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    使用SpectraMax微孔板讀板機檢測QuantiTPicoGreendsDNA實驗二

    - 高濃度范圍標曲可以濃度從1 ng/mL制備到1 μg/mL,低濃度范圍標曲可以從25 pg/mL制備到25 ng/mL。對于高濃度范圍標曲,按Table 2中稀釋方案稀釋;對于低濃度范圍標曲,40倍稀釋2μg/mL溶液制備50 ng/mL溶液,參考Table 3中的稀釋方案。 注意:此篇應用文檔,使用了濃度從1 μg/mL到50pg/mL的一系列標曲。- 用移液器將100 μL每孔標準品轉移到一個黑色 96-孔微孔板中,最好3個重復。確保向孔中加TE(無DNA)來作為空白孔。- 加100 μL每孔Quant-iT PicoGreen試劑水相工作液。通過渦旋或震板機室溫避光混合2到5分鐘。讀取微孔板- 確保紫色板子適配器(如果您的讀板機需要的話)放入微孔板讀板機的板托中。- 點擊SoftMax Pro軟件中的Read按鈕。儀器會讀取板子并且相對熒光單位會顯示在程序的板子區塊中。分析數據- 微孔板讀取之后,相對熒光單位 ......閱讀全文

    使用SpectraMax微孔板讀板機檢測Quant-iT PicoGreen dsDNA實驗 一

    簡介雙鏈DNA通常使用微孔板讀板機通過測量DNA溶液的260nm吸收光進行定量。然而,這種方法通常在微孔板讀板機上只能檢測到最低250ng/mL的濃度。對于生物學應用涉及到小體積樣品,如新一代測序和擴增產物定量時,更靈敏的方法才能滿足需求。Life Technologies公司的Quant-iT

    SpectraMax M系列微孔板讀板機應用集錦(三)

    應用原代細胞進行高通量復雜炎癥分析炎癥反應的一個重要步驟是細胞表面抗原與血管中免疫細胞的特異性結合。因此,對這些分子變化的及時監控,如VCAM, E-selectin,以及內皮細胞上的HLADR等等,我們用多通道熒光讀取人原代細胞表面的炎癥標記,并在此基礎上評估不同介質對炎癥反應的調節作用。

    讓核酸和蛋白定量檢測更準確有效

    拒絕千篇一律,讓核酸和蛋白定量檢測更準確有效! 核酸及蛋白的定量是遺傳學和分子生物學中許多復雜實驗上游的基本檢測方法,如DNA測序、PCR/qPCR、克隆/轉染等。如何能夠準確和靈敏對核酸及蛋白質進行定量檢測是許多實驗成敗與否的重要環節。各種方法被開發出來用于定量這些生物學成分,然而最常見

    分子生物學常用實驗技術(page 3)

    分子雜交技術    互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN

    測序技術及DNA序列測定結果分析

    實驗概要 在分子生物學研究中,DNA的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于測序的技術主要有Sanger等(1977)發明的雙脫氧鏈末端終止法和Maxam和   Gilbert(1977)發明的化學降解法。這二種方法在原理上差異很大,但都是根據核苷酸在某一固定的點開始

    DNA測序——非同位素銀染

    實驗方法原理Promega公司的SILVER SEQUENCETM DNA測序系統是一種無放射性的序列分析系統,它通過靈敏的銀染方法檢測凝膠中的條帶。 銀染提供了一種對于放射性或熒光法來說更加快速,廉價的替代方法。測序結果可以在同一天內得到;電泳完成后經90分鐘就可讀序,這是常規的放射性測序法做不到

    人抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒使用說明

    本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中人抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗雙鏈DNA抗體(dsDNA),再與HRP標記的

    M13噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術的應用實驗

    本章描述了改進融合蛋白在 M13 噬菌體顆粒表面展示水平的一個方法。向 M13 衣殼錨定蛋白引入突變后,蛋白質展示水平約能增加兩個數量級。本實驗來源「現代蛋白質工程實驗指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒編著。實驗材料羧芐青霉素氯霉素大腸桿菌 CJ236試劑、試劑盒生理磷酸緩沖液超純甘油PBS-

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗可用于:(1)體外診斷;(2)體內治療等。實驗方法原理SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、A-U 堿基對以外,還有 G-U 等變偶堿基對的

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗

                實驗方法原理 SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、

    中國檢科院公開招標3704萬元實驗室儀器設備

      分析測試百科網訊 近日,中國檢驗檢疫科學研究院發布2017年實驗室儀器設備采購項目招標的公告,此次發布的公告涉及氣相色譜儀、全自動蒸餾儀、超高靈敏度二噁英分析儀等57臺儀器,總預算3704萬元。  采購項目的名稱、數量、簡要規格描述或項目基本概況介紹:  項目名稱:中國檢科院2017年實驗室儀器

    使用QuickDrop分光光度計進行核酸定量和分析

    產品特點:最小樣品量低至0.5 μL 從1.0 ng/μL到2,500 ng/μL的精確DNA定量 LCD觸摸屏可獨立完成實驗及數據分析 比色皿法可進行動力學法和波長掃描 背景介紹:分光光度測定法是一項定量和分析生物成分的成熟技術。其中,核酸是生物實驗室最常檢測的生物成分之一。確定這

    原位雜交組織化學概述

    一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動

    原位雜交組織化學技術的基本方法

    一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動

    中空纖維切向流過濾純化HSV疫苗

    簡介單純皰疹病毒2型(HSV-2)是潰瘍性生殖器皰疹的主要病原,全球每年新增感染達2300萬例,其治療方式主要圍繞口服抗病毒治療展開,但已有HSV-2候選疫苗進入臨床試驗,包括滅活、活性衰減、亞單位、DNA及多肽疫苗等,其中,野生型病毒刪除UL5和UL29基因構建的復制缺陷型HSV-2疫苗株病毒(d

    兩種 DNA定量方法的比較:光吸收和熒光

    對微量的雙鏈 DNA 進行定量在各種生物學應用中都顯得非常重要,包括標準的分子生物學技術中的應用,例如 cDNA 文庫的建立;用于亞克隆的 DNA 片段的純化;診斷技術中的應用,例如定量 DNA 擴增產物,在藥物研究中測定 DNA 分子。最常用的檢測核酸濃度的方法就是檢測核酸在 260nm ( A2

    Western blotting蛋白印跡市場概況和主要品牌及產品

    近日,MarketsandMarkets咨詢公司發布了全球western blotting市場的分析報告。據MarketsandMarkets預測,全球western blotting的市場規模將從2016年的5.75億美元增長到2021年的7.31億美元,復合年均增長率達4.9%。另一家Futur

    干貨丨新冠病毒Nanopore測序標準操作流程

    2019新型冠狀病毒Nanopore測序標準操作流程-PCR擴增測序版簡介  新近在武漢出現的新型冠狀病毒引發的肺炎疫情引起了社會各界的極大關注。對新型冠狀病毒進行測序不僅能夠為病原鑒定、病毒溯源與變異、傳播力和傳播機理等研究提供切實可靠的基因組信息,還能夠為識別病毒傳播方式和確定暴發范圍提供重要的

    原位雜交組織化學技術的基本方法

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    自動化核酸提取、檢測和定量平臺

    在現今分子生物領域中,樣本的核酸提取、檢測和定量已是每個實驗室常用的實驗手段。近年,實時定量PCR和第二代測序技術的誕生更令核酸提取的需求大大增加。這些新的核酸檢測技術對核酸的純度要求比較高,所以核酸提取的質量也比以前更受注重。另一方面,準確的核酸定量對于這些新技術,如第二代測序,起了成敗的關鍵作用

    小鼠雙鏈DNA(dsDNA)ELISA試劑盒

    小鼠雙鏈DNA(dsDNA)ELISA試劑盒 (用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內) 原理本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 dsDNA 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的 dsDNA與單抗結合,加入生物素化

    游離核酸微量DNA樣本的檢測

    近年來,DNA分析技術廣泛應用于醫學、法學、環境等諸多領域,成為科學研究的一大重點。例如產前診斷及法醫檢測等首先進行微量DNA 提取,然后進行PCR擴增驗證,也有一些研究單位會對一些古老樣本進行DNA提取,同樣做PCR擴增驗證。它們的相同之處在于,用于分析的樣本DNA含量可能極其有限,稍有遺損就可能

    NF-κB(p65)/ NF-κB(p50)活性分析試劑盒原理及應用

    NF-κB/Rel轉錄因子家族包含幾種結構相關的蛋白(p65/p105,p52/p100,RelA(p65),c-Rel/ NF-κB)形成同源和/或異源二聚體。該轉錄因子家族成員調控超過150種目的基因,包括炎癥細胞因子、趨化因子、免疫受體、細胞粘附分子等的表達。正因為如此,NF-κB被認

    納米孔直接RNA和cDNA長讀長測序概述

      RNA測序已經在生物學和醫學的各個領域取得了前所未有的發展。在包括癌癥在內的諸多疾病中,轉錄異構體的表達和用途是健康組織和患病組織之間變異的重要來源。鑒定差異剪接的異構體和融合轉錄本,可以為疾病的診斷和治療提供信息。RNA測序還有助于揭示從單細胞到整個組織的轉錄組動力學。同時,cDNA測序也極大

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    大規模 PCR 制作 cDNA 微陣列實驗

    本方案描述了通過 PCR 擴增產物,來制作 cDNA 微陣列的實驗步驟。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒緩沖液、溶液和試劑生物分子酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸凝膠儀器、耗材專用設備實驗步驟第 1 階段:影印鋪板與工作庫的制備一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑羧芐

    生物制劑中宿主殘余DNA檢測技術與標準的發展趨勢

    生物制品中殘留DNA檢測標準的變化2015年3月底,中國食品藥品檢定研究院網站的國家藥品標準物質目錄中新增加了一個編號為410001的產品:CHO宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)。這個由中檢院與中科院聯合研發,由生物制藥企業參與標定的試劑盒與現行美國藥典(USP)建議的檢測方法同步

    美國DeNovix公司超微量/熒光全功能光度計在新一代測序...

    美國DeNovix公司超微量/熒光全功能光度計在新一代測序樣品質量上的應用對于新一代測序,待測樣品的質量和濃度,是文庫成功構建的兩個非常關鍵因素,也是新一代測序成功與否的關鍵。它可以最大程度上減小序列的偏差,并且輸出可靠的序列信息。嚴格把關送測樣品的濃度和質量,是確保新一代測序的數據準確、以及高通量

    與做熒光染色的同學共享些經驗

    Hoechst 33258染色固定液 50 ml Hoechst 33258染色液 50 ml 抗熒光淬滅封片液 5 ml 說明書 1 份 保存條件: 4℃保存,Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本試劑盒自訂購之日起六個月內有效。&nb

    自身抗體檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用專家

    三、《自身抗體檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用專家建議》十三條本《建議》可為廣大臨床醫生和檢驗醫師在日常診療實踐中擬定檢測項目及檢測流程時提供參考。自身抗體檢測的合理應用有賴于檢驗醫生和臨床醫生的共同合作。1、《建議》十三條2《建議》解讀 (1)對臨床懷疑有自身免疫性疾病的患者建議進行自身

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