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【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布于位于27%～35%間的Percoll梯度中，其超微結構與7～8d小鼠睪丸切片內精原細胞的超微結構一致，經純化后其純度達68.76%。 結論 用組合酶消化、Percoll不連續密度梯度法分離的7～8d小鼠的精原細胞能滿足體外培養的需要。 【關鍵詞】 精原細胞；分離；小鼠 【中圖分類號】 S865.1+30.1 【文獻標識碼】 A 【文章編號】 0529-1356(2000)03-235SEPARATION AND PURIFICATION OF SPERMATOGONIA IN MOUSEZHANG Xue-ming, LAI L......閱讀全文
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
實驗方法原理酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。實驗材料長白種系公豬
實驗方法原理 酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。
實驗方法原理酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。實驗材料長白種系公豬試劑、試劑盒膠原酶胰蛋白酶脫氧核糖核酸酶牛血清白蛋白胎牛血清RPMI 1640培養基HE染液PBS儀
一、材料和方法1、實驗動物長白種系公豬，2月齡，由北京養豬中心葦溝現代化豬場提供。取活體睪丸，立即放入1640營養液中，待分離細胞。2、主要試劑及材料膠原酶（CLS，Sigma），胰蛋白酶（Sigma），脫氧核糖核酸酶（DNase,Promega），牛血清白蛋白（BSA，中國醫學科學院天津血液研究所
實驗概要精原細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、運動、衰老、死亡等項生命活動的調節機制的深入研究，精子發生機理的進一步闡明以及精原細胞異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞，用于體外培養。資料表明，從成年嚙齒類的睪丸分離粗線
（一）一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡（簡稱光鏡）觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊，先用固定劑（fixative）固定（fixation），使組織中的蛋白質迅速凝固，防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等，一般常將幾種固定劑配制成混
實驗概要本試驗描述了通過體內處理小鼠精原干細胞產生轉基因小鼠的技術，其成功率高。在此次研究中通過的將幼鼠的精原干細胞（SSCS）與重組慢病毒表達的EGFP -F在體內感染，然后與正常雌性交配。轉基因可遺傳和前處理的小鼠可在多次交配試驗中使用。這項技術可以適用于模擬接近人類發展和疾病的實
實驗概要本實驗詳細介紹了顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程。實驗原理轉基因小鼠制備的基本原理是將改建后的目的基因(或基因組片段)用顯微注射法注入供體小鼠的受精卵(或著床前胚胎細胞)，然后將此受精卵(或著床前胚胎細胞)再植入受體動物的輸卵管(或子宮)中，使其發育成攜帶有外源基因的轉基因動物，通過分
截止2020月7月27日，中國學者在Cell，Nature 及Science 發表了共計102項生命科學的研究成果，其中新冠肺炎領域占了近一半（共43篇）。iNature系統總結了這些研究成果： 按雜志來劃分：Cell 發表了30篇，Nature 發表了45篇，
來自北京生命科學研究所的研究人員報道了小鼠體細胞核移植胚胎第一個細胞周期中，體細胞組蛋白乙酰化和甲基化修飾經歷動態重編程的過程。這一研究成果公布在《Biology of Reproduction》雜志上。 領導這一研究的是高紹榮博士為，第一作者為王鳳超，論文的其他作者還有寇朝輝，張郁。這一項研究
1月14日，國際學術期刊Molecular Biology and Evolution 在線發表了中國科學院生物化學與細胞生物學研究所吳立剛實驗室的研究成果：Evolution of an X-linked miRNA family predominantly expressed in mamm
《Cell Stem Cell》雜志是2007年Cell出版社新增兩名新成員之一(另外一個雜志是Cell Host & Microbe)，這一雜志內容涵蓋了從最基本的細胞和發育機制到醫療軟件臨床應用等整個干細胞生物學研究內容。這一雜志特別關注胚胎干細胞、組織特異性和癌癥干細胞的最新成
3.4分子標記技術與遺傳多樣性研究了將魚類基因內含子作為遺傳多樣性評價指標的可行性，應用SSCP和定序的方法研究了大西洋和地中海幾種海洋生物的遺傳多樣性。研究了南美白對蝦消化酶基因的多態性；利用寄生性原生動物和有毒甲藻基因組DNA的間隔區序列作標記檢測環境水體中這些病原生物的污染程度，應用18S和5
本文中，小編整理了多篇重要研究成果，共同聚焦科學家們在基因療法研究領域取得的新進展，分享給大家！ 圖片來源：mainnews.net 【1】兩種基因療法或有望治愈罕見遺傳病 doi：10.1172/jci.insight.130260 doi：10.1073/pnas.1906182116
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
一、對照實驗 1．吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時，需用相應的抗原吸收抗血清后，再孵育標本，判斷結果的可信性（結果應為陰性）。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種（見本書第一章 ），對于不能形成沉淀，難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原，以固相吸收為佳
初春的清華園，醫學樓里忙碌非凡。在白大褂的穿梭交織中，李蓬從實驗室走進辦公室，一縷清香撲鼻而來，她的辦公桌上放著一束百合花。“這是高中母校獲悉我當選院士之后，專程從江西送來的。”李蓬微微一笑，一如眼前這百合花般恬淡優雅。 在2015年中國科學院新增選院士名單中，李蓬赫然在列。面對這一榮譽，她謙
北京時間，2019年4月2日晚7點30，素有“小諾貝爾獎”之稱的加拿大蓋爾德納獎公布，最受關注的蓋爾德納國際獎頒給了5位在生物醫學科學領域做出重大發現或貢獻的科學家。 5位蓋爾德納國際獎獲獎人分別為： 闡明紫杉醇的作用機制的Susan Band Horwitz博士，發現新的馬達蛋白驅動蛋白的
實驗材料 ATP GTP 質粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 膠 肌
第一節 概 述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工
實驗材料 ATP GTP 質粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 膠肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 細胞 TgSVA 細胞 Lx 細胞來源于表達人脊髓灰質炎病毒受體的 Ltk 細胞 NS20Y 細胞 人肝癌來源的 HepG2 細胞試劑、試劑盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等滲
用哺乳動物細胞 S10 抽提物翻譯脊髓灰質炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技術。實驗材料ATPGTP質粒 DNA肌酸磷酸激酶10%SDS 膠肌酸磷酸激酶核酸酶tRNAHeLaS3 細胞TgSVA 細胞Lx 細胞來源于表達人脊髓灰質炎病毒受體的 Ltk 細胞NS20Y 細胞人肝癌來源的 HepG2
單核細胞增生李斯特氏菌的特性及檢驗方法！ 單核細胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎和單核細胞增多。它廣泛存在于自然界中，食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險，該菌在4℃的環境中仍可生長繁殖，是冷藏食品威脅人類健康的主要
單核細胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎和單核細胞增多。它廣泛存在于自然界中，食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險，該菌在4℃的環境中仍可生長繁殖，是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一，因此
單核細胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎和單核細胞增多。它廣泛存在于自然界中，食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險，該菌在4℃的環境中仍可生長繁殖，是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一，因此，在食品衛生微生物檢驗中，必須加以
環狀RNA(circular RNA,circRNA)是一種新興的內源性非編碼RNA(noncoding RNA,ncRNA)，是繼microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非編碼RNA家族中極具研究潛力的新成員。越來越多的研究表明，環狀RNA具
實驗性自身免疫性神經炎(EAN)模型實驗方法原理實驗性自身免疫性神經炎(experimental all ergicalneuntis,EAN)于1955年由Waksman和Adams首次描述，其臨床經過、神經電生理檢查及病理學改變與吉蘭－巴雷綜合征最常見的臨床亞型－急性炎癥性脫髓鞘性多發神經炎(a
實驗方法原理 前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體，它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成，每一種 snRNP 由一個 snRNA 和