實驗方法原理 利用各種載脂蛋白在一定pH下所帶電荷數量及顆粒大小不同的差異,從而在電場中獲得不同的遷移庇,達到分離測定的目的,試劑、試劑盒 考馬斯藍溴酚藍水溶液冰醋酸實驗步驟 一、實驗試劑:1. 凝膠儲備液制備及工作混合液比例表2. 脫色劑:乙醇1000ml,冰醋酸320ml加水至4000ml.3. 染色劑:考馬斯藍0.46g,溶于400ml脫色劑中。4. 溴酚藍水溶液:溴酚藍0.05g,水溶至100ml。二、實驗操作1. 按上表所給的比例配制分離膠,3號試劑要最后加,之后快速混勻.立刻往已封底中的玻璃管中加入上述分離膠約至管長的2/3處,然后沿管壁輕輕加入一薄層水封閉空氣.一般在20℃室溫中約40分鐘左右便形成凝膠.傾去水層,倒立在濾紙上將管內水分瀝干,接著按上表已制濃縮膠,6號試劑最后加入,快速混勻,立刻加在分離膠之上距管口上緣8mm處,其上再輕輕加一薄層水,令其在日光燈照射下聚合,約20分鐘左右即可聚合完畢,傾去水......閱讀全文
【概述】帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。 1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)最早發現。
聚丙烯酰胺凝膠電泳儀(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術,于1959年建立,1964年進一步從理論和實驗技術上得到改進并推廣應用。由于分辨率高,目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理:
實驗方法原理 利用蛋白質分子或其他兩性分子的等電點的不同,在一個穩定的、連續的、線性 pH 梯度中進行蛋白質的分離和分析。所以利用等電聚焦技術分析的對象只限于蛋白質和兩性分子。分析的條件是凝膠中有穩定的、連續的和線性的 pH 梯度。試劑、試劑盒 丙烯酰胺單體貯液過硫酸銨貯液儀器、
實驗方法原理利用蛋白質分子或其他兩性分子的等電點的不同,在一個穩定的、連續的、線性 pH 梯度中進行蛋白質的分離和分析。所以利用等電聚焦技術分析的對象只限于蛋白質和兩性分子。分析的條件是凝膠中有穩定的、連續的和線性的 pH 梯度。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液過硫酸銨貯液儀器、耗材注射器水浴實驗步驟一
實驗原理SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳技術首先在1967年由Shapir0建立,其原理:聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(簡稱Acr)和交聯劑N,N’一亞甲基雙丙烯酰胺(簡稱Bis)在催化劑過硫酸銨(APS),N,N,N’,N’四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交聯形成的具有網狀立體結構的凝膠,并以此為支持
血清蛋白質聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗 實驗方法原理 血清蛋白質聚丙烯酰胺凝膠具有機械強度好、
適用的凝膠總濃度:2%~5%(2)核酸相對分子量與凝膠總濃度的關系:1)核酸相對分子量范圍:<1×104適用的凝膠總濃度:15%~20%2)核酸相對分子量范圍:1×104~1×105適用的凝膠總濃度:5%~10%3)核酸相對分子量范圍:1×105~2×106適用的凝膠總濃度:2%~2.6%用于大分子
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點 實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于
等電聚焦(Isoelectric focusing,簡稱 IEF)是六十年代中期出現的新技術。近年來等電聚焦技術有了新的進展,已迅速發展成為一門成熟的近代生化實驗技術。目前等電聚焦技術已可以分辨等電點(pI)只差 0.001pH 單位的生物分子。由于其分辨力高,重復性好,樣品容量大,操作簡便迅速,在
實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小于其等電點的 pH 環境中解離成帶正由荷的陽離子,向電場的負極泳動。這種泳動只有在等于其等電點的 pH 環境中,即蛋白質所帶的凈電荷為零時才能停止。如果在一個
血清蛋白質聚丙烯酰胺凝膠具有機械強度好、彈性大、透明、化學穩定性高、無電滲作用、設備簡單、用樣量少和分辨率高等優點,并可通過控制單體濃度或單體與交聯劑的比例聚合成孔徑大小不同的凝膠,用于蛋白質、核酸等物質的分離、定性和定量分析。實驗方法原理血清蛋白質聚丙烯酰胺凝膠具有機械強度好、彈性大、透明、化學穩
掌握一種聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質的方法,并用此法進一步分析血清蛋白的組成。1、聚丙烯酰胺凝膠聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺(Acr)、NN′-甲叉雙丙烯酰胺(Bis),在催化劑過硫酸銨[ammonium persulfate (NH4)2S2O8 簡稱AP)或核黃素(ribofavin 即vit
實驗方法原理 血清蛋白質聚丙烯酰胺凝膠具有機械強度好、彈性大、透明、化學穩定性高、無電滲作用、設備簡單、用樣量少和分辨率高等優點,并可通過控制單體濃度或單體與交聯劑的比例聚合成孔徑大小不同的凝膠,用于蛋白質、核酸等物質的分離、定性和定量分析。根據凝膠形狀不同分為盤狀電泳和板狀電泳。盤狀電泳
實驗概要本文介紹了植物過氧化物酶同工酶測定的基本原理及操作步驟等。實驗原理聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成,具有三維網狀結構,其網孔大小可由凝膠濃度和交聯度加以調節。凝膠電泳兼有電荷效應和分子篩效應。被分離物質由于所載電荷數量、分子大小和形狀的差異,因此在電泳時產