小鼠脾臟樹突狀細胞的分離方法
小鼠脾臟DC是研究最多的淋巴組織DC，其特征為組成性表達MHC-II類分子和CD11c。該細胞群可進一步分為三群：主要分布于邊緣區的CD4+CD8-CD11b+DC，主要分布于T細胞區的CD4-CD8+CD11b-DC和雙陰性DC----CD4-CD8+CD11b+。其中，CD8+DC表達CD1d和DEC-205。我們可以根據需要選擇不同的方法將脾臟DC分選出來。(一)貼壁法小鼠脾臟DC在體外可黏附于玻璃或塑料表面，但培養18-24h后，其黏附能力喪失，借此可與巨噬細胞分離。該方法無需特殊試劑，不需要進行密度梯度離心，操作簡單、省時。但用此方法獲取的DC數量少，純度低，而且分離所得的DC處于不同的分化階段，無法滿足精細實驗的需要。(二)磁珠分選法CD11c表達于所有已知小鼠DC表面，所以將包被了磁珠的CD11c抗體與小鼠淋巴組織或非淋巴組織懸液共孵育并置于磁場后，結合了CD11c抗體的細胞將留在分選柱中，脫離磁場后可分離得到CD......閱讀全文
小鼠脾臟樹突狀細胞的分離方法
小鼠脾臟DC是研究最多的淋巴組織DC，其特征為組成性表達MHC-II類分子和CD11c。該細胞群可進一步分為三群：主要分布于邊緣區的CD4+CD8-CD11b+DC，主要分布于T細胞區的CD4-CD8+CD11b-DC和雙陰性DC----CD4-CD8+CD11b+。其中，CD8+DC表達CD1d和
從小鼠脾臟分離小鼠天然殺傷細胞
實驗步驟基本方案12.為 檢 驗 細 胞 純 度 ，可 加 入 終 濃 度 為 lOug/ml 的 抗 C D 3- F I T C 和 P K 136-PE (抗N K 1. 1 ) 抗體，進 行 流 式 分 析（第四章）。展
小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDC）的培養（六）
【注意事項】1.? 小鼠品系和性別：? ? 多數研究表明，所使用的小鼠品系與獲得 BMDC 的數量和成熟度關系不大[9]，但也有研究表明C57BL/6小鼠可能更好。? ? Lutz表示從C57BL/10,DBA/2,C3 H/J和129等小鼠品系均可獲得足夠數量和純 度的 BMDC,但 Lutz
小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDC）的培養（七）
4.? 培養方法的選擇? ? 本文列出迄今為止最常用的三種BMDC培養方法，我們從下表中可以更清楚地看出這三種方法的異同，相信您能根據您的需要作出正確的判斷。? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?注：1. 該表是從文獻[8]修改和添加而來；????2. 這里的Inaba法指的是其原法[2
小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDC）的培養（二）
1. 這些工作均是在 Ralph M.Steinman的參與下完成的；2. Inaba培養的BMDC來源于小鼠股骨和脛骨中的骨髓；3. Inaba先用抗體+補體法去除骨髓中的淋巴細胞，以防淋巴細胞對BMDC培養的影響；4. 在誘導分化過程中，為防止粒細胞的干擾，Inaba通過每2天輕搖培養板并3/4
小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDC）的培養（五）
? 培養步驟：1. 小鼠骨髓細胞的獲得見Inaba法（改良）中的相應步驟，注意省去溶血步驟。2. BMDC 的大量制備2.1 ?步驟1中獲得的小鼠骨髓細胞計數后用含 10% FBS的RPMI 1640完全培養液調整細胞濃度為2 x 105/ml;2.2 ?鋪至100 mm細菌培養皿（Petri
小鼠骨來源樹突狀細胞(BMDC)的培養步驟
1.取小鼠股骨脛骨，小鼠要年輕！(6W-8W，以前用只年把的養出來外形也張牙舞爪，但流式檢測沒有CD11c表達，很奇怪啊；性別方面公母不限，經典版本說公的好，公的壯實，骨頭大)2.沖骨髓細胞，我沖出來的骨髓細胞永遠沒有文獻上說的那樣多，但不影響大局，我一次用兩只，怕出意外少了細胞，論壇里有戰友說不要
小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDC）的培養（三）
【經典的BMDC培養法】-Inaba法（改良）[3,10]? 背景：1.? Inaba法獲得的BMDC數目為5-7 x 106個/小鼠；2.? Inaba原法操作比較復雜，需要將骨髓中的淋巴細胞等用抗體+補體法預先去除， 后來的改良法均省卻了這個步驟，其實Inaba后來自己也說這個步驟雖然可提高BM
小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDC）的培養（四）
3. BMDC的完全成熟注：步驟2中獲得的BMDC并非完全成熟的DC,若想得到完成成熟的DC,還需LPS,CD40L或TNF-a等的誘導。3.1 步驟2.4或2.9中獲得的BMDC以1200rpm離心5 min,棄上清；3.2 用含重組小鼠GM-CSF（20ng/ml）和IL-4（10ng/ml）的
小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDC）的培養（一）
【經典的 BMDC 制備方法簡圖】?????????????????????????DC 是「Dendritic Cells」的縮寫，中文全稱為「樹突狀細胞」，因其成熟時伸出許多樹突樣或偽足樣突起而得名。DC是由2011年諾貝爾獎獲得者、加拿大 籍科學家 Ralph M.Steinman于1
樹突狀細胞特點
樹突狀細胞是一類形狀不規則的非單核吞噬系統細胞，特點是胞漿有許多長突起呈觸須狀，使整個細胞的形態象一個蜘蛛。樹突狀細胞分散于全身的上皮組織和實質性器官，其細胞數量不超過局部細胞總數的1%；也可遷移到血液和淋巴，其數量不超過血液有核細胞總數的0.1%.在不同組織中，樹突狀細胞有不同名稱，例如血液中的樹
樹突狀細胞簡介
1973年，Steinman和Cohn在小鼠脾臟中發現具有樹枝狀突起的獨特形態的細胞，并將之命名為樹突狀細胞（dendritic cell，DC）。隨著對不同組織來源DC研究的深入，目前已知的DC的亞群包括存在于淋巴組織、血液和非淋巴組織的經典DC（conventional DC，cDC
樹突狀細胞的功能
人體內大部分DC處于非成熟狀態，表達低水平的共刺激因子和粘附因子，體外激發同種混合淋巴細胞增殖反應的能力較低，但未成熟DC具有極強的抗原吞噬能力，在攝取抗原(包括體外加工)或受到某些因素刺激時即分化為成熟DC，而成熟的DC表達高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的過程中，由接觸抗原的外周組織
樹突狀細胞的作用？
樹突狀細胞是一類重要的免疫細胞，它們在人體免疫系統中扮演著至關重要的角色。樹突狀細胞的主要作用包括： 抗原遞呈：樹突狀細胞可以攝取、處理和呈遞抗原給T細胞，從而激活T細胞的免疫應答。 免疫調節：樹突狀細胞可以分泌多種細胞因子，如IL-10、IL-12等，調節免疫應答的強度和方向。 識別病原
樹突狀細胞的類型
樹突狀細胞： 1.濾泡樹突狀細胞（folliculardendritic cell，FDC） FDC定居于淋巴結淺皮質區淋巴濾泡生發中心內。FDC與抗原抗體復合物高度親合力，能夠捕獲和滯留抗原，并在記憶B細胞發育中起重要作用，是參與再次免疫應答的APC. 2.淋巴樣樹突狀細胞（Lymphoi
DC(樹突狀細胞)的制備方法（三）
3.??? DC 細胞的培養及鑒定3.1? 步驟 1 中獲得的 PBMC? 用無血清培養液調整細胞濃度至 2 x 106/ml，置于培養瓶內；3.2? 37℃，5% CO2 培養箱中孵育 2h，以使單核細胞貼壁；3.3 洗去懸浮細胞，在貼壁細胞中加入含重組人 GM-CSF(500-1,000U/ml
DC(樹突狀細胞)的制備方法（二）
【注意事項】1.DC 的來源：DC有多種來源，包括外周血單核細胞（Monocyte）、臍帶血 CD34+細胞、骨髓和胎 肝等，但因外周血單核細胞最容易獲取、數量也最多，所以臨床上被廣泛用作 DC 的來源細胞。2.DC 的成熟度：我們知道，DC 有未成熟和成熟兩種狀態，即 iDC 和 mDC，而 DC
DC(樹突狀細胞)的制備方法（一）
【背景】DC 是「Dendritic Cells」的縮寫，中文全稱為「樹突狀細胞」，因其成熟時伸出 許多樹突樣或偽足樣突起而得名。DC 是由 2011 年諾貝爾獎獲得者、加拿大 籍科學家 Ralph M. Steinman 于 1973 年發現的，是目前發現的功能最強的抗原遞呈細胞 (A
什么是樹突狀細胞？
樹突狀細胞（英語：dendritic cell）又稱樹突狀細胞、樹突狀細胞，是一種存在于哺乳動物的一種白細胞。它存在于血液和暴露于環境中的組織中，如皮膚和鼻子、肺、胃和小腸的上皮組織。它們的作用是調節對當前環境刺激的先天和后天免疫反應。它的其中一個最重要的功能就是將抗原處理后展示給免疫系統的T細胞，
樹突狀細胞的生物來源
人樹突狀細胞起源于造血干細胞(hemopoieticstemcell)。DC的來源有兩條途徑：①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC，稱為髓樣DC(myeloid dendritic cells，MDC)，也稱DCl，與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞；包括朗格漢斯細胞（Langerhan
樹突狀細胞的功能特點
人體內大部分DC處于非成熟狀態，表達低水平的共刺激因子和粘附因子，體外激發同種混合淋巴細胞增殖反應的能力較低，但未成熟DC具有極強的抗原吞噬能力，在攝取抗原(包括體外加工)或受到某些因素刺激時即分化為成熟DC，而成熟的DC表達高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的過程中，由接觸抗原的外周組織遷移
樹突狀細胞的功能研究
人體內大部分DC處于非成熟狀態，表達低水平的共刺激因子和粘附因子，體外激發同種混合淋巴細胞增殖反應的能力較低，但未成熟DC具有極強的抗原吞噬能力，在攝取抗原(包括體外加工)或受到某些因素刺激時即分化為成熟DC，而成熟的DC表達高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的過程中，由接觸抗原的外周組織
樹突狀細胞的分布情況
它們通常少量分布于與外界接觸的皮膚(黏膜)部位，主要為皮膚(在皮膚上的，稱為Langerhans細胞[注：Paul Langerhans (1847-1888), German anatomist])，和鼻腔、肺、胃與腸的內層。 血液中也可發現他們的未成熟型式。他們被活化時，會移至淋巴組織中與T細胞
樹突狀細胞的來源途徑
人樹突狀細胞起源于造血干細胞(hemopoieticstemcell)。DC的來源有兩條途徑：①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC，稱為髓樣DC(myeloid dendritic cells，MDC)，也稱DCl，與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞；包括朗格漢斯細胞（Langerhans
樹突狀細胞的分布范圍
它們通常少量分布于與外界接觸的皮膚(黏膜)部位，主要為皮膚(在皮膚上的，稱為Langerhans細胞[注：Paul Langerhans (1847-1888), German anatomist])，和鼻腔、肺、胃與腸的內層。 血液中也可發現他們的未成熟型式。他們被活化時，會移至淋巴組織中與T
樹突狀細胞的分布范圍
它們通常少量分布于與外界接觸的皮膚(黏膜)部位，主要為皮膚(在皮膚上的，稱為Langerhans細胞[注：Paul Langerhans (1847-1888), German anatomist])，和鼻腔、肺、胃與腸的內層。 血液中也可發現他們的未成熟型式。他們被活化時，會移至淋巴組織中與T
樹突狀細胞的生物來源
人樹突狀細胞起源于造血干細胞(hemopoieticstemcell)。DC的來源有兩條途徑：①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC，稱為髓樣DC(myeloid dendritic cells，MDC)，也稱DCl，與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞；包括朗格漢斯細胞（Langerhan
樹突細胞的分離實驗
實驗步驟基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花結 富 集DC此種技術用于分離DC已經使用了很多年，其間只經過了微小的修改（Steinman衫aZ.， 1979)材 料（帶V 項 目 見 附 錄 1)膠原酶消化的脾臟細胞懸液（見輔助方案）高密度牛血清白蛋白（BSA) 溶液R P M
樹突狀細胞分化主要途徑
分化主要有兩條途徑:①髓樣干細胞在 GM-CSF的刺激下分化為DC,稱為髓樣DC( myeloid dendritic cells,MDC),也稱DC1,與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞;②來源于淋巴樣干細胞,與T細胞和NK細胞有共同的前體細胞,稱為淋巴樣DC( Lymphoid dendriti
樹突狀細胞物種起源
樹突狀細胞( dendritic cell,DC)因其表面具有星狀多形性或樹枝狀突起而得名,是科學家 Ralph M. Steinman于1973年首先發現的。DC尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。DC起源自骨髓多