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一、材料和試劑1、0.01M PBS(pH7.4)： NaCl 8.0g； KCl 0.2g； Na2HPO4 1.44g； KH2PO4 0.24g； ddH2O至1000ml ； 高壓滅菌,分裝。2、0.25%胰酶：稱取EDTA 0.02g NaCl 0.8g KCl 0.04g 加三蒸水100ml溶解后加0.25g 胰酶,輕輕攪動,使胰酶溶解,不要產生泡沫,加酚紅少許,調PH值到8.2-8.6,過濾除菌,分裝10ml/管,-20℃保存,臨用前預溫到37℃。3、誘導液(TPA)：12-鄰-十四酰-佛波醇-13-乙酸酯(12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate,TPA)溶于丙酮，配成20mg/ml。 ......閱讀全文
一、對照實驗 1．吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時，需用相應的抗原吸收抗血清后，再孵育標本，判斷結果的可信性（結果應為陰性）。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種（見本書第一章 ），對于不能形成沉淀，難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原，以固相吸收為佳
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學（Immunocytochemistry,ICC）中最常用的方法之一，它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下，借助于酶細胞化學的手段，檢測某種物質（抗原/抗體）在組織細胞內存在部位的一門新技術：即預先將抗體與酶連結，再使其與組織內特異抗原反應，經細胞化學染色
三、ICC在細胞功能研究中的應用 形態學研究目的之一是揭示組織細胞結構特征及其功能意義。利用ICC顯示給與細胞增殖標記物，是組織細胞學研究中形態和功能相結合的重要手段之一。目前常用的細胞增殖標記物有4種，Brdu (5—bromo—2--deoxyuridine), DNA polymerase
免疫組織化學的概念： 免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學。 免疫組化實驗所用的抗體有哪些？ 免疫組化實驗中
多克隆抗體（polyclonal antibody, pAb）：用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物，可刺激機體多個B細胞克隆，產生針對多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物，即多克隆抗體。單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗
一、免疫組化（Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC）原理免疫組化是應用免疫學基本原理--抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑 （熒光素、酶、金屬離子、同位素） 顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它們都是用于定位檢測抗原表達的免疫檢測技術，由于技術相對簡單且直觀，在科研和臨床上都得到了大量使用。但是影響最終檢測效果的變量非常多；每一個具體的檢測都會遇到多個需要調整的變量。具體到選擇何種方法來保存組織樣本；固定標本該用醇還是醛；如何選擇最合適的一抗；抗原修
（四）染色原理及步驟 1．基本原理 酶標抗體與熒光色素標記抗體的染色相同，亦分直接法和間接法。直接法是將酶直接標記在每一抗體上，間接法是將酶標記在第二抗體上，檢測組織細胞內的特定抗原物質。間接法所用的第一抗體是對組織細胞內某種抗原的特異性抗體（80%～90%的抗血清系由家兔制得，而絕大數單克隆
對于每一項IHC/ICC研究，組織和細胞樣本的制備都不可掉以輕心。為了方便孵育，整個組織必須被切成超薄(5-10 μm)的切片，或切成小塊用于整體免疫組化(whole mount IHC)。對于ICC實驗，在開始染色步驟之前，細胞必須附著在顯微鏡載玻片或蓋玻片上。樣本制備也與固定方法密切
小編今天給大家分享一些抗體選擇的經驗~檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體，需要考慮如下幾種因素：分析或應用的類型一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型，如：可以應用于 WB IHC ICC ELASA 分析等，如果抗體說明書沒有提及的
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體，需要考慮如下幾種因素： （1） 分析或應用的類型 （2）樣本蛋白的結構性質 （3）樣本的種屬 （4）抗體宿主的種類 （5）抗體的標記和檢測 1&nbs
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，在同一個抗體公司，可能會有好幾種，甚至好幾十種；在不同的抗體公司，那就更多了。那怎樣在琳瑯滿目的抗體中，選擇自己實驗需要的抗體呢？主要考慮如下幾種因素：分析自己實驗應用的實驗方法是哪種？分析自己實驗中標本的種屬是哪種動物或人的？分析樣本中的蛋白質的結構性質
摘要：本文主要是針對Western bloting的原理及操作進行了簡單的闡述，Western印跡法是利用抗原抗體的免疫反應，先將蛋白通過SDS-PAGE電泳分離開來，然后再利用電場力的作用將膠上的蛋白轉移到固相載體（NC膜）上，然后再加抗體形成抗原抗體復合物，利用發光或顯色原理將結果顯示到膜或底片
說到免疫印跡最重要的就是抗體的選擇了。在免疫印跡中我們會用到一抗和二抗等抗體，本文著重給大家介紹一下一抗的選擇。一抗就是能和特異性抗原特異性結合的蛋白。種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。抗體因其種屬來源不同可以分為多種類型，如鼠抗，兔抗，羊抗等等，那么在使用時我們應該怎么選擇呢？檢測任何一種目的蛋白都
（8）熒光顯示： ①生物素標記DNA探針的熒光顯示。 1）應用PBS含5%無脂干奶（5μl每張蓋片），也可用1%牛血清白蛋白（BSA）-PBS覆蓋孵育5min室溫，以封閉非特異性結合部位。 2）移除多余液體，加抗生素-FITC（5μg/ml在PBS含5%奶粉或1%BSA，5μl/cm2）。在濕
抗體制備制備出效價高，特異性強，穩定性好的抗體是免疫學實驗取得成功的基礎，抗體質量的好壞直接影響著研究者研究的成敗，不同的免疫學實驗方法（如ELISA，IHC，IP，ICC,SDS-PAGE, WB等）對抗體的效價，濃度和純度有不同的要求。我們知道，一般免疫血清中含有特異性抗體和非特異性抗體