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  • 國際ZLRFect小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明

    介紹 RFect小核酸轉染試劑是國際知名科學家崔坤元博士領導我公司研發團隊在美國西雅圖實驗室研發成功的一種新型的小核酸轉染試劑。RFect可用來轉染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以內的小分子RNA和DNA,轉染細胞包括絕大多數貼壁生長的細胞,如一般細胞株、腫瘤細胞株等。目前,無論國外還是國內,轉染試劑的主要成分均為脂質體或聚乙烯亞胺(Polyethylenimine, PEI),這兩種成分都具有很大的細胞毒性,并且轉染效果不好。RFect采用新型的動物源性的納米材料,毒性很低并且擁有非常卓越的轉染性能。與其它品牌的小核酸轉染試劑相比,RFect的細胞轉染陽性率一般在90%以上,Lamin A/C 基因抑制效率在95%以上,而其它品牌轉染試劑的細胞轉染陽性率一般不超過70%,Lamin A/C 基因抑制效率不超過75%。RFect細胞毒性很低,轉染細胞死亡率不......閱讀全文

    國際ZLRFect小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明

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    RFect原代細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明

    RFectPM原代細胞小核酸轉染試劑(RFect原代細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑)???????????????????????????????????????????????????????貨??? 號:BIOG-11014: 0.5ml????????? BIOG-11015

    單核細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明

    RFectMN單核細胞小核酸轉染試劑 ???????????????????????????????????????????????????????貨 ???號:BIOG-11024: 0.5ml?????? BIOG-11025: 1.0ml ?????????? BIOG-11026: 1.5m

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    GenMuteTM siRNA轉染試劑(Cat#SL100568)是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。siRNA/DNA共轉染時,siRNA的最佳濃度范圍是0.5ηM到10ηM,過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”,切勿使用超過20ηM的siRNA。以24孔板為例,如下步驟將對如何優

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    siRNA-轉染程序

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    GenMuteTM siRNA轉染試劑(Cat#SL100568)是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。最佳的siRNA濃度范圍是1.0nM到10nM,過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”。我們實驗室已經使用GenMuteTM轉染試劑成功敲除了內源表達的生長因子。以24孔板為例,如下步

    siRNA的轉染方法

    將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞中的方法主要有以下幾種:1.磷酸鈣共沉淀將氯化鈣,RNA(或DNA)和磷酸緩沖液混合,沉淀形成包含DNA且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA復合物粘附到細胞膜并通過胞飲進入目的細胞的細胞質。沉淀物的大小和質量對于磷酸鈣轉染的成功至關

    siRNA的轉染方法

    將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞 中的方法主要有以下幾種:1.磷酸鈣共沉淀將氯化鈣,RNA(或DNA )和磷酸緩沖液混合,沉淀形成包含DNA 且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA 復合物粘附到細胞 膜并通過胞飲進入目的細胞 的細胞 質。沉淀物的大小和質量對

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    我們使用PolyJet DNA轉染試劑轉染表皮細胞及Raw267.4細胞非常有效,并且毒性很小。對于如何更好的優化PolyJet轉染試劑,我樂意分享以下幾點:1、DNA的質與量。DNA的純度對于轉染實驗至關重要。由E Coli制備的DNA,A260/280必須達到1.80甚至更高。對于6孔板,通常每

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      哺乳動物的轉染技術在60年代末70年代初即已引入。  將外源DNA 導入哺乳動物細胞的方法大致可分為兩大類,即生物方法和物理化學方法。物理化學方法中常用的有磷酸鈣法、顯微注射、電穿孔、脂質體介導的轉染,以及最近出現的以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術。生物方法則主要是以病毒作為載體,通過病毒感染

    RNA轉染試劑的對比

    近期,上海公衛臨床研究中心的一位研究生應用兩種轉染試劑Turbofect transfection reagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(Engreen)進行了一次RNA轉染比較。比較情況如下:實驗方法轉染試劑:Turbofect transfection reage

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    細胞轉染快準狠GeneCopoeia轉染試劑的適用細胞

    細胞轉染是指將外源基因如DNA,RNA等導入細胞內的一種技術。根據哺乳動物細胞蛋白表達流程,細胞培養完成后需進行細胞轉染,根據不同的實驗目的可選擇不同的轉染方法。目前,常用的細胞轉染方法主要分為三類途徑:物理介導(電穿孔法,基因槍法、顯微注射法)、化學介導(脂質體轉染法、磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物

    細胞轉染率低-轉染試劑要全背鍋嗎?

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    DNA體外轉染試劑_如何準備轉染所需的質粒DNA

    轉染效率受到諸多因素的影響,除了細胞、培養基和載體等影響因素外,另外一項非常重要的因素便是DNA的質量。為了比較不同廠家的轉染效率,我們分別從三家不同的供應商購買了質粒制備試劑盒來制備pEGFP-N3質粒DNA,并通過不同的方法將制備的pEGFP-N3質粒轉運至NIH-3T3細胞。pEGFP-N3質

    覆蓋更寬廣的領域轉染試劑

    Roche的FuGENE 6 轉染試劑低毒高效、使用方便,應用細胞株已達500多種,可謂有口皆碑——即使近10年來Roche在試劑領域甚為低調甚少宣傳,一支獨秀的FuGENE 6 依然讓Roche保持在轉染領域數一數二的地位。經過10年的沉積,如今Roche新推出FuGENE HD轉染試

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    FuGENE HD 轉染試劑:覆蓋更寬廣的領域?Roche的FuGENE 6 轉染試劑低毒高效、使用方便,應用細胞株已達500多種,可謂有口皆碑——即使近10年來Roche在試劑領域甚為低調甚少宣傳,一支獨秀的FuGENE 6 依然讓Roche保持在轉染領域數一數二的地位。經過10年的沉積,如今Ro

    RNA實驗方案和應用(二)

    miRNA?模擬物是化學合成的,雙鏈RNA分子(通常長度為18–24個核苷酸),通過轉染到細胞中,模擬成熟的內源性miRNA分子。miRNA抑制劑是單鏈(通常長度為21–25個核苷酸),經過修飾的RNA分子,通過轉染到細胞中,特異性的抑制miRNA的功能。模擬物和抑制劑包含一些化學修飾,以便提高活性

    hepg2細胞siRNA轉染條件

    之前我們用過Lipo,說明書上要求細胞的密度在70%左右,同時在轉染后的4-6小時注意要換培養液,后來我們實驗室換了RFect sRNA Transfection Reagent,細胞密度在45%左右 ,設置siRNA終濃度10nM,30nM,50nM,100nM四個梯度,每個梯度最好做2個復孔,一

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    RNAi 是一種高效的特異性強的基因表達抑制,應用RNAi生物學機制進行基因功能研究已經成為一種創新性的新方法,人們第一次可以如此快速和方便地抑制細胞中特定基因的表達水平,從而用于分析特定基因在細胞中的功能。RNAi 技術還為新藥開發、疾病治療提供了創新性的方法和途徑,有著極其廣闊的應用前景。轉染是

    實時熒光定量PCR技術

    通過實時熒光定量PCR技術實現對miRNA靶向物mRNAs的相對定量分析1 導言小RNA(miRNAs)是一種內源性非編碼蛋白的小分子RNA,它們是許多基礎的細胞過程中基因表達的主要調節因子,這些過程包括細胞增殖、細胞分化以及細胞凋亡等。miRNA在腫瘤生長過程中也發揮著重要作用。一般來說,miRN

    關于轉染試劑的基本信息介紹

      轉染(transfection)指真核細胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標志的過程。DNA轉染技術的發展對現代分子生物學產生了巨大的影響。基因轉染技術不僅是研究轉基因和基因表達的重要工具,而且是基因治療的關鍵步驟。理想的基因轉染試劑應該具有如下特點:高效轉染;安全;低細胞毒性;方法簡單;省時、

    關于轉染試劑的歷史背景介紹

      已有眾多的文獻報道,脂質體本身會參與細胞生理活動,引起基因表達的上調或下調。如參與PKC(蛋白激酶C)通路調節(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):3

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