獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對...
獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對其進行成像分析簡介基于細胞成像的分析技術一般需要使用熒光染料進行標記,一些熒光標記可能對活細胞具有毒性或者只能用于固定過的細胞進行染色。無標記細胞分析技術使得研究者既無需耗時耗力的染色流程也無需擔心染料對正常細胞活力的影響,就可以計算出細胞數目和細胞匯合度,第一時間獲得量化的細胞增殖及健康情況的數據。裝有MiniMax. 300細胞成像模塊的SpectraMax. i3多功能微孔板檢測平臺具有ZL的StainFree.無標記細胞分析技術。該技術可應用于細胞增殖、細胞毒性或其他分析,無需DAPI 標記細胞核,DAPI作為活細胞染料可結合DNA,但長時間標記會對細胞產生毒性。 本文將比較使用無標記細胞分析技術進行細胞計數與使用傳統的熒光染料標記細胞核和整個細胞進行計數的區別。同樣展示出如何通過無標記細胞分析技術來替代熒光染料標記的方法來獲得化合物處理細胞后的IC50曲線。優......閱讀全文
獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對...
獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對其進行成像分析簡介基于細胞成像的分析技術一般需要使用熒光染料進行標記,一些熒光標記可能對活細胞具有毒性或者只能用于固定過的細胞進行染色。無標記細胞分析技術使得研究者既無需耗時耗力的染色流程也無需擔心染料對正常細胞活力的影響,就可以計算出細胞數目和細胞匯
無需熒光標記也能檢測基因
據物理學家組織網近日報道,美國佐治亞大學的科研人員采用專門設計的納米材料,開發出了無標記的新型DNA和RNA檢測方法,有望降低常用基因檢測技術的成本和復雜性。相關研究報告發表在近期出版的《美國化學學會期刊》上。 科學家稱,他們的發現或可用于幫助醫生診斷白血病和淋巴癌等特定的癌癥,還能探測出
無需熒光標記也能檢測基因
美國佐治亞大學的科研人員采用專門設計的納米材料,開發出了無標記的新型DNA和RNA檢測方法,有望降低常用基因檢測技術的成本和復雜性。相關研究報告發表在近期出版的《美國化學學會期刊》上。 科學家稱,他們的發現或可用于幫助醫生診斷白血病和淋巴癌等特定的癌癥,還能探測出在組織中存在的病毒,同時可用于法醫
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE),是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞。其基本原理如下:CFSE能夠輕易穿透細胞膜,在活細胞內與胞內蛋白共價結合,水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中,它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE),是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞。其基本原理如下:CFSE能夠輕易穿透細胞膜,在活細胞內與胞內蛋白共價結合,水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中,它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強
分子間相互作用分析:熒光標記VS無標記
同無標記技術相比,利用熒光技術檢測分子間相互作用的實驗成本較低,例如熒光共振能量轉移和凝膠遷移實驗,無需昂貴的儀器便可完成結合分析。然而,基于熒光標記的檢測技術也存在自己的局限性,像凝膠遷移實驗就只能用來檢測蛋白和核酸間的相互作用。那么在具體的實驗中,研究人員該如何選擇合適的檢測技術呢?不要著急,下
實時無標記細胞分析技術(RTCA)常見問題解析
技術原理篇Q: 什么事實時無標記細胞功能分析技術?A: 艾森實時無標記細胞功能分析技術(RTCA)整合了微電子技術、細胞生物學和分子生物學。技術的核心是微電子生物感應芯片,這些芯片整合在細胞培養板的孔中,使得細胞功能分析儀無需任何標記就可以實時檢測活細胞的活性。實時無標記細胞功能分析儀可以簡單、可靠
實時無標記全自動細胞分析儀介紹
iCELLigence全自動細胞分析儀讓您遠離MTT實驗不斷重復還無法得到統一結果的煩惱,讓您不再因只看到其中的一個點而損失了其它的細胞生物學信息而無計可施,因為它可以清楚的記錄下細胞完整的一生!一:全自動細胞分析儀儀器原理iCELLigence實時無標記全自動細胞分析儀是一款新型的細胞分析平臺,具
實時無標記細胞分析技術(RTCA)常見問題解析(一)
身在實驗室中的您,RTCA 實驗做了很多,操作越來越嫻熟,實驗曲線也越來越漂亮,當沉浸在實驗成功的喜悅中時,是不是也有對 RTCA ?技術的些許疑惑和問題?不用擔心,下面昊諾斯就馬上為您奉上豐盛的 RTCA 技術 FAQ 套餐,將您心中的問題一網打盡!技術原理篇Q: 什么事實時無標記細胞功能分析技術
非熒光標記的遺傳標記分析技術
近年來,美國GENTEON公司采用激光致導的動態熒光檢測技術(Dynamic fluorescence),結合多通道毛細管電泳技術,研制出Capella 400型全自動基因分析系統。該儀器采用動態熒光檢測技術,徹底消除了傳統熒光DNA標記檢測的高成本和復雜性,可精確有效到檢測未經標記的單鏈或雙鏈核苷
免疫熒光共標記怎么計算共標記的細胞個數
共定位的定義:共定位是對樣品內兩種熒光標記的信號共同分布的位置進行分析。 共定位就如字面意思上所說的,只能夠表明蛋白A和B都在此細胞有表達,并且在同樣的細胞內位置/細胞器。相關短語:共定位通道 PDM Channel 細胞共定位 Cellular co localization 細胞內共定位信息 c
細胞表面標記的檢測技術
堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶(APAAP)免疫組化染色技術檢測淋巴細胞表面標記 活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 APAAP(Al
細胞表面標記的檢測技術
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免疫熒光組織(細胞)化學技術——熒光素及其標記抗...2
免疫熒光組織(細胞)化學技術——熒光素及其標記抗體的方法 2P3(2)Chadwick氏法?試劑和材料:抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸鹽緩沖鹽水、1%硫柳汞、離心機及離心管、三角燒瓶(25 ml)、冰槽、無菌吸管及毛細滴管、燒杯(500 ml
免疫熒光組織(細胞)化學技術——熒光素及其標記抗...1
制備熒光抗體是免疫熒光組織化學的重要技術之一,制備特異性強和高效價的熒光抗體必須選用高質量的熒光素和高效價的抗體。?一、熒光素?熒光是指一個分子或原子吸收了給予的能量后即刻引起發光,停止能量供給,發光也瞬時停止。可以產生明亮熒光的染料物質,稱熒光素。目前主要常用于標記抗體的熒光素如下:?1、異硫氰酸
腫瘤細胞的標記及活體熒光成像
摘要 以綠色熒光蛋白( GFP) 作為標記基因轉入人類肺癌細胞系(ASTC2a21) , 經800 mg/ L G418 篩選, 獲得5 株高表達細胞系. 利用流式細胞儀對GFP 表達的穩定性進行了初步研究, 結果表明本實驗中有些細胞株間GFP 表達穩定性有顯著差異( P < 0101) . 將穩定
細胞骨架的熒光探針標記方法
細胞骨架主要有微管(micmtuble, MT),微絲(microfilament, MF),中間絲(intermediate filament, IF三種類型。它們分別由不同的蛋白單體組裝而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌動蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是細胞骨架的重要組
熒光素標記抗體技術
(一) 原理 目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在鹼性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合,標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力
PCR熒光標記選擇探針法還是染料法?
?? 特異性熒光標記——探針法:? ?是目前臨床最常用的方法,在加入一對引物的同時再加入一對探針,特異性好,這里列舉的是TaqMan水解探針:一段與靶基因特異性結合的序列,分別在5’端加入熒光報告基團,3’端加入熒光淬滅基團。其核心是利用taq酶的5’-3’外切酶活性切斷探針,使得使熒光報告基團和熒
非標記的、動態實時細胞分析檢測技術(一)
羅氏xCELLigence: 非標記的、動態實時細胞分析檢測技術 目前,大部分細胞檢測方法采用的仍是傳統的終點法----僅僅給實驗定格了一個最終結果,而且經常需要標記和破壞細胞。這就是當前細胞分析方法的最大限制,因為細胞是活體,其生物學和細胞進程是動態而非靜態的。因此,為了更充分的了解和測量生物學
非標記的、動態實時細胞分析檢測技術(二)
為了展示xCELLigence系統在細胞分析方面的功能,以下就其幾個方面的突出應用做簡要介紹。 細胞增殖和毒性的動態監控利用多種癌癥細胞系模型進行的細胞增殖分析是評估不同抗癌化合物的效能的基礎分析方法之一。xCELLigence系統可用來定量和動態地檢測細胞增殖和細胞毒性。每種細胞都有獨特的增殖
免疫球蛋白標記技術_熒光素標記抗體技術
實驗方法原理目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200,RB200)。在堿性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合,標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力。在熒
綠色熒光蛋白(GFP)標記亞細胞定位
一、原理利用綠色熒光蛋白(GFP)來示蹤胞內蛋白的技術。利用GFP融合蛋白技術來進行活細胞定位研究是目前較為通行的一種方法,在光鏡水平進行研究,不需要制樣,沒有非特異性標記的影響。并且GFP的分子量為27kD,經激光掃描共聚集顯微鏡激光照射后,可產生一種綠色熒光,從而對蛋白質進行精確定位。激光掃描共
細胞凋亡檢測實驗——熒光探針雙標記法
實驗方法原理本實驗用1μg/ml 三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡,同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)對細胞進行雙重染色,可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿(HT)是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病,
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記單層培養細胞
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒FCS磷酸鹽儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基,加入新鮮的無磷酸培養基,培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基,并加?32P 磷酸鹽至 2
《光學》:無標記染料或標簽-解析光衍射極限納米結構
來自奧地利格拉茨大學的研究人員近日開發了一種新的測量和成像方法,可在不需要任何染料或標簽的情況下解析小于光衍射極限的納米結構。這種激光掃描顯微鏡新方法彌補了傳統顯微鏡和超分辨率技術之間的差距,有朝一日或可被用來觀察復雜樣品的精細特征。 在國際光學出版集團的高影響力期刊《光學》上描述的這種新方法
DNA結合染料對細胞核的多色標記技術的多種應用
DNA結合染料對細胞核的多色標記技術?細胞核是動物細胞器中最大的。在哺乳動物細胞中,核的平均直徑約為6μm,約占總細胞體積的10%。核包含細胞的大部分遺傳物質,組織成多個長線性DNA分子,與多種蛋白質(例如組蛋白)復合形成染色體。這些染色體內的基因是細胞的核基因組。核的功能是維持這些基因的完整性,并
無標記活細胞動態分析技術在神經生物學方面的應用-一
還原最真實的細胞變化 - 無標記分析,神經生物學研究的新利器 神經生物學是生物學中研究神經系統的解剖、生理和病理方面內容的一個分支。神經科學尋求解釋神智活動的生物學機制,即細胞生物學和分子生物學機制。近年來神經干細胞逐漸成為神經生物學中的一大研究熱點。神經干細胞是一群能自我修復和具有多種分化潛能的細
無標記活細胞動態分析技術在神經生物學方面的應用-二
?三、神經干細胞的追蹤 細胞追蹤是細胞學和生物學研究中重要的組成部分之一,在細胞行為、藥物和疾病中的研究至關重要,尤其對神經干細胞增殖和分化的變化以及細胞相互作用的調控機制研究具有重要的意義。目前對一個目標細胞或大量細胞進行全面和準確地追蹤,同時盡量避免其他細胞的干擾,是細胞追蹤的難點,也是近些年細
無標記活細胞動態分析技術在神經生物學方面的應用-三
上圖為懸浮培養的神經球增殖實驗。通過降低載物臺的移動速度和加速度,減少震動對體系的影響,懸浮細胞同樣能進行成像和分析。實驗結果表明,給藥處理后顯著抑制了神經球的增殖。 六、相差和熒光分析的結合除了在相差圖片上的無標記分析外,Cell-IQ還提供了3種熒光通道,多達30多種熒光濾片的選擇,可以滿足絕大