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    DNA測序基本原理及流程

    基本原理: 1.雙脫氧鏈末端終止法 雙脫氧鏈末端終止法通過使用鏈終止劑—類似于正常dNTP的2’,3’-雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP),將延伸的DNA鏈特異性地終止。其反應體系也包括單鏈模板、引物、4種dNTP和DNA聚合酶。共分四組,每組按一定比例加入一種 (ddNTP),它能隨機滲入合成的DNA鏈,一旦滲入合成即終止,于是各種不同大小片段的末端核苷酸必定為該種核苷酸,可以從放射自顯影帶上直接閱讀DNA的核苷酸序列。 雙脫氧鏈末端終止法測序基本原理示意 雙脫氧鏈末端終止法特點 雙脫氧鏈末端終止法不僅具有化學測序法的優點,而且更適用于大規模的測序。但它要求有一個純凈的單鏈DNA模板和一個合成反應所需的特異性的引物。因此,早期的工作僅局限于單鏈噬菌體為模板,若干個不同的特定限制性內切酶酶解片段為引物,在模板鏈的不同部位引導合成,從而確定出噬菌體DNA的核酸序列。然而,對于大量存在著的天然雙鏈D......閱讀全文

    【回顧】一代、二代、三代測序技術

      第一代測序技術-Sanger鏈終止法  一代測序技術是20世紀70年代中期由Fred Sanger及其同事首先發明。其基本原理是,聚丙烯酰胺凝膠電泳能夠把長度只差一個核苷酸的單鏈DNA分子區分開來。一代測序實驗的起始材料是均一的單鏈DNA分子。第一步是短寡聚核苷酸在每個分子的相同位置上退火,然后

    DNA三代測序技術原理、平臺、特點介紹

    人類基因組計劃、基因芯片、個性化分子診斷、生物云計算……這些在21世紀第一個十年里吸引無數眼球的熱門詞匯,都和一個產業頗有淵源——DNA測序。生物技術和信息技術在這片創意新天地里水乳交融,如果用一句詩來形容坐擁兩大技術護航的DNA測序產業,那就是——天生麗質難自棄。隨著人類基因組計劃的完成,人類對自

    三代基因測序技術以及基因檢測技術的發展綜述

    基因是指攜帶有遺傳信息的DNA序列,是控制性狀的基本遺傳單位,一段具有功能性的DNA序列。基因通過指導蛋白質的合成來表達自己所攜帶的遺傳信息,從而控制生物個體的性狀表現。人類約有兩萬至兩萬五千個基因。廣義上的基因檢測指通過血液、組織或細胞分泌物,對染色體、DNA分子進行檢測的一系列技術。目前在醫療領

    法醫DNA檢測儀器及其發展動向分析

    摘    要:實踐證明,法醫DNA檢測技術和相關儀器在犯罪嫌疑人認定、親權鑒定和系列串并案偵破中發揮了顯著作用,是我國公安一線偵察破案和打擊犯罪的重要技術手段。以法醫DNA檢測技術為主線,對相關儀器的產生背景、發展歷程、工作原理、各類技術優劣,以及國內外研究現

    高通量測序技術SOLiD簡介

    目前市場上有四種高通量測序儀,分別是Solexa,454 (GS-FLX),SOLiD和Polonator。根據測序原理,它們可以被分為兩大類:使用合成法測序(Sequencing by Synthesis)的Solexa和454,及使用連接法測序(Sequencing by Ligat

    DNA測序基本原理及流程

    DNA測序基本原理及流程1977年,Sanger等人發展建立起來的一種DNA測序方法。基本原理:雙脫氧鏈末端終止法雙脫氧鏈末端終止法通過使用鏈終止劑—類似于正常dNTP的2’,3’-雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP),將延伸的DNA鏈特異性地終止。其反應體系也包括單鏈模板、引物、4種dNTP和DNA聚合

    一文看全!史上59家測序儀公司的“爭霸戰”

      要談測序,首先要向華人生物學家、DNA測序技術的奠基人吳瑞先生致敬。大家大多都聽過桑格,但很少有人知道吳瑞。其實吳瑞早在1968年就發表第一篇論文測定了DNA的堿基組成,1970年的新文章既測定DNA堿基組成又測定出順序,是真正的DNA測序第一人。而在吳瑞先生工作的啟發下,Sanger深入研究,

    融資頻頻 從華大智造大額融資解析國產測序市場

      短短一個月內,齊碳科技、華大智造、塞納生物先后宣布完成融資。國產基因測序儀再一次沖上了醫療健康領域的熱點話題。  多年來,測序儀行業一直處在少數幾家國外巨頭的壟斷之下。華大智造近兩年的頻繁動作雖然吹響了國產測序儀反攻的號角,但是從目前的市場占有率上看,想要最終實現進口替代,可能還需要些時間。  

    生物實驗室原理篇-pcr技術原理

      pcr(聚合酶鏈式反應)是1985年由英國PE-Cetus企業的生物學家Kary?Banks?Mullis創造發明的這種可在離體迅速測序特殊遺傳基因或DNA編碼序列的技術性。它的基本概念類似DNA的天然拷貝全過程,其非特異關鍵取決于和靶編碼序列兩邊相輔相成的寡核苷酸引物,它由轉性——復性——拓寬

    NGS檢測試劑生產應獲得《醫療器械生產許可證》

      為加強第二代測序技術檢測試劑的規范和指導,進一步保證和提高相關產品的質量,8月8日,中國食品藥品檢定研究院(中檢院)組織制定了《第二代測序技術檢測試劑質量評價通用技術指導原則》(下稱《指導原則》)。  該文件是中檢院發布的首個質量評價技術指導原則,旨在對產品設計、研發及驗證的各關鍵環節進行規范,

    中檢院發布二代測序試劑質量評價通用原則

      一.前言  本指導原則主要針對第二代測序(next generation sequencing,NGS)技術檢測試劑(以下簡稱“NGS檢測試劑”)產品質量提出指導性要求,涉及基本原則、主要原材料、檢測流程及性能評價等方面。  本指導原則是對企業和檢驗人員的指導性文件,但不包括注冊審批所涉及的行政

    法醫DNA檢測技術的現狀及展望

    法醫DNA檢測技術的現狀及展望龐曉東 陳學亮 榮海博 俞麗娟 管樺 張濤公安部第一研究所DNA檢測技術的應用,為法醫學帶來了一場技術革命。通過對遺傳物質DNA的序列多態性及長度多態性的檢驗,即可實現個體識別及親權鑒定,該技術正在成為當前法醫物證鑒定最

    基因芯片的必備知識和操作流程

    基因芯片  技術的誕生為生物技術工作人員打開了一道科研的便利之門,曾被評為1998年年度十大科技進展之一。本文對基因芯片的實驗原理、技術基礎、分類、用途、操作主要環節等內容做詳細的介紹。 1.基本原理和技術基礎 基因芯片以DNA雜交  為基本原理,基于A和T、G和C的

    單細胞基因組測序如何實現:從實驗到分析,步步解析

      隨著生命科學研究的微觀化,基于細胞群體的研究方法已不適用于某些研究領域(如腫瘤異質性、早期胚胎發育等)。單細胞基因組測序通過在單個細胞水平上進行測序,解決了用組織樣本無法獲得不同細胞間的異質性信息或樣本量太少無法進行常規測序的難題,為科學家研究單個細胞的行為、機制等提供了新的方向。  【應用概覽

    CFDA:關于《胎兒染色體非整倍體檢測試劑盒指導原則》

    關于《胎兒染色體非整倍體(T21、T18、T13)檢測試劑盒(高通量測序法)指導原則》(征求意見稿)公開征求意見的通知  各有關單位:  根據我中心2016年度醫療器械技術審查指導原則編寫的任務安排,我中心組織編寫了《胎兒染色體非整倍體(T21、T18、T13)檢測試劑盒(高通量測序法)指導原則》(

    磁珠深度解析,真的非AMPure XP不可嗎?

      基因測序越來越得到臨床的認可,尤其是精準醫療概念提出以后,更是備受青睞,為精準治療解答很多未知的問題。高通量測序技術的跨越式發展,使測序能力大幅上升,在整個NGS工作流程中,磁珠是必不可少的產品。磁珠通過磁顆粒活性基團在一定條件下可與核酸結合和解離的原理,將樣本中目的片段分離。可實現對核酸樣本的

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    質粒抽提的基本原理及操作流程

      質粒抽提的基本原理及操作流程   ⒈質粒抽提基本原理   在其中采用幾種水溶液及其硅酸化學纖維膜(超濾膜柱)。 水溶液Ⅰ:50 mM果糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA,pH 8.0;水溶液Ⅱ:0.2 N NaOH / 1%SDS; 水溶液Ⅲ:3 M 醋酸鉀/ 2 M

    新一代測序技術之三國時代(上):Illumina

    【摘要】2005年454公司首推劃時代的新一代測序儀,從而引發了測序市場上454、Illumina、ABI等公司在新一代測序技術上的比拼高潮。也正是這種你追我趕,讓繪制人類全基因組圖譜由過去的耗費4.37億美元和13年時間,驟然縮短到如今SOLiD 3運行一次即獲得50GB可定位測序數據。新一代測序

    PCR技術在食品檢驗中的應用

      摘 要:食品行業的各環節都具有一定的聯系性,因此其一旦在某一環節發生了食品安全問題,就會對整個食品產銷流程都造成一定的影響,同時也會直接威脅食用該食品的消費者的人身安全。所以為了應對這種潛在的威脅,需要引進相關科學技術對食品的質量進行檢測,進而將潛在的食品安全威脅消滅在萌芽狀態。本文就主要分析了

    高通量芯片技術在細胞遺傳學檢測領域的劃時代飛躍

      細胞遺傳學是從細胞的角度,主要是從染色體的結構和行為來研究遺傳現象,并找出遺傳機制和遺傳規律。目前和基礎理論與臨床醫學緊密結合對于遺傳咨詢和產前診斷具有重要意義。而迅速發展的芯片技術在檢測通量、分辨率、靈敏度等方面都遠遠超過了傳統的細胞遺傳學方法。因此可以說高通量芯片技術是細胞遺傳學檢測領域的一

    新一代測序技術(下)-SOLiD (ABI)

     【摘要】 2005年454公司首推劃時代的新一代測序儀,從而引發了測序市場上454、Illumina、ABI等公司在新一代測序技術上的比拼高潮。也正是這種你追我趕,讓繪制人類全基因組圖譜由過去的耗費4.37億美元和13年時間,驟然縮短到如今SOLiD 3運行一次即獲得50GB可定位測序數據。新一代

    SLAF-seq技術:大規模基因分型高通量策略

    大規模基因分型在遺傳相關性研究中起著重要作用,尤其是和高通量測序技術結合后,它為基因挖掘帶來了新的機遇。大規模基因分型的有效解決方法:SLAF-seq(specific-locus amplified fragment sequencing),該技術前期利用生物信息學方法,對目標物種的參考基因組(

    科技部等6部門印發《“十三五”健康產業科技創新專項規劃》

      分析測試百科網訊 近日, 按照《中華人民共和國國民經濟和社會發展第十三個五年規劃綱要》、《“十三五”國家科技創新規劃》、《“健康中國2030”規劃綱要》等的總體部署,為加快推進健康產業科技發展,打造經濟發展新動能,促進未來經濟增長,引領健康服務模式變革,支撐健康中國建設,科技部等6部門制定《“十

    第二屆全國樣品制備學術報告會在貴陽舉辦(上)

      分析測試百科網訊 2015年8月16日,中國儀器儀表學會分析儀器分會樣品制備專業委員主辦的第二屆全國樣品制備學術報告會在貴陽舉行。本次大會與中國儀器儀表學會分析儀器分會2015學術年會同期舉辦,參會200余人。張玉奎院士擔任會議名譽主席,關亞風研究員擔任會

    現在的基因學,相當于1994年的互聯網

      過去的半個世紀見證了生命科學的空前發展。  人造心臟、新的特效藥、器官移植和其他一些新興醫療手段,使得人們可以活得更久更健康。  而今后的幾年,我們也許能生活在一個更好的世界里:  我們能夠精確地找到癌細胞、移植農場動物的肺到人體中來幫助人類呼吸、讓最貧窮偏遠的地方也能夠獲得世界最頂尖醫院的治療

    微衛星技術(micro satellite, MS)

    微衛星DNA又稱短串聯重復序列(short tandem repeats, STR) 、簡單重復序列(simple sequence repeat, SSR),指DNA基因組中小于10個核苷酸的簡單重復序列,廣泛存在于真核基因組中,多數以2~6個堿基為核心單位、串聯重復排列的序列。  1974年,S

    數字PCR技術的發展與應用簡介

    數字PCR技術的原理數字PCR(Digital PCR-dPCR)技術是一種新的核酸檢測和定量方法,與傳統定量PCR(qPCR)技術不同,數字PCR采用絕對定量的方式,不依賴于標準曲線和參照樣本,直接檢測目標序列的拷貝數。由于這種檢測方式具有比傳統qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性,dPCR迅

    核酸、蛋白質等微量紫外吸光度測量的應用方案

    引言核酸(DNA、RNA)、蛋白質等生物樣品的微量紫外吸光度及濃度的檢測,有助于基因測序、基因篩查、分子育種和動物克隆等生命科學的研究。多家生命科學領域的實驗設備供應商已將海洋光學的微型光纖光譜儀應用在了其微量或者超微量紫外分光光度計設備中,并實現了全波段200-850nm,或

    AFLP分子標記實驗

    其基本原理是:以PCR(聚合酶鏈式反應)為基礎,結合了RFLP、RAPD的分子標記技術。把DNA進行限制性內切酶酶切,然后選擇特定的片段進行PCR擴增(在所有的限制性片段兩端加上帶有特定序列的“接頭”,用與接頭互補的但3-端有幾個隨機選擇的核苷酸的引物進行特異PCR擴增,只有那些與3-端嚴格配對的片

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