酶法組織消化技術：從粗制的膠原酶到高純度消化產品二
羅氏高純度研究級別酶混合物Liberase Research Grade Enzyme BlendsLiberase Research Grade Enzyme Blends包含了一系列酶混合物，它們由不同比例的中性蛋白酶（非梭菌蛋白酶）和高純度Collagenase I + CollagenaseII混合組成。在絕大部分應用中，Liberase能替換傳統的膠原酶，并增加細胞產率、細胞活性和細胞功能性。 在嚴格的酶發酵和純化工藝條件下，Liberase Research Grade Enzyme Blends去除了梭菌蛋白酶和胰蛋白酶等雜酶，去除了原料中>98%的內毒素和其他死細胞成分，因此有助于在組織消化過程中，大大提升細胞的活率。Liberase系列產品均經過濾除菌，具有高度的批間一致性，保證了整個實驗階段的消化質量和重復性。Liberase系列產品膠原酶含量（mg/管）膠原酶活性(Wünschu......閱讀全文
酶法組織消化技術：從粗制的膠原酶到高純度消化產品二
羅氏高純度研究級別酶混合物Liberase Research Grade Enzyme BlendsLiberase Research Grade Enzyme Blends包含了一系列酶混合物，它們由不同比例的中性蛋白酶（非梭菌蛋白酶）和高純度Collagenase I + Collage
酶法組織消化技術：從粗制的膠原酶到高純度消化產品一
酶法組織消化中常用的膠原酶（Collagenase），能特異性地降解胞外膠原蛋白，使膠原蛋白和纖維粘連蛋白的網狀結構解離，而不損壞細胞表面結構的完整性。由于細胞外基質的成分復雜，除膠原蛋白外，還含有彈性蛋白，糖蛋白等其他大分子結構。而且不同組織類型，不同物種來源，不同年齡的組織中胞外基質組份不同。所
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的，所用膠原酶有不同類型：1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞，用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的，所用膠原酶有不同類型：1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞，用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
組織的分離實驗_膠原酶消化分離法
實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶，對膠原有很強的消化作用，適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性，但膠原酶對細胞間質有好的消化作用，可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害，效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性，故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗
核電技術：從引進消化到中國制造
我國自主發展核電的決策激發了裝備制造業的熱情。 許連義最近很忙。在《科學時報》記者采訪他的過程中，他不斷接到其他媒體要求采訪的電話。作為國家核電技術公司專家委員會委員，原機械工業部重大裝備司司長，核電工程升溫使他的媒體關注度驟然升高。 此前，為了應對金融危機對中國經濟的負面影響，國務院出臺擴大內
膠原酶的類型及消化類型
膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細胞專用膠原酶，要根據所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型。1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細 胞，用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3
膠原酶消化法—培養臍帶間充質干細胞
人臍帶間充質干細胞具有高度分化潛能，基因穩定、不易突變，不會引起腫瘤；無需配型、無排異，廣泛應用于疾病治療及抗衰老研究。目前，在美容行業及針對亞健康群體的應用，也越來越引人注目。臍帶間充質干細胞臍帶是由包膜、華通氏膠、臍靜脈、臍動脈臍構成。臍帶間充質干細胞存在于華通氏膠中。由于存在數量少，用膠原酶消
組織的分離實驗_胰蛋白酶消化消化分離法
實驗方法原理胰蛋白酶適于消化細胞間質較小的軟組織，如胚胎組織、羊膜、上皮組織、肝、腎等軟組織，對傳代細胞也非常好。用于消化纖維性組織或較硬的癌組織則較差。Ca2+和Mg2+對胰蛋白酶的活性有一定抑制作用，故需用不含這些離子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用，因此在做細胞傳代時，用胰蛋白酶消
膠原酶消化用什么濃度edta終止
膠原酶消化用血清或者含血清的培養基終止。膠原酶一般濃度在百分之0.2左右，使用它來消化細胞時，注意它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶，而且不能被終和。終止是用血清蛋白，血清含有非特異性胰蛋白酶抑制劑。保存于負20度。
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理 對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料 組織酶儀器、耗材 試管離心管尼龍網實驗步驟 1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織酶儀器、耗材試管離心管尼龍網實驗步驟1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~2 ml
酶消化法從Wharton膠中分離干細胞
試劑和材料：1. 培養基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%熱滅活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；2. PBSA；3. 胰蛋白酶，2.5%；4. 膠原酶A，0.1%用PBSA配制；5. 培養瓶；6. 圓錐形離心管，50ml；7. 剪刀
關于酶消化法的胰蛋白酶消化的基本介紹
1、加入消化液：小心吸出舊培養液，用PBS清洗（沖洗），加入適量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以蓋住細胞最好，在37℃培養箱消化2min。 2、顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若細胞質回縮，細胞間不再連接成片，表明此時細胞消化適度。 3、加入培養液：更換吸管，加入新鮮的培養
干消化法與濕消化法的優缺點
1.濕消化法：指在適量的食品樣品中，加入氧化性的強酸，然后在一定溫度條件下反應，破壞食品中的有機物，使待測的無機成分釋放出來，形成不揮發的無機化合物的方法。 優點：有機物分解速度快，加熱溫度較干灰化法低，可減少待測成分的揮發損失。 缺點：試劑用量大，有時空白值比較高，消化過程中會產生大量有害
細胞人工純化的酶消化法介紹
酶消化法是比較常用的純化方法，不僅對貼壁細胞可行，能利用上皮細胞和成纖維細胞對胰蛋白酶的耐受性不同，使兩者分開，達到純化的目的，對貼壁細胞與半貼壁及粘附細胞間的分離純化也是十分有效的。 (1)上皮細胞與成纖維細胞的分離純化 兩者在胰蛋白酶的作用下，由于成纖維細胞先脫壁，而上皮細胞要消化相當長
細胞純化酶消化法的方法介紹
酶消化法是比較常用的純化方法，不僅對貼壁細胞可行，能利用上皮細胞和成纖維細胞對胰蛋白酶的耐受性不同，使兩者分開，達到純化的目的，對貼壁細胞與半貼壁及粘附細胞間的分離純化也是十分有效的。
細胞組織消化常用的幾種酶的選擇
直接從生物體獲取的組織，一般需要將其消化成單個細胞才能進行體外培養。這種直接從離體組織獲得的細胞，更接近于生物體內的生活狀態，且生物性狀尚未發生很大改變，因此在藥物篩選、細胞移植、類器官培養、腫瘤研究等眾多領域備受歡迎。但組織消化過程中常遇到多種問題，例如消化不完全、細胞死亡率高等。如何克服這些問題
膠原酶解離組織
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 切碎的組織放于含有膠原酶的完全培養基中孵育，組織分解后，通過離心去除膠原酶，高濃度接種、培養。 實驗材料 膠原酶 DBSS
膠原酶解離組織
實驗方法原理切碎的組織放于含有膠原酶的完全培養基中孵育，組織分解后，通過離心去除膠原酶，高濃度接種、培養。實驗材料膠原酶DBSS儀器、耗材培養基移液器皮氏平皿培養瓶離心管手術刀離心機實驗步驟1. 將組織移人新鮮、無菌的 DBSS 中，淸洗。2. 轉入另一培養皿（9 cm 皮氏平皿，非組織培養級別），
蛋白復合體直接酶消化法
Direct Enzymatic Digestion of Protein ComplexesSherry Niessen, Ian McLeod and John R. Yates IIIDepartment of Cell Biology, The Scripps Research Instit
組織的分離實驗_EDTA－消化分離法
實驗方法原理EDTA是一種非酶性消化物，常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。關于EDTA的作用機制一般認為是：一些組織，尤其是上皮組織，在生存中需要Ca2+和Mg2+才能維持組織的完整性。EDTA能從這些組織生存環境中吸收這些離子，形成螯合物，能促進細胞相互分離。EDTA 作
酶消化法的實驗前準備相關介紹
1、預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。準備離心管、吸管，紫外線30min消毒超凈工作臺。 2、用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。 3、正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染。 4、點燃酒精燈，
消化酶的作用
消化酶就是輔助腸，胃等器官消化```所有的消化器官就組成了消化道，食物在消化道中，所以消化酶只有分泌到消化道中才起作用，消化道和其他不一樣，如果消化酶分泌到了其他器官，他們會承受不住消化酶的酸性，就會損害。消化酶只有分泌到消化道中才起作用 ，同時，只有消化道腺體才分泌消化酶。
膠原酶解離組織實驗
實驗方法原理 切碎的組織放于含有膠原酶的完全培養基中孵育，組織分解后，通過離心去除膠原酶，高濃度接種、培養。實驗材料 膠原酶DBSS儀器、耗材 培養基移液器皮氏平皿培養瓶離心管手術刀離心機實驗步驟 1. 將組織移人新鮮、無菌的 DBSS 中，淸洗2. 轉入另一培養皿（9 cm 皮氏平皿，非組織培養級
濕法消化法的分類
濕法破壞根據所用氧化劑不同分為如下幾類：硫酸-硝酸法將粉碎好的樣品放入250~500 mL凱氏瓶中（樣品量可稱10~20 g），加入濃硝酸20 mL，小心混勻后，先用小火使樣品溶化，再加濃硫酸10 mL，漸漸加強火，保持微沸狀態并不斷滴加濃硝酸，至溶液透明不再轉黑為止。每當溶液變深時，立即添加硝酸，
濕法消化法的特點
濕法的特點是分解速度快，時間短，因加熱溫度低可減少金屬的揮發逸散損失。缺點是消化時易產生大量有害氣體，需在通風櫥中操作，另外消化初期會產生大量泡沫外溢，需隨時照看，因試劑用量較大，空白值偏高。
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以：（1）獲得神經膠質細胞；（2）用于神經膠質細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，并能分泌多種神
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以：（1）獲得神經膠質細胞；（2）用于神經膠質細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，并能分泌多種神