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  • 多肽物質分離與分析方法研究(二)

    1.2 親和層析(Affinity Chromatography,AC) AC是利用連接在固定相基質上的配基與可以和其特異性產生作用的配體之間的特異親合性而分離物質的層析方法。自1968年Cuatrecasas提出親和層析概念以來,在尋找特異親和作用物質上發現了許多組合,如抗原-抗體、酶-催化底物、凝集素-多糖、寡核苷酸與其互補鏈等等。對多肽類物質分離目前主要應用其單抗或生物模擬配基與其親和,這些配基有天然的,也有根據其結構人工合成的。Patel等[13]人利用一系列親合柱分離純化到了組織血漿纖維蛋白酶原激活劑蛋白多肽。 固定金屬親和層析(Immobilized Metal Affinity Chromatography,IMAC)是近年來發展起來的一種親和方法。其固定相基質上鰲合了一些金屬離子,如Cu2+、Ni2+、Fe3+等,此柱可通過配為鍵鰲合側鏈含有Lys、Met、Asp、Arg、Tyr、Glu和His的多肽......閱讀全文

    多肽物質分離與分析方法研究(二)

    1.2 親和層析(Affinity Chromatography,AC)  AC是利用連接在固定相基質上的配基與可以和其特異性產生作用的配體之間的特異親合性而分離物質的層析方法。自1968年Cuatrecasas提出親和層析概念以來,在尋找特異親和作用物質上發現了許多組合,如抗原-抗體、酶-催化底物

    多肽物質分離與分析方法研究(一)

    摘 要 綜述了近幾年來多肽類物質的提取分離與分析方法,主要包括高效液相色譜法、電泳、質譜及核磁共振等方法在肽類物質研究中的最新應用進展。    多肽類化合物廣泛存在于自然界中,其中對具有一定生物學活性的多肽的研究,一直是藥物開發的一個主要方向。生物體內已知的活性多肽主要是從內分泌腺組織器官、分泌細

    多肽物質分離與分析方法研究進展

      摘 要 綜述了近幾年來多肽類物質的提取分離與分析方法,主要包括高效液相色法、電泳、質譜及核磁共振等方法在肽類物質研究中的最新應用進展。  多肽類化合物廣泛存在于自然界中,其中對具有一定生物活性的多肽的研究,一直是藥物開發的一個主要方向。生物體內已知的活性多肽主要是從內分泌腺組織器官、分泌細胞和體

    解析多肽分離實驗

    CE 分離來自復合體混合物如蛋白酶解產物的特定多肽尤其有用。以下的方案闡述使用低壓樣品注射的 P/ACE 5000 CE 儀器(Beckman) 的用法。但其他儀器也可以依據制造商的操作指南進行同樣的分離。實驗材料多肽混合物試劑、試劑盒0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸鈉緩沖液(p

    解析多肽分離實驗

    實驗方法原理 實驗材料 多肽混合物試劑、試劑盒 0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.30 存儲于 4℃)0.1 mol/L 氫氧化鈉儀器、耗材 75 μm 內徑的融合硅毛細管柱 CE 儀器實驗步驟 1. 用以下溶液沖洗進行預處理毛細管:10 倍柱體積的 0.1 m

    解析多肽分離實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 多肽混合物

    關于環狀多肽的物質簡介

      是氨基酸通過肽鍵相連的化合物,蛋白質不完全水解的產物也是肽。肽按其組成的氨基酸數目為2個、3個和4個等不同而分別稱為二肽、三肽和四肽等,一般含10個以下氨基酸組成的稱寡肽(oligopeptide),由10個以上氨基酸組成的稱多肽(polypeptide),它們都簡稱為肽。肽鏈中的氨基酸已不是游

    蛋白質、多肽提取分離

    1 分離方法   采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質的性質決定。對蛋白質、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方

    蛋白質、多肽提取分離

    1 分離方法?  采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質的性質決定。對蛋白質、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方法也是蛋白、多肽類物

    物質分離的原則

    1、引入的試劑一般只跟雜質反應。2、后續的試劑應除去過量的前加的試劑。3、不能引進新物質。4、雜質與試劑反應生成的物質易與被提純物質分離。5、過程簡單,現象明顯,純度要高。6、盡可能將雜質轉化為所需物質。7、除去多種雜質時要考慮加入試劑的合理順序。8、如遇到極易溶于水的氣體時,要防止倒吸現象的發生。

    關于多肽類物質的保存方式介紹

      多肽類保健食品只需置于陰涼干燥處即可。  對于多肽試劑和多肽類藥物則需要保存在干燥器中。在將它們暴露于空氣之前, 冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少,當無法冷凍干燥時,最好的方法是以小的工作樣量存放。對于含Cys, Met或者TrP的多肽試劑,脫氧緩沖劑對其溶解必不可少,因為這種多肽試

    多肽的分離制備,-如何上量?如何增大分離度

    反相HPLC應當是很好的分離小肽方法,用CH3CN或CH3OH:H2O(95:5)做流動相,看保留如何,若無保留,建議改用其他色譜方法進行分離。關于多肽的分離,首先要知道它的分子量大小,然后選擇不同類型的填料,如孔徑的大小。我們先在分析柱(4.6MM內徑)上做一下實驗,找到最大的分離度,這一過程的難

    物質分離提純的原則

    物質分離提純的原則在進行物質的分離提純時,選擇試劑和實驗措施應遵循以下四個原則:1、不增(不能引入新雜質)。2、不減(不減少被提純試劑)。3、易分離。4、易復原。

    電泳可以分離哪些物質

    在外加直流電源的作用下,膠體微粒在分散介質里向陰極或陽極作定向移動,這種現象叫做電泳。利用電泳現象使物質分離,這種技術也叫做電泳。膠體有電泳現象,證明膠體的微粒帶有電荷。各種膠體微粒的本質不同,它們吸附的離子不同,所以帶有不同的電荷。利用電泳可以確定膠體微粒的電性質,向陽極移動的膠粒帶負電荷,向陰極

    蛋白質與多肽提取分離方法1

    1 分離方法采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質的性質決定。對蛋白質、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方法也是蛋白、多肽類物質分析

    蛋白質與多肽提取分離方法2

    ?1.1.7 灌注層析(Perfusion Chromatography,PC)PC是一種基于分子篩原理與高速流動的流動相的層析分離方法,固定相孔徑大小及流動相速度直接影響分離效果。試驗證明其在生產、制備過程中具有低投入、高產出的特性。目前市場上可供應的PC固定相種類較多,適合于不同分子量的多肽分離

    蛋白質與多肽提取分離方法3

    1.3.4膠束電動毛細管層析(Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC)MECC的原理是在電泳液中加入表面活性劑,如SDS,使一些中性分子帶相同電荷分子得以分離。特別對一些小分子肽,陰離子、陽離子表面活性劑的應用都可使之

    常見物質分離提純的方法

    1、固—固混合分離型:灼燒、熱分解、升華、結晶(或重結晶)。2、固—液混合分離型:過濾、鹽析、蒸發。3、液—液混合分離型:萃取、分液、蒸餾、滲析。4、氣—氣混合分離型:洗氣。

    生化物質的制備與分離

    生化物質通常是指動物、植物和微生物進行新陳代謝時產生的蛋白質(包括酶)和核酸等有機化合物。這些大分子物質在生物體內具有各種生理活性,其活性的產生與結構有著密切關系,因此,分離生化物質不能用一般的化學分離方法,而是采用比較特殊的方法,常與離心機分離技術結合使用,有以下幾個特點:1、生物材料組成非常復雜

    常用的物質分離方法介紹

    1、分液:分離兩種不互溶的液體,如分離油和水。2、萃取:加入適當溶劑把混合物中某成分溶解及分離,如庚烷、取水溶液中的碘。3、蒸餾:溶液中分離溶劑和非揮發性溶質,如海水中取得純水。4、分餾:離兩種互溶而沸點差別較大的液體,如液態空氣中分離氧和氮、石油的精煉。5、升華:離兩種固體,其中只有一種可以升華,

    生化物質的制備與分離

    ? ?生化物質通常是指動物、植物和微生物進行新陳代謝時產生的蛋白質(包括酶)和核酸等有機化合物。這些大分子物質在生物體內具有各種生理活性,其活性的產生與結構有著密切關系,因此,分離生化物質不能用一般的化學分離方法,而是采用比較特殊的方法,常與離心機分離技術結合使用,有以下幾個特點:? 1、生物材料組

    手性物質的分離分析方法

    ? ? ??手性物質的分離分析方法有手性源合成法、結晶拆分法、化學拆分法、酶拆分法、膜拆分法、萃取拆分法和色譜拆分法等,常與離心機分離技術結合使用。1、手性源合成法:??????? 手性源合成法是以單一對映體的手性化合物為原料合成另外的手性化合物的單一對映體,這是化學家常用的方法。??????? 由

    現代生物分離技術在多肽蛋白質分離純化中的應用

    摘要:蛋白質是生物體的重要組成部分,在現代生物制藥領域有著重要的作用,本文介紹了現代生物分離技術反膠束萃取、雙水相萃取和電泳在多肽蛋白質分離中的應用和現狀。關鍵詞:蛋白質??反膠束萃取??雙水相萃取??電泳一、前言隨著基因工程和細胞工程的發展,盡管傳統的分離方法(如溶劑萃取技術)已在抗生素等物質的生

    毛細管電泳分離蛋白質多肽類物質一般用什么緩沖溶液

    常用于毛細管電泳的緩沖溶液有:硼砂、磷酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽和醋酸緩沖體系的pH值要求與樣品的性質有關通常酸性組分的分離選擇在堿性條件下進行,堿性組分則選擇酸性介質分離蛋白質、多肽、氨基酸等兩性物質,可選酸性(pH2)也可選堿性(H>9)分離介質。在毛細管電泳分離中緩沖液是背景電解質分離是基于樣品

    專家共議駝血多肽分離制備關鍵技術

      近日,由中科院蘭州化物所和內蒙古東匯生物科技有限公司聯合召開的“駝血資源高值化利用研討會”在化物所召開。中科院蘭州分院、蘭州大學、甘肅省科學院自然能源研究所、內蒙古阿拉善盟科技局的相關領導和專家參加會議。   會議中,與會專家就“駝血多肽分離制備關鍵技術及產業化”系列問題進行了討論。專家認為

    胰蛋白酶切磷酸化多肽作圖_雙向薄層電泳/層析分離多肽

    實驗材料多肽樣品試劑、試劑盒電泳緩沖液儀器、耗材平板電泳儀實驗步驟1. 將平板電泳儀(型號 FBE-3000, Phannacia) 放在通過循環儀連接到恒溫水浴的冷卻板上進行電泳。電泳前 30 分鐘將水浴溫度調至 10℃ 到 15℃ 之間。每個電極槽加 400 ml 緩沖液。切兩張 Whatman

    熒光標記肽技術常用的多肽修飾熒光物質

    熒光標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物,受到紫外光或藍紫光照射時,可激發成為激發態,當從激發態恢復基態時,發出熒光。熒光標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上,利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒光標記的無放射物污染,操作簡

    電泳法可分離哪些物質

    可以帶上電荷的大基團物質,最主要用來分離蛋白質

    物質分離提純的常見方法

    1.結晶和重結晶:利用物質在溶液中溶解度隨溫度變化較大,如NaCl,KNO3。2.蒸餾冷卻法:在沸點上差值大。乙醇中(水):加入新制的CaO吸收大部分水再蒸餾。3.過濾法:溶與不溶。4.升華法:SiO2(I2)。5.萃取法:如用CCl4來萃取I2水中的I2。6.溶解法:Fe粉(Al粉):溶解在過量的

    電泳法可分離哪些物質

    可以帶上電荷的大基團物質,最主要用來分離蛋白質.

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