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    細胞凋亡與壞死的區別和實驗觀測(三)

    3.電子顯微鏡雖然光學顯微鏡下可以看見胞膜起泡現象和凋亡小體,但凋亡細胞的形態學變化大多發生在超微結構,因此用光鏡觀察難以令人滿意,而透射電鏡可清楚地觀察到細胞結構在凋亡不同時期的變化。電鏡形態學觀察是迄今為止判斷凋亡最經典、最可靠的方法,被認為是確定細胞凋亡的金標準。檢測方法:透射電鏡標本經戊二醛和餓酸雙重固定,丙酮脫水,環氧樹脂包埋,超薄切片,醋酸枸椽酸電子又重染色,透射電鏡觀察。掃描電鏡標本經戊二醛和餓酸雙重固定,乙醇逐級脫水,CO2臨界點干燥,真空噴金,掃描電鏡觀察。結果評判: 可見凋亡細胞表面微絨毛消失,核染色質固縮、邊集,常呈新月形,核膜皺褶,胞質緊實,細胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小體和凋亡小體被臨近巨噬細胞吞噬現象。缺點:1)只能定性,不能定量;2)標本處理過程復雜,設備相對昂貴,對檢查者的技術水平要求較高,不適于大批標本檢測;3)在組織切片上進行電鏡觀察時,有時凋亡很難與正常細胞有絲分裂相鑒別,......閱讀全文

    細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法

    一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較

    ◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法   細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用

    細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用

      細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或主動誘發細胞

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-4

    六、Caspase-3活性的檢測 Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3為關鍵的執行分子,它在凋亡信號傳導的許多途徑中發揮功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活,活化的Caspase-3由兩個

    細胞凋亡,細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法

      一、形態學觀察方法   1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。   2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側

    細胞凋亡實驗

    細胞凋亡(Apoptosis) 又稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指細胞基因調控的一種自主性的自殺現象。即是在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自主結束生命的死亡方式。凋亡一詞最早是由年澳大利亞組織病理學家John Kerr通過研究大鼠肝左葉細胞死亡時,

    流式檢測細胞凋亡還有哪些方法?

      前面講到利用流式細胞術進行細胞凋亡檢測的annexinV/PI雙染色法,今天主要簡要介紹SYTO/PI雙染色法、細胞DNA含量分析法、TUNEL法。  SYTO/PI雙染色法  SYTO系列染料是一種細胞膜通透性的核酸染料,可以自由進入活細胞與細胞內的DNA或者RNA結合,未結合時發射熒光信號的

    六種染色后光鏡觀察法檢測肝癌細胞凋亡

    作者:楊連君,司曉輝,王文亮,王文勇,趙一嶺,方正清[摘  要] 目的:探討簡便易行的在光鏡下通過形態學觀察檢測細胞凋亡的方法,并對其進行比較。方法:首先用6%的乙醇作用6 h誘導人肝細胞癌細胞系HCC9204細胞凋亡,然后進行未固定細胞的臺盼藍染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)雙染色,

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-2

    二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面(細胞膜)的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍,又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種,以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞

    細胞凋亡及其檢測技術-1

    細胞凋亡又稱程序性細胞死亡(PCD),是細胞衰老自然死亡的主要方式之一,在機體中承擔著重要的調控作用。它不僅在維持細胞群體數量的穩定、胚胎發育和免疫系統的克隆選擇方面,而且在腫瘤發生、發展、抗腫瘤藥物的治療等方面具有十分重要的作用。細胞凋亡是由基因編程控制的細胞主動參與的自殺過程沒事一種生理性調節機

    常用的幾種細胞凋亡檢測方法詳細步驟介紹

      細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。   第一種 細胞凋亡的形態學檢測   根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。  

    流式細胞儀之細胞凋亡檢測的PI雙染色法

    流式細胞儀是檢測懸浮的單細胞或微粒的信號分析技術,被譽為實驗室的“CT”,可用于細胞凋亡檢測 、細胞分選、單細胞內細胞因子表達分析等。這里簡單介紹下流式細胞儀檢測細胞凋亡的兩種方法。第一部分 流式細胞儀 檢測細胞凋亡:Heochst 33342/PI雙染色法一、基本原理

    細胞凋亡檢測方法

      細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。一、細胞凋亡的形態學檢測  根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。  1 光學顯微鏡和倒

    細胞凋亡的幾種檢測方法

    一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用(二)

    C.起源于細胞核的凋亡信號及HSP的調控 細胞核內DNA的斷裂是細胞凋亡的一種生化特征,是由于特異的核酸內切酶活化后將染色質切割成較短的DNA片段。但是,DNA的損傷也可能是一個細胞凋亡級聯反應的早期信號轉導事件,經研究認為:當DNA發生斷裂后,組蛋白H1.2轉運至細胞質,通過激活Bcl-2蛋白-B

    DNA Ladder的測定方法是怎么一回事?

      不同細胞不同狀態是有不同死法的,具體是細胞凋亡、壞死、還是程序性壞死,需要進一步排查分析來確定。而細胞凋亡是個復雜的過程,針對凋亡時期不同,檢測的方法有所不同。那如何去確定哪條途徑被觸發,在哪個步驟被阻斷,以及抑制劑是否能夠抑制呢?下面介紹幾種常用的測定方法。  一:細胞凋亡的形態學檢測  發生

    細胞凋亡(TUNEL,TUNEL染色)檢測技術

    細胞凋亡是指為維持內環境穩定,  生物體內細胞在特定的內源或外源信號誘導下,其死亡途徑被激活,并在有關基因的調控下發生的程序性死亡過程。細胞凋亡是程序性死亡過程的一種主要形式,它涉及染色質凝聚和外周化、細胞質減少、核片段化、細胞質致密化、與周圍細胞聯系中斷、內質網與細胞膜融合,最

    細胞凋亡的幾種檢測方法介紹

    一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜 不

    常用細胞凋亡檢測方法(圖)-2

    細胞凋亡的圖片5細胞凋亡的圖片6細胞凋亡的研究方法一、定性和定量研究只定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察(普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)進行定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。二、區分凋亡和壞死可將二

    細胞凋亡的幾種檢測方法

    一、形態學觀察方法   1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。   2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。   3、臺盼藍染

    細胞凋亡的幾種檢測方法

    一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果

    細胞凋亡的幾種檢測方法

    一、形態學觀察方法  1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。  2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。  3、臺盼藍染色:如果

    細胞凋亡實驗操作細則

    一、實驗目的: 1、掌屋凋亡細胞的形態特征 2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事

    流式細胞術在血液學中的應用(七)

    細胞凋亡研究細胞凋亡是細胞在基因控制下的有序死亡,在疾病發生、發展中有重要作用,因而研究細胞凋亡有重要意義。細胞凋亡檢測方法很多,應用流式細胞儀技術可根據細胞在凋亡過程中發生一系列形態、生化變化從多個角度對細胞凋亡進行定性和定量的測定。 細胞形態變化:通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化來觀

    韓家淮教授最新JBC:細胞壞死關鍵因子

      來自廈門大學生科院,浙江大學生科院等處的研究人員在之前的基礎上,進一步揭示了細胞壞死關鍵因子:蛋白激酶RIP3的作用機制——RIP3-MLKL之間的相互作用在necrosomes形成過程中扮演了關鍵角色,這一點在人類和小鼠中均得到了證實。相關成果公布在JBC雜志上。   文章的通訊作者是廈門大

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用(一)

    細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或主動誘發細胞死亡

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-3

    ◆ 細胞壞死與細胞凋亡細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。 一、細胞凋亡的形態學檢測   根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞

    細胞凋亡實驗步驟及注意事項

    一、實驗目的1、掌屋凋亡細胞的形態特征 2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗——Heochst 33342/PI雙染色法

    實驗方法原理流式細胞儀通常根據細胞膜完整性將細胞分為“活細胞”和“死細胞”,因此正常細胞和凋亡細胞歸為活細胞。活細胞染料如Hoechst 33342能少許進入正常細胞膜而對細胞沒有太大得細胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡細胞中的熒光強度要比正常細胞中要高,Hoechst 33342在凋亡細

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