剛進實驗室的小伙伴們,當你們在進行RNA的提取,RT-PCR和QPCR實驗時,是否會有這樣的感受,明明是按照實驗步驟往下做的,實驗結果卻不如人意,甚至很糟糕呢?小編我也曾經被實驗狠狠地虐過呢~為了減少實驗對親們的打擊,在此獻上自己在實驗過程中的一些小經驗,希望能幫助到各位小伙伴們~(一)RNA提取篇在RNA提取過程中,嚴格防止RNA酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成功的關鍵。對于人、動植物組織、細菌、細胞等多種RNA的提取,Trizol法效果良好,可同時分離一個樣品內的RNA/DNA/蛋白質。Trizol裂解細胞,溶解細胞內含物,同時因含有RNase抑制劑可保持RNA的完整性。如果對RNA純度要求極高或者樣品難以提取,也可以選擇使用RNA提取試劑盒。有同學用過國內的天根,效果還好。小編曾用過Omega的RNA提取試劑盒,效果也挺好的,Promega的總RNA提取試劑盒對多種樣本的小量純化提取效果也還不錯。動植物總RNA提取......閱讀全文
學做實驗的方法初步入門-迷你離心機技術文章實驗方法:學做實驗兩者方法有所不同,大概分為兩種方法:向別人學習和自學。下面分別介紹一下吧基本操作和基礎知識在開始學做實驗的時候,最好有人指導。做實驗的內容,大概分為基本操作和具體實驗的操作。基本操作是具體實驗的基礎,例如:怎樣量取容積,怎樣測量和調節PH值
實驗方法:學做實驗兩者方法有所不同,大概分為兩種方法:向別人學習和自學。下面分別介紹一下吧基本操作和基礎知識在開始學做實驗的時候,有人指導。做實驗的內容,大概分為基本操作和具體實驗的操作。基本操作是具體實驗的基礎,例如:怎樣量取容積,怎樣測量和調節PH值,怎樣清洗實驗室器皿,無菌操作技術,怎樣使用p
PCR技術簡介 前言 一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reacti
何謂PCR,簡單的說,PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內 In Vitro 的大量合成。基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制.目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。 PCR的要素基本的PCR須具備1.要被復制的DNA模板 Template 2
前言 一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Po
血液是唯一與所有器官都有接觸的組織,攜帶著有關機體的大量寶貴信息。在理論上,檢測血液攜帶的 DNA、RNA、囊泡和細胞殘骸可以幫助人們診斷和監控各種疾病。 產前基因篩查是血液檢測的一個重要應用,通過分析孕婦血液中的胎兒DNA來鑒定染色體異常(比如唐氏綜合癥)。此外,越來越多的研究者開始關注血液
近幾年來, DNA 微陣列已經被公認是分子生物學研究的一種標準方法。特別是在生物醫學研究方面,常用物種的微陣列一面世就得到廣泛應用。但是對于非模式生物來說 ,微陣列的應用尚未得到充分開展,而這些物種往往表現出一些很有趣的生理表型。對大多數比較生物學的研究者來說,制備一個新物種的 D N A 陣列或微
分析測試百科網訊 2019年8月1日,由國家食品質量監督檢驗中心主辦、德國耶拿分析儀器股份公司協辦的 “2019年食品檢測實驗室管理與技術專題培訓班”在中國食品發酵工業研究院舉行。本次培訓班為期2天,共有六十余名來自食品檢測的從業人員參與,分析測試百科網作為合作媒體,為您帶來全程跟蹤報道。培訓班
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養可用于:(1)血腦屏障的研究;(2)腦血管疾病的病理生理及分子生物學研究;(3)新藥篩選;(4)腦微血管內皮細胞生理生化及藥理學研究。實驗方法原理以大腦皮質為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養,成功地摸索出大鼠腦微血管內皮細胞分離和原代培養的方法,并獲得純
實驗步驟 一、材料 這里用到的所有化學試劑都為分子生物學等級,或者用它們最高純度的等效物。所有的塑料和玻璃制品,包括瓶子和移液器吸頭都要高壓滅菌,在核酸實驗操作過程中必須始終戴手套。 cDNA A T L A S陣列從Clo
實驗概要掌握RNA提取的基本技術,了解RNA提取過程中的各種注意事項。實驗原理RNA提取是分子生物學實驗中難度較大的實驗技術。 RNA提取和DNA提取有類似的地方,因為它們都是核酸,都具有較好的水溶性。提取RNA首先破碎細胞,然后用提取液將RNA溶出,反復抽提去除蛋白質,加入乙醇沉淀RNA
電鏡原位雜交實驗可以用于:(1)研究特定核苷酸序列的亞細胞定位;(2)許多研究者已經從光學顯微觀察擴展到對超微結構的觀察。(3)特別是利用地高辛或生物素作為報告分子的非放射性探針,不必像放射性探針那樣需要長時間暴露,因此整個過程可以在 24 h 內完成。實驗方法原理從理論上講,前包埋原位雜交技術的敏
實驗方法原理 從理論上講,前包埋原位雜交技術的敏感性高于后包埋原位雜交技術,因為前者可觀察到來自整個切片厚度的信號。但是,探針并不一定能穿透整個切片厚度,特別是用較長的探針。為了增加
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單
腫瘤細胞培養實驗 提高腫瘤細胞培養存活率和生長率的實驗 實驗方法原理 腫瘤組織及細胞在模
腫瘤細胞培養實驗可用于:(1)研究腫瘤的發生機理;(2)研究生物學行為;(3)研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰
第六節 自動化技術在微生物檢驗中的應用 微生物鑒定的自動化技術近十幾年得到了快速發展。數碼分類技術集數學、計算機、信息及自動化分析為一體,采用商品化和標準化的配套鑒定和抗菌藥物敏感試驗卡或條板,可快速準確地對臨床數百種常見分離菌進行自動分析鑒定和藥敏試驗。目前自動化微生物鑒定和藥敏分析系統已在世界
第六節 自動化技術在微生物檢驗中的應用 微生物鑒定的自動化技術近十幾年得到了快速發展。數碼分類技術集數學、計算機、信息及自動化分析為一體,采用商品化和標準化的配套鑒定和抗菌藥物敏感試驗卡或條板,可快速準確地對臨床數百種常見分離菌進行自動分析鑒定和藥敏試驗。目前自動化微生物鑒定和藥敏分析系統已
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療相關研究。實驗方法胰酶消化法1胰酶消化法2實驗方法原理將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基中培養,使細胞得以生存、生
近日,國家自然科學基金委員會發布了《關于發布“十三五”第一批重大項目指南及申請注意事項的通告》。《通告》表示,國家自然科學基金委員根據6月發布的《國家自然科學基金“十三五”發展規劃》優先發展領域,發布了“十三五”第一批26個重大項目指南。 6月,《自然科學基金委“十三五”發展規劃》(以下簡稱“
醫學真菌學檢查是診斷真菌病的重要依據,隨著真菌感染病例的日益增多,對實驗室的診斷也提出了更高的要求。不論是患者淺部或深部感染診斷,幾乎全依賴于臨床標本的真菌學檢查。特別是系統性真菌感染,其早期特異的診斷方法是挽救患者生命的關鍵,而病原真菌的形態結構十分多樣,在不同條件下同一真菌也可有不同特點的形態。
實驗方法原理帕金森病(Parkinson disease, PD)是中老年常見的基底節神經元進行性退行性疾病,主要累及黑質和紋狀體多巴胺遞質系統。6-脛基多巴胺(6-0HDA)和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)是兩種主要的多巴胺能神經毒性物質,可以很好的模擬PD患者的臨床表現
基本方案 實驗方法原理 帕金森病(Parkinson disease, PD)是中老年常見的基
人肝惡性淋巴瘤裸小鼠原位和皮下移植模型的建立可以:(1)探討肝惡性淋巴瘤發病機制;(2)為實驗治療提供工具;(3)為肝臟惡性淋巴瘤病因學和發病機制提供實驗研究用的腫瘤動物模型。實驗方法原理采用人肝惡性淋巴瘤術中新鮮組織塊分別植入裸小鼠肝實質內和肩胛間皮下, 觀察原位移植和皮下移植成瘤率, 移植瘤的侵
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
SNP (Single Nucleotide Polymorphism)即單核苷酸多態性,可以用于檢測由于單個核苷酸改變而導致的核酸序列多態性(Polymorphism)。實驗方法原理由于單個核苷酸改變而導致的核酸序列多態性(Polymorphism)。據估計,在人類基因組中,大約每千個堿基中有一個
SNP (Single Nucleotide Polymorphism)即單核苷酸多態性,可以用于檢測由于單個核苷酸改變而導致的核酸序列多態性(Polymorphism)。實驗方法原理由于單個核苷酸改變而導致的核酸序列多態性(Polymorphism)。據估計,在人類基因組中,大約每千個堿基中有一個
基本方案 實驗方法原理 由于單個核苷酸改變而導致的核酸序列多態性(Polymorphism)。據估
實驗概要Southern技術是指以Southern名字命名的DNA轉移雜交技術。它可用于基因組特定DNA序列的定位,可以測定相關片段的同源性、可以從c庫、基因組文庫中篩選完整基因等。用一種或多種限制性內切酶對基因組DNA加以切割,通過瓊脂糖凝膠電泳分離酶切片段,隨后,使DNA在原位變性,并從凝膠轉移