標記RNA。此法多用于RNA探針的制備，一般每20~25個核苷酸可引入一個地高辛分子。5'末端標記法5'末端標記法是通過化學
常用標記RNA的生物素有哪些？
用生物素標記RNA的方法常見的是用生物素與UTP結合形成Biotin-UTP，以Biotin-UTPATP、CTP、GTP為底物通過RNA聚合酶SP6、T7等經體外轉錄合成標記RNA。
理想的RNA標記方法應符合哪些要求？
1. 操作簡單，靈敏度高2. 不影響堿基配對的特異性3. 不影響RNA活性4. 對酶促反應活性無影響或影響不大5. 檢測方法具有高度靈敏性和高度特異性6. 標記物對人體無害
【銳賽小課堂】miRNA研究之RNA標記
RNA標記是將標記物（如放射性同位素、熒光素或酶）共價地連接到RNA，通過檢測標記物，進而實現對RNA鑒別和檢測的目的。RNA標記在分子探針領域應用廣泛，在疾病診斷方面也很有前景。 理想的RNA標記方法應符合以下要求： 1. 操作簡單，靈敏度高 2. 不影響堿基配對的特異性
基本方案2－RNA－抽提和標記
試劑、試劑盒TRIzol 試劑PBS氣仿乙醇乙酸鈉引物Superscript Ⅱ RNase H反轉錄酶10 X low-T dNTP 混合物EDTATE 緩沖液儀器、耗材RNeasy Maxi 試劑盒組織勻漿機圓底離心管圓錐底離心管水平離心機薄壁 PCR 管熱循環儀熒光掃描儀實驗步驟展
新型RNA標記技術顛覆以往干細胞研究
干細胞研究大多是在實驗室的培養皿中開展的。然而，斯坦福大學的研究人員近日在《Cell Reports》上發表文章稱，體內的干細胞和培養皿中的干細胞在基因表達譜上大相徑庭。 研究人員認為，若人們對分離后的干細胞開展研究，并得出干細胞功能的結論，那么這些結論需要重新考慮，因為細胞在分離過程中發生了
以－RNA－為靶目標－FISH－探針的標記實驗
標記的 RNA、DNA 或者核酸類似物可以通過熒光原位雜交（FISH) 的方法檢測細胞標本內的 RNA。目標 RNA 通常是由基因組 DNA 轉錄來的信使 RNA(mRNA)。由于髙特異的核酸堿基互補配對原則，特定的 RNA 分子可以從眾多共表達的 mRNA 分子中篩選出來。對選擇的 mRNA 分子
以－RNA－為靶目標－FISH－探針的標記實驗
標記的 RNA、DNA 或者核酸類似物可以通過熒光原位雜交（FISH) 的方法檢測細胞標本內的 RNA。目標 RNA 通常是由基因組 DNA 轉錄來的信使 RNA(mRNA)。由于髙特異的核酸堿基互補配對原則，特定的 RNA 分子可以從眾多共表達的 mRNA 分子中篩選出來。對選擇的 mRN
用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖
核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針（核糖探針）雜交，然后未雜交的序列被一種或幾種單鏈特異性的核糖核酸酶裂解。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理核糖核酸酶保護分析用于度量特
科學家首次實現活細胞RNA標記與無背景成像
圖為《自然—生物技術》11月期封面圖片。它顯示了利用熒光RNA可對單細胞中mRNA的翻譯過程進行定量研究。癌細胞中mRNA水平與其編碼蛋白質水平之間存在較低相關性，提示癌細胞的翻譯調控顯著失調，這為癌癥的診療提供一種全新的思路。 華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年
Nature子刊：首次實現活細胞RNA標記與無背景成像
生物大分子標記技術是生物分子成像的關鍵。在科學歷史上，人們利用熒光蛋白“點亮”細胞內蛋白質, 實現了生命動態過程中蛋白質分子的可視化。熒光蛋白技術是當代生物科學研究中最重要的研究工具之一；在短短十余年內，其研究即被授予諾貝爾獎。RNA同樣具有獨特的結構、種類繁多的生物學功能以及復雜的時間空間分
美開發出無需熒光標記的新型DNA和RNA檢測方法
據物理學家組織網近日報道，美國佐治亞大學的科研人員采用專門設計的納米材料，開發出了無標記的新型DNA和RNA檢測方法，有望降低常用基因檢測技術的成本和復雜性。相關研究報告發表在近期出版的《美國化學學會期刊》上。科學家稱，他們的發現或可用于幫助醫生診斷白血病和淋巴癌等特定的癌癥，還能探測出在組織中存在
生物物理所在RNA定點特異標記研究中獲得新進展
2月18日，Angewandte Chemie International Edition 在線發表了中國科學院生物物理研究所王江云研究組題為A Covalent Approach for Site-Specific RNA Labeling in Mammalian Cells 的最新研究成果
國際首次|我國學者實現活細胞RNA標記與無背景成像
華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年合作研究，在熒光RNA及活細胞RNA成像領域獲突破性進展。他們原創的系列高性能熒光RNA，在國際上首次實現了不同種類RNA在動物細胞內的熒光標記與無背景成像。11月5日，該成果以封面論文形式發表于《自然—生物技術》。 熒光蛋白
鄒鵬/王建斌合作發展空間特異性RNA標記技術
真核細胞轉錄組在三維空間中的分布特征對于基因表達具有重要調節作用。在記憶形成、胚胎發育、細胞增殖等一系列生理學過程中，細胞通過將特定RNA分子選擇性富集在亞細胞區域，能夠實現對蛋白質翻譯過程的精準調控，或幫助建立和維持染色體三維結構。因此，發展一種能在轉錄組層面解析細胞中RNA三維空間定位的方法
PCR擴增標記法探針標記
PCR擴增標記法探針標記???? PCR擴增標記法的原理與普通的核酸PCR相同。即Taq?DNA多聚酶以DNA為模板，在特異引物引導下，在PCR儀中合成cDNA探針。由于在反應體系中加入一定量的標記dNTP，因此擴增的同時又是一個標記過程。cDNA探針PCR擴增法標記原理
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和...1
目前動物用單抗，在動物疫病診斷和檢疫、妊娠檢測、性別鑒定等方面有廣泛的應用，大多以診斷試劑（盒）的形式提供，其中核心試劑為標記的單抗。下面將介紹最常用的幾種標記技術。?一、酶標記?1、辣根過氧化物酶（HRP）標記?辣根過氧化物酶（HRP）標記單抗和多克隆抗體的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和...2
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和生物素標記)（3）移入透析袋中，在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸鹽緩沖液中，4℃透析過夜，更換三次緩沖液，注意避光。?（4）吸取上述醛化好的HRP溶液3ml，加入5mg IgG的碳酸鹽緩沖液1ml，室溫輕攪2-3小時，避光；加入5m
DNA標記
DNA標記（主要內容如下）??DNA Labeling by Nick Translation??Random Primed Labeling??End-Labeling??Purification of Labeled DNA??Non-isotopic Labeling??OthersDNA L
分子標記
內容：一、遺傳標記?二、DNA分子標記?三、染色體原位雜交?四、DNA分子標記的應用?長期以來，植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的，當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時，表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀，如產量等；或多基因控制的質量性狀，如抗性等