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實驗概要精原細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、運動、衰老、死亡等項生命活動的調節機制的深入研究，精子發生機理的進一步闡明以及精原細胞異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞，用于體外培養。資料表明，從成年嚙齒類的睪丸分離粗線期及其后各發育階段生精細胞的工作已取得可喜成績，所獲細胞的純度已超過90%，產量達到107個。但可用于體外培養的精原細胞的分離卻一直進展不大。有些報道雖然純度很高，產量卻很低；另一些報道產量高但純度低。1977年，Bellve等報道從生后8d小鼠睪丸中獲得了純度91%的A型精原細胞，產量達2×107個。但使用的小鼠卻多達60余只，耗費了大量的實驗動物。我們的前期工作已表明，小鼠生后7～8d，其生精上皮內基本只有支持細胞和A型精原細胞，其他各級生精細胞尚未發育形成。在體外，支持細胞總是先生殖細胞而貼壁。因此，本實驗選用生后7～8d小鼠的......閱讀全文
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
實驗方法原理酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。實驗材料長白種系公豬試劑、試劑盒膠原酶胰蛋白酶脫氧核糖核酸酶牛血清白蛋白胎牛血清RPMI 1640培養基HE染液PBS儀
實驗方法原理 酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。
實驗方法原理酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。實驗材料長白種系公豬
（一）一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡（簡稱光鏡）觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊，先用固定劑（fixative）固定（fixation），使組織中的蛋白質迅速凝固，防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等，一般常將幾種固定劑配制成混
實驗概要本實驗詳細介紹了顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程。實驗原理轉基因小鼠制備的基本原理是將改建后的目的基因(或基因組片段)用顯微注射法注入供體小鼠的受精卵(或著床前胚胎細胞)，然后將此受精卵(或著床前胚胎細胞)再植入受體動物的輸卵管(或子宮)中，使其發育成攜帶有外源基因的轉基因動物，通過分
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
《Cell Stem Cell》雜志是2007年Cell出版社新增兩名新成員之一(另外一個雜志是Cell Host & Microbe)，這一雜志內容涵蓋了從最基本的細胞和發育機制到醫療軟件臨床應用等整個干細胞生物學研究內容。這一雜志特別關注胚胎干細胞、組織特異性和癌癥干細胞的最新成
本文中，小編整理了多篇重要研究成果，共同聚焦科學家們在基因療法研究領域取得的新進展，分享給大家！ 圖片來源：mainnews.net 【1】兩種基因療法或有望治愈罕見遺傳病 doi：10.1172/jci.insight.130260 doi：10.1073/pnas.1906182116
環狀RNA(circular RNA,circRNA)是一種新興的內源性非編碼RNA(noncoding RNA,ncRNA)，是繼microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非編碼RNA家族中極具研究潛力的新成員。越來越多的研究表明，環狀RNA具
來自北京生命科學研究所的研究人員報道了小鼠體細胞核移植胚胎第一個細胞周期中，體細胞組蛋白乙酰化和甲基化修飾經歷動態重編程的過程。這一研究成果公布在《Biology of Reproduction》雜志上。 領導這一研究的是高紹榮博士為，第一作者為王鳳超，論文的其他作者還有寇朝輝，張郁。這一項研究
第一節 概 述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工
實驗概要本試驗描述了通過體內處理小鼠精原干細胞產生轉基因小鼠的技術，其成功率高。在此次研究中通過的將幼鼠的精原干細胞（SSCS）與重組慢病毒表達的EGFP -F在體內感染，然后與正常雌性交配。轉基因可遺傳和前處理的小鼠可在多次交配試驗中使用。這項技術可以適用于模擬接近人類發展和疾病的實
一、對照實驗 1．吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時，需用相應的抗原吸收抗血清后，再孵育標本，判斷結果的可信性（結果應為陰性）。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種（見本書第一章 ），對于不能形成沉淀，難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原，以固相吸收為佳
單核細胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎和單核細胞增多。它廣泛存在于自然界中，食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險，該菌在4℃的環境中仍可生長繁殖，是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一，因此
單核細胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎和單核細胞增多。它廣泛存在于自然界中，食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險，該菌在4℃的環境中仍可生長繁殖，是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一，因此，在食品衛生微生物檢驗中，必須加以
實驗方法原理 前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體，它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成，每一種 snRNP 由一個 snRNA 和
前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體，它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成，每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋
關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題，包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸，關于包涵體的處理一般包括這么幾步：菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化，內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌？ 細胞的破碎方法 1.高速組織搗碎
原生質體（Protoplast）：指采用機械或酶解法去掉細胞壁的裸露細胞。一、原生質體的應用 由于沒有細胞壁，原生質體為作物遺傳改良和植物學研究提供了極為有利的試驗材料。原生質體可以用于下面幾種研究。1. 用作細胞雜交服務于作物改良2. 用作遺傳轉化的對象3. 研
用哺乳動物細胞 S10 抽提物翻譯脊髓灰質炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技術。實驗材料ATPGTP質粒 DNA肌酸磷酸激酶10%SDS 膠肌酸磷酸激酶核酸酶tRNAHeLaS3 細胞TgSVA 細胞Lx 細胞來源于表達人脊髓灰質炎病毒受體的 Ltk 細胞NS20Y 細胞人肝癌來源的 HepG2
實驗材料 ATP GTP 質粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 膠 肌
實驗概要小鼠精原干細胞分離培養主要試劑0.1%明膠、DPBS、0.25%胰蛋白酶、400目細胞篩、精原干細胞培養液、1 mg/mL膠原酶Ⅳ、7 mg/mLDNase、細胞基礎培養液、DMEM-C、精原干細胞凍存液(Kubota et. al., 2004a and 2004b)（4℃條件下可
以下問題是以Promega公司試劑盒為例。凝膠遷移實驗1)什么是凝膠遷移或電泳遷移率實驗？凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA）是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白，目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互
1.2.7重組融合蛋白的純化 PrP-pET-32a（+）轉化表達菌E.coli BL21（DE3），TB培養基中，25℃，AMP 200 ug/ml，搖床（250 r／min）培養至OD600約為1.5，更換等體積新鮮TB培養基，加入IPTG至終濃度1 mM，AMP 200 ug/ml，
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗 實驗步驟
3.4.5 親和層析的應用親和層析的應用主要是生物大分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用于純化各種生物大分子的情況。抗原和抗體利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進行分離的方法又稱為免疫親和層析。例如將抗原結合于親和層析基質上，就可以從血清中分離其對應的抗體。在蛋白質工程菌發酵液中所需蛋白
北京時間，2019年4月2日晚7點30，素有“小諾貝爾獎”之稱的加拿大蓋爾德納獎公布，最受關注的蓋爾德納國際獎頒給了5位在生物醫學科學領域做出重大發現或貢獻的科學家。 5位蓋爾德納國際獎獲獎人分別為： 闡明紫杉醇的作用機制的Susan Band Horwitz博士，發現新的馬達蛋白驅動蛋白的