實驗材料 pMQ402試劑、試劑盒 阿拉伯糖苯甲基磺酰氟Ni-NTA 瓊脂糖結合緩沖液清洗緩沖液洗脫緩沖液透析緩沖液儀器、耗材 超聲破碎器冷凍離心機實驗步驟 3. 方法此處列出的方法概括了為定點突變而做的氨基酸位點選擇(見 3.1)、為在細菌細胞中表達而做的 MutH 蛋白突變 ( 見 3.2 ) 和 MutH 變體的鑒定(見 3.3 )。3.1 為定點突變對氨基酸的選擇從生物技術信息國家中心基因組基本局部比對搜索工具(basic local alignment search tool,BLAST) 頁面( http : //www. ncbi. nlriLnih. gov /BLAST/) [ 24 ] 得到 MutH 蛋白和相關限制性內切核酸酶的序列。更多的序列從 PSI BLAST 服務器 [ 25 ] 得到。使用 PAM250 矩......閱讀全文
Raf 蛋白 Ras 結合結構域的簡并進化庫合成以及利用片段互補法快速篩選二氫葉酸還原酶的快速折疊且穩定的克隆
實驗材料寡核苷酸引物Tag 聚合酶BL21 電轉感受態細胞試劑、試劑盒氨芐青霉素卡那霉素儀器、耗材瓊脂糖凝膠實驗步驟3.1 概論3.1.1 PCA 對空間排列的要求PCA 片段的三維朝向對于 PCA 報告蛋白是否能正確折疊至關重要,它取決于形成復合體的目的蛋白 N 端或 C 端的朝向(圖 15.1
位點特異性核酸內切酶的蛋白質工程 實驗材料 pMQ402
Raf 蛋白 Ras 結合結構域的簡并進化庫合成以及利用片段互補法快速篩選二氫葉酸還原酶的快速折疊且穩定的克隆實驗實驗材料 寡核苷酸引物Tag 聚合酶BL21 電轉感受態細胞試劑、試劑盒 氨芐青霉素卡那霉素儀器、耗材 瓊脂糖凝膠實驗步驟 3.1 概論3.1.1 PCA 對空間排列的要求PCA 片
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
【導語】在2011年10-11月期間,在一級科學刊物Nature和Nature Methods上有14篇科研論文使用賽默飛世爾LTQ-Orbitrap或TSQ質譜儀產生數據,聚焦的主題包括:目標物發現與定量研究,Top-down蛋白質組研究繪制蛋白質異構體,同位素標簽方法的精度,提高糖蛋白質組
生物學家們總是沉迷于對基因組修修補補,而其中一種近期紅得發紫的技術就是 CRISPR。自2012年CRISPR/Cas 首次作為一種基因組編輯工具登臺以來,關于這種技術的論文數量就大幅增加,最好的證明之一就是2015年兩位科學家由于在CRISPR基因組編輯技術方面的重要貢獻而獲得“科學突破獎”,
中科院大連化學物理研究所 張玉奎院士 來自中科院大連化學物理研究所的張玉奎院士與大家分享的報告題為《色譜進展—機遇和挑戰》。 從1990年至2010年,中國色譜論文的總量達28324篇,占全球總數的22%;GC、HPLC、CE研究呈明顯增長。近20年來,中國的色譜研究在全球
來自國家自然科學基金委員會的消息,國家自然科學基金委員會公布了2012年度面上項目、重點項目、重大國際(地區)合作研究項目、青年科學基金項目、地區科學基金項目、海外及港澳學者合作研究基金項目、科學儀器基礎研究專款項目等方面的評審結果。有關評審結果將通知相關依托單位,其科研管理人員可登錄
基于原核 CRISPR-Cas 免疫系統的基因組編輯技術是近幾十年來最強大的生物學技術突破之一,這種工具能對許多種類的生物進行精確的遺傳改變,為基礎研究,生物技術和臨床醫學帶來了巨大的希望。 最新一期(6月2日)Cell雜志介紹了這種技術工具的最新升級改造,指出通過改進Cas9酶和重編程新酶,