腺相關病毒(AAV)屬于依賴病毒屬,細小病毒亞科,是一類自然缺陷的單鏈DNA病毒。野生型AAV基因組約4.7kb,含有rep和cap基因以及兩端的ITR序列。盡管人類對AAV易感,但臨床還并未發現與AAV相關的疾病。根據AAV衣殼蛋白基因的變異,可將AAV分為不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同的組織特異性。將興趣基因取代rep和cap基因構建一個兩段帶有ITR的載體,并將rep和cap置于一個獨立的載體上,加上帶有腺病毒輔助基因載體,便可包裝出帶有興趣基因的重組腺相關病毒(rAAV)。目前rAAV已被廣泛作為基因轉導載體使用,rAAV在人體實驗中的安全性也已被證實。早在1996年,科學家們就選擇肺作為rAAV的第一個靶向實驗器官。下面我們旨在介紹rAAV在肺部實驗中的啟動子、血清型的選擇,及其小鼠肺部的AAV注射方法。啟動子的選擇根據不同的注射方式和實驗目的,可選擇不同的啟動子以提高肺部表達效率。CMV在啟動真核基因表達方......閱讀全文
產品說明書 本產品僅限用于研究,嚴禁用于疾病診斷。 本產品僅供購買方內部研究使用,未經Vigenebio公司書面許可,嚴禁轉售。 產品有限責任擔保 Vigenebio保證您收到的產品符合產品目錄上的規格。本擔保規定了Vigenebio更換產品的責任。Vigenebio不提
銳賽小課堂技術篇0702-113 摘要: 腺相關病毒(AAV)是一種人細小病毒, 因為能作為一種基因治療載體而受到廣泛關注。目前大多數生成rAAV的實驗方案需要共轉染一個載體質粒和一個表達病毒復制和結構基因的包裝質粒到腺病毒(Ad)感染的培養細胞中。但是也可以通過新的輔助質粒(pH
詹姆斯(James*)和馬特(Matt*)兩兄弟成長于上世紀 80 年代的英國德文郡(Devon),對兩個孩子來說,日常的嬉鬧也要小心翼翼——小小的傷口或是磕碰都能把他們送進醫院。 他們患有血友病(haemophilia),一種由于凝血蛋白缺乏導致的凝血功能障礙性遺傳病。它已經困擾了家族中數代
基因療法以其“一次給藥,終身受益”的優勢越來越受到醫療市場的青睞。截至目前,歐洲藥品管理局(EMA)、美國食品藥品管理局(FDA)及中國國家食品藥品監督管理總局(NMPA)等機構至少已批準13種基因治療產品上市,同時還有2500多項細胞和基因治療正在進行臨床試驗。2019年8月,國際頂級期刊《新
基因療法以其“一次給藥,終身受益”的優勢越來越受到醫療市場的青睞。截至目前,歐洲藥品管理局(EMA)、美國食品藥品管理局(FDA)及中國國家食品藥品監督管理總局(NMPA)等機構至少已批準13種基因治療產品上市,同時還有2500多項細胞和基因治療正在進行臨床試驗。2019年8月,國際頂級期刊《新
2.3 蛋白質分析 為了分析AAV Rep和Cap蛋白質表達,按照2.2部分所述進行質粒轉染。轉染后48小時,將培養物刮到冷PBS/Mg(PBS含有5mM MgCl2),細胞低速離心沉淀收獲。細胞沉淀在冰上用200ml STM-NP緩沖液(25mM蔗糖,10mM Tr
腺相關病毒(AAV)載體是治療多種人類疾病基因傳遞的主要平臺。最近在開發臨床所需的AAV衣殼、優化基因組設計和利用革命性生物技術方面的進展對基因治療領域的發展作出了重大貢獻。在AAV介導的基因替換、基因沉默和基因編輯方面的臨床和臨床上的成功幫助AAV作為理想的治療載體獲得了廣泛的應用。 腺相關
一.Cre-loxP重組系統作用原理 Cre重組酶和loxP位點 Cre重組酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大腸桿菌噬菌體P1的Cre基因編碼,是由343個氨基酸組成的38kD的蛋白質。它不僅具有催化活性,而且與限制酶相似,能夠特異性識別lo
當AAV邂逅“她”,會擦出怎樣的火花? 腺相關病毒(Adeno-Associated Viral Vector,AAV)載體的安全(無致病性)、廣泛的宿主范圍(體內/外能夠轉導分裂細胞和非分裂細胞)、熱穩定性、能夠抵抗多種有機溶劑、pH及溫度的變化、缺乏顯著的免疫反應、良好的體內擴散性能和
一.Cre-loxP重組系統作用原理Cre重組酶和loxP位點Cre重組酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大腸桿菌噬菌體P1的Cre基因編碼,是由343個氨基酸組成的38kD的蛋白質。它不僅具有催化活性,而且與限制酶相似,能夠特異性識別loxP位點。LoxP(l
腺相關病毒(AAV)屬于依賴病毒屬,細小病毒亞科,是一類自然缺陷的單鏈DNA病毒。野生型AAV基因組約4.7kb,含有rep和cap基因以及兩端的ITR序列。盡管人類對AAV易感,但臨床還并未發現與AAV相關的疾病。根據AAV衣殼蛋白基因的變異,可將AAV分為不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
不論是細胞治療還是基因治療都離不開病毒載體。目前使用最多的病毒載體類型包括:腺相關病毒(AAV)、慢病毒(Lv)、逆轉錄病毒(Rv)和腺病毒(Adv)等,這些常用病毒載體特性如下圖所示:特征慢病毒Lentivirus逆轉錄病毒Retrovirus腺相關病毒AAV腺病毒ADV基因表達穩轉/瞬轉穩轉瞬轉
摘要:腺相關病毒(AAV)是一種人細小病毒, 因為能作為一種基因治療載體而受到廣泛關注。目前大多數生成rAAV的實驗方案需要共轉染一個載體質粒和一個表達病毒復制和結構基因的包裝質粒到腺病毒(Ad)感染的培養細胞中。但是也可以通過新的輔助質粒(pH3和pH5),排除了Ad共轉染的需求。輔助質
對完整和空殼腺相關病毒(AAV)顆粒進行色譜分離的新突破? AAV載體的應用現狀基于腺相關病毒(AAV)的各種血清型載體被公認在人類基因治療和基因疫苗接種應用中具有高潛力。在制造AAV載體期間,不必要的,不完全的顆粒共同產生。它們缺乏重組病毒基因組,僅由空衣殼蛋白組成。空衣殼增加了用于醫學
產品說明書本產品僅限用于研究,嚴禁用于疾病診斷。本產品僅供購買方內部研究使用,未經Vigenebio公司書面許可,嚴禁轉售。產品有限責任擔保Vigenebio保證您收到的產品符合產品目錄上的規格。本擔保規定了Vigenebio更換產品的責任。Vigenebio不提供其他任何形式的對于產品商業或健康用
1.什么是Adeno-associated virus (AAV) &重組AAV(rAAV) & helper free rAAV?腺相關病毒(AAV)屬于微小病毒科,是一類小的、二十面體、無包膜病毒。AAV是一種復制缺陷病毒,復制依賴于其他輔助病毒,如腺病毒和皰疹病毒。AAV不編碼
腺相關病毒感染目的細胞預實驗以2型AAV病毒為例,Vigenebio為您推薦的MOI值10000:1-100000:1,是根HEK293T細胞得出的數據,不同的細胞所使用的病毒MOI值會有所不同。建議您感染目的細胞前,進行預實驗摸索最佳MOI值,推薦使用有熒光的對照病毒來摸索條件。1. 為了節省病毒
現狀基于腺相關病毒(AAV)的各種血清型載體被公認在人類基因治療和基因疫苗接種應用中具有高潛力。在制造AAV載體期間,不必要的,不完全的顆粒共同產生。它們缺乏重組病毒基因組,僅由空衣殼蛋白組成。空衣殼增加了用于醫學應用的AAV病毒的所需劑量,并且被認為引起針對載體衣殼的免疫反應,導致不必要的副作用。
現狀基于腺相關病毒(AAV)的各種血清型載體被公認在人類基因治療和基因疫苗接種應用中具有高潛力。在制造AAV載體期間,不必要的,不完全的顆粒共同產生。它們缺乏重組病毒基因組,僅由空衣殼蛋白組成。空衣殼增加了用于醫學應用的AAV病毒的所需劑量,并且被認為引起針對載體衣殼的免疫反應,導致不必要的副作用。
腺相關病毒(Adeno-Associated Viral Vector,AAV)載體的安全(無致病性)、廣泛的宿主范圍(體內/外能夠轉導分裂細胞和非分裂細胞)、熱穩定性、能夠抵抗多種有機溶劑、pH及溫度的變化、缺乏顯著的免疫反應、良好的體內擴散性能和持續高水平的基因表達等獨特的生
(Tom Egil Hansen and Terje Johansen,BMC Biology,2011) 圖4 Vigene自噬雙標病毒載體圖譜五.Vigene mCherry-GFP-LC3B 自噬雙標操作方法(一)體外實驗以2型AAV病毒為例,Vigen
在日常生活中,我們經常聽到或者親身參與到各種“圈”中,例如,時尚圈,娛樂圈,藝術圈,還有上海的各大商圈和可食用的甜甜圈,當然,對大多數人來說最熟悉的莫過于微信朋友圈了。話說,在基因治療領域也有一個圈,小編暫且給它取名叫“病毒載體圈“,此圈中有這樣一位傲嬌的明星大咖,它不僅理化性質獨特(可耐受凍融
基因治療研究人員發現一種常用于將治療性基因載入小鼠的病毒載體有副作用,會引發肝腫瘤。某些專家爭辯說,利用這種載體進行的臨床實驗很安全。 曾經有人擔心基因治療有引發癌癥的副作用。幾年前,法國一項基因治療實驗中,一種逆轉錄病毒在三個兒童中引發白血病(ScienceNOW, 14 January 200
中樞神經系統是由許多不同類型的細胞構成的,包括神經元和神經膠質細胞。其中,根據不同的形態、大小和功能,神經元可以分為很多類型。而神經膠質細胞主要包括星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞。 AAV在中樞神經系統(central nervous system,CNS)中的應用包括很多方面,
2012年,首個基因治療藥物Glybera獲歐盟批準,該藥物基于腺相關病毒(AAV)載體用于家族性脂蛋白脂酶缺乏(LPLD)成人患者的治療。 去年,FDA批準的第一個體內基因療法是Luxturna,同樣使用AAV作為遞送載體,它被施用于眼睛以治療罕見的遺傳性失明。 AAV是一種約26nm大小
所謂基因治療,就是把一個具有治療作用的基因放到病人的細胞中,借此替換缺失和功能異常的基因,最終達到治療某種疾病的方法。盡管早在1990年美國就批準了基因治療的方案,但是基因治療真正在臨床獲批卻少之又少。不過近期的一則新聞,無疑是為致力于醫學轉化的我們打了一針強心劑。5月27日,全球制藥巨頭葛蘭素
在日常生活中,我們經常聽到或者親身參與到各種“圈”中,例如,時尚圈,娛樂圈,藝術圈,還有上海的各大商圈和可食用的甜甜圈,當然,對大多數人來說最熟悉的莫過于微信朋友圈了。話說,在基因治療領域也有一個圈,小編暫且給它取名叫“病毒載體圈“,此圈中有這樣一位傲嬌的明星大咖,它不僅理化性質獨特(可耐受凍融、6
“核心刊物” 迎來了新期刊:科學通報,中國科學C輯:生命科學,這兩份期刊均是由中國科學院和國家自然科學基金委員會共同主辦的,我國學術期刊中的知名品牌,被國內外各主要檢索系統收錄,如國內的《中國科學論文與引文數據庫》(CSTPCD)、《中國科學引文數據庫》(CSCD)等;美國的SCI、CA、E
堿基編輯器用于研究和治療遺傳性疾病的成功取決于將其體內傳遞給相關細胞類型的能力。通過腺相關病毒(AAV)的傳送受AAV打包能力的限制(AAV的基因組包裝大小限制為≤5kb),因此無法使用全長堿基編輯器。 2020年1月14日,博德研究所David Liu團隊在Nature Biomedical
DNA改組(DNA shuffling)是一種高通量的突變、篩選技術, 自1994年提出以來, 經過了幾十年的發展,在DNA、酶和藥物蛋白等的改造上都有突出的表現。近期來自第二軍醫大學,浙江理工大學生命科學學院的研究人員就圍繞著這種技術在腺相關病毒定向進化中的發展及其應用,展開了探討,解析了