丹磺酰化法分析蛋白質N末端氨基酸實驗
實驗方法原理 蛋白質的α-氨基與丹磺酰氯(DNS-Cl 是一種熒光物質) 反應, 生成DNS-蛋白質, 經水解可生成DNS-氨基酸。通過聚酰胺薄膜層析分析DNS-氨基酸, 可確定蛋白質的N-末端氨基酸。此法靈敏度高, 也可用于蛋白質的氨基酸組成的測定。聚酰胺對極性物質的吸附作用是: 它能和被吸附物質間形成氫鍵, 這種氫鍵的強弱決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時展層劑與被分離物在聚酰胺膜表面競爭形成氫鍵。因此選擇適當的展層劑使分離物在聚酰胺表面發生吸附、解吸附、再吸附和再解吸附的連續過程, 就能導致分離物達到分離的目的。實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 氨基酸丙酮丹磺酰氯鹽酸碳酸氫鈉甲酸水苯冰醋酸乙酸乙酯甲醇冰乙酸磷酸三鈉乙醇三乙胺儀器、耗材 真空干燥器水解管烘箱紫外分析燈玻璃試管聚酰胺薄膜實驗步驟 1. 標準氨基酸的丹磺酰化 分別稱取2 . 3μmol 層析純的氨基酸, 溶......閱讀全文
磷酸氨基酸分析實驗
鑒定蛋白質中磷酸化的氨基酸殘基是很有意義的。磷酸化作用發生在蛋白質的絲氨酸、蘇氨酸和酩氨酸時，通過部分的HCl水解及接著進行雙向薄層電泳，可以便利地鑒定 標記的磷酸氨基酸。實驗材料磷酸化蛋白質試劑、試劑盒印度墨汁HCl磷酸氨基酸混合物電泳緩沖液茚三酮儀器、耗材PVDF膜烘箱離心機離心管纖維素薄層色譜
磷酸氨基酸分析實驗
酸水解法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 磷酸化蛋白質 試劑、試劑盒
蛋白質N端測序服務Edman法
服務簡介幾乎所有的蛋白質合成都起始于N-端，蛋白質N-端的序列組成對于蛋白質整體的生物學功能有著巨大的影響力。例如N-端序列影響蛋白質的半衰期，同時關聯著蛋白亞細胞器定位等，這些與蛋白的功能和穩定性息息相關，對蛋白進行N-端測序分析，有利于幫助分析蛋白質的高級結構，揭示蛋白質的生物學功能。對蛋白N端
磺基水楊酸法檢測尿蛋白實驗
實驗方法原理磺基水楊酸為生物堿試劑，在酸性磺酸根離子上蛋白質氨基的陽離于結合成不溶性蛋白鹽沉淀試劑、試劑盒磺基水楊酸水溶液實驗步驟實驗試劑：1、磺基水楊酸水溶液，磺基本楊酸20g，加水補至100ml實驗方法：取試管1只加入澄清尿液2－3ml滴加磺基水楊酸試劑0.1ml立即輕輕搖勻1分鐘內觀察結果．實
磺基水楊酸法檢測尿蛋白實驗
實驗方法原理 磺基水楊酸為生物堿試劑，在酸性磺酸根離子上蛋白質氨基的陽離于結合成不溶性蛋白鹽沉淀試劑、試劑盒 磺基水楊酸水溶液實驗步驟 實驗試劑：1、磺基水楊酸水溶液，磺基本楊酸20g，加水補至100ml實驗方法：取試管1只加入澄清尿液2－3ml滴加磺基水楊酸試劑0.1ml立即輕輕搖勻1分鐘內觀察結
蛋白鑒定方法之微量測序
蛋白質的微量測序已成為蛋白質分析和鑒定的基石，可以提供足夠的信息。 盡管氨基酸組分分析和肽質指紋譜（PMF）可鑒定由2-DE分離的蛋白，但最普通的N-末端Edman降解仍然是進行鑒定的主要技術。 目前已實現蛋白質微量測序的自動化。 首先使經凝膠分離的蛋白質直接印跡在PVDF膜或玻璃纖維膜上，染色
生物素酰化探針的檢測實驗——化學發光法
實驗材料DNA試劑、試劑盒生物素磷酸酶儀器、耗材紫外燈離心機實驗步驟1. ?用夾子固定已轉印的尼龍膜的邊角于一小片干的吸水紙上，樣品面朝上，放進溫箱內12~80℃放15~30 min 或溫室晾干過夜。?2. ?將帶核酸的面朝上暴露于紫外燈下，用最適的時間交聯。3. ?用生物素探針與膜雜交，用適當強度
蛋白質定量實驗_堿性銅還原分析法
試劑、試劑盒Folin-Ciocalteu 試劑硫酸銅試劑堿性銅試劑實驗步驟堿性銅還原分析法 (Lowry 法）（Lowryetal.，1951) 和其他能夠增強檢測性能的方法都是基于一個包括兩個步驟的過程。首先，雙縮脲反應涉及蛋白質在堿性溶液環境中將銅還原（由Cu2+到?Cu+); 隨后是反應增強
蛋白的常用蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。 “滿天星”式的2
透析法除N－十二烷基肌氨酸鈉實驗
試劑、試劑盒冰醋酸三氟乙酸（TFA)乙腈溶劑 A(0.1%TFA)溶劑 B(80% 乙腈+0.086%TFA)儀器、耗材反相高效液相色譜（HPLC) 儀C18 反相 HPLC 柱實驗步驟材料與設備反相高效液相色譜（HPLC) 儀C18 反相 HPLC 柱（VYDAC?,4.6x250 mm)冰醋酸三
透析法除N－十二烷基肌氨酸鈉實驗
試劑、試劑盒 冰醋酸三氟乙酸（TFA)乙腈溶劑 A(0.1%TFA)溶劑 B(80% 乙腈+0.086%TFA)儀器、耗材 反相高效液相色譜（HPLC) 儀C18 反相 HPLC 柱實驗步驟 材料與設備反相高效液相色譜（HPLC) 儀C18 反相 HPLC 柱（VYDAC?,4.6x250 mm)冰
透析法除N－十二烷基肌氨酸鈉實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 冰醋酸 三氟乙酸（TFA) 乙腈 溶劑 A(0.1%TFA) 溶劑 B(80% 乙腈+0.086%TFA)
蛋白質組鑒定技術
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗
蛋白質組鑒定技術
?如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗力，不
蛋白質組鑒定技術簡述
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定。在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達。并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗力，不
蛋白質組鑒定技術
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時
幾種常用的蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。1 ?圖象
幾種常用的蛋白鑒定方法
幾種常用的蛋白鑒定方法 傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的 comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基
幾種常用的蛋白鑒定方法
?傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。?1 ?
四種蛋白鑒定分析方法
傳統的蛋白鑒定方法，色譜柱如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。1? 圖
四種蛋白鑒定分析方法
傳統的蛋白鑒定方法，色譜柱如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達 通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 ? 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技
聚乙二醇修飾反應類型
在20種構成蛋白質的常見氨基酸中，只有具有極性的氨基酸殘基的側鏈基團才能夠進行化學修飾。常用的反應氨基酸包括賴氨酸、半胱氨酸、組氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸，N-端氨基和C-端羧基。這些氨基酸殘基上的反應性基團多呈親核性，其親核活性通常按下列順序依次遞減：巰基>alpha氨
生物物理所揭示N端乙酰化修飾促進Sir3的轉錄沉默功能
8月11日，Nature structural & Molecular Biology 在線發表了中科院生物物理研究所生物大分子國家重點實驗室許瑞明課題組的最新研究成果。該文章題為Nα-acetylated Sir3 stabilizes the conformation of a nu
酰化試劑（Bolton和Hunter試劑）法
1．原理 用酰化劑3--（4-羥苯基）丙酸—N琥珀酰胺酯（Bolton—Hunter試劑）做連接試劑，將125I標記在羥苯基的2，5位置上，再將琥珀酰胺酯水解，通過一個酰氨鍵將3--（4—羥基—5—125I—苯基）接在蛋白或多肽的末端氨基上。 2．方法?125I—Bolton—Hunter試劑可用
金屬羧肽酶的功能特點
金屬羧肽酶是一類存在于細胞外，幫助蛋白質消化,在中性或弱堿性條件下具有機大活性的羧肽酶，包括羧肽酶A、B、賴氨酸羧肽酶(EC3.4.17.3).甘氨酸羧肽酶(EC3.4.17.4)和谷氨酸羧肽酶(EC3.4.17.11)等。其中，羧肽酶A能釋放C末端氨基酸(除脯氨酸、羥脯氨酸、精氨酸和賴氨酸)，對具
關于金屬羧肽酶的基本介紹
金屬羧肽酶是一類存在于細胞外，幫助蛋白質消化,在中性或弱堿性條件下具有機大活性的羧肽酶，包括羧肽酶A、B、賴氨酸羧肽酶(EC3.4.17.3).甘氨酸羧肽酶(EC3.4.17.4)和谷氨酸羧肽酶(EC3.4.17.11)等。其中，羧肽酶A能釋放C末端氨基酸(除脯氨酸、羥脯氨酸、精氨酸和賴氨酸)，
幾種常用的蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。
幾種常用的蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。
科學依據/蛋白質測序儀
自著名的?Edman?降解技術成功從?N?末端開始測定蛋白質序列以來，蛋白質的結構分析有了重大進展。島津?PPSQ?-21A?蛋白測序儀（Protein?sequencer）能夠適于多種方法制備的樣品。可進行?Pmol?水平的氨基酸序列分析。?LC?分析采用恒溶劑成分洗脫方式，氨基酸的鑒定、裝置維護
蛋白質定量實驗_考馬斯亮藍蛋白質濃度分析法
實驗方法原理蛋白質分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基，其化學結構中的共軛雙鍵，具有吸收紫外光的特性，吸收高峰在280 nm處，蛋白質溶液的吸光度(A280)與蛋白質含量成正比關系，可作為樣品中蛋白質定量測定。該方法簡便、靈敏、快速，且樣品用量少且可回收，低濃度的鹽類也不干擾測定，但測定