線粒體的分離與觀察
一、實驗目的1. 初步掌握用差速離心法分離大鼠肝細胞線粒體的方法。2. 學習并掌握高速離心機和勻漿器的使用方法。二、實驗原理線粒體(mitochondria)是真核細胞中產生能量的重要細胞器。細胞中的能源物質—脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化,并通過偶聯磷酸化生成ATP,供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行的。制備線粒體時,可將組織勻漿液懸浮在懸浮介質中進行差速離心法進行分離。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉速),大小不一的顆粒沉降速度取決于它的密度、半徑和懸浮介質的粘度。在一個均勻懸浮介質中離心一定時間,組織勻漿中的各種細胞器及其它內含物由于沉降速度不同而停留在高低不同的位置。依次增加離心力和離心時間,就能夠使這些顆粒按其大小、輕重分批沉降在離心管底部,從而分批收集。細胞器中最先沉淀的是細胞核,其次是線粒體,其它更輕的細胞器和大分子可依次再分離。懸浮介質通常用緩沖的蔗糖溶液,它比較......閱讀全文
線粒體基因
線粒體基因:mtDNA,線狀、環狀,能單獨復制,同時受核基因控制。哺乳動物:無內含子,有重疊基因突變率高。
NOVOstar鈣流檢測系統在量度分離線粒體對鈣離子吸收中...
NOVOstar鈣流檢測系統在量度分離線粒體對鈣離子吸收中的應用實而不華的鈣流檢測系統-NOVOstar?中科院上海生科院神經所剛于七月份在著名科學期刊PNAS (vol.110, no.27, 11011-11016) 發表了題為《Canonical transient receptor pote
線粒體的結構
線粒體由外至內可劃分為線粒體外膜(OMM)、線粒體膜間隙、線粒體內膜(IMM)和線粒體基質四個功能區。處于線粒體外側的膜彼此平行,都是典型的單位膜。其中,線粒體外膜較光滑,起細胞器界膜的作用;線粒體內膜則向內皺褶形成線粒體嵴,負擔更多的生化反應。這兩層膜將線粒體分出兩個區室,位于兩層線粒體膜之間
線粒體的功能
能量轉化 線粒體是真核生物進行氧化代謝的部位,是糖類、脂肪和氨基酸最終氧化釋放能量的場所。線粒體負責的最終氧化的共同途徑是三羧酸循環與氧化磷酸化,分別對應有氧呼吸的第二、三階段。細胞質基質中完成的糖酵解和在線粒體基質中完成的三羧酸循環在會產還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicot
線粒體的分布
線粒體分布方向與微管一致,通常分布在細胞功能旺盛的區域:如在腎臟細胞中靠近微血管,呈平行或柵狀排列;在腸表皮細胞中呈兩極分布,集中在頂端和基部;在精子中分布在鞭毛中區。在卵母細胞體外培養中,隨著細胞逐漸成熟,線粒體會由在細胞周邊分布發展成均勻分布。線粒體在細胞質中能以微管為導軌、由馬達蛋白提供動
線粒體的作用
線粒體的作用:1、細胞有氧呼吸的主要場所線粒體是一種存在于大多數細胞中的用兩層膜包被的細胞器,是細胞有氧呼吸的主要場所,被稱為“power house”,其直徑在0.5到1.0微米左右。大多數真核細胞或多或少都擁有線粒體,但它們各自擁有的線粒體在大小數量以及外觀等方面上都有所不同。線粒體是一些大小不
線粒體的形狀
線粒體一般呈短棒狀或圓球狀,但因生物種類和生理狀態而異,還可呈環狀、線狀、啞鈴狀、分杈狀、扁盤狀或其它形狀。成型蛋白(shape-forming protein)介導線粒體以不同方式與周圍的細胞骨架接觸或在線粒體的兩層膜間形成不同的連接可能是線粒體在不同細胞中呈現出不同形態的原因。
線粒體的功能
主要功能:1,能量轉化線粒體是真核生物進行氧化代謝的部位,是糖類、脂肪和氨基酸最終氧化釋放能量的場所。線粒體負責的最終氧化的共同途徑是三羧酸循環與氧化磷酸化,分別對應有氧呼吸的第二、三階段。2,三羧酸循環糖酵解中生成的每分子丙酮酸會被主動運輸轉運穿過線粒體膜。進入線粒體基質后,丙酮酸會被氧化,并與輔
線粒體的組成
線粒體的化學組分主要包括水、蛋白質和脂質,此外還含有少量的輔酶等小分子及核酸。蛋白質占線粒體干重的65-70%。線粒體中的蛋白質既有可溶的也有不溶的。可溶的蛋白質主要是位于線粒體基質的酶和膜的外周蛋白;不溶的蛋白質構成膜的本體,其中一部分是鑲嵌蛋白,也有一些是酶。線粒體中脂類主要分布在兩層膜中,
為什么線粒體自噬被抑制,線粒體數量減少
因為線粒體活性進入休眠狀態。線粒體自噬被抑制,線粒體數量減少,會使線粒體代謝引起氧化,導致線粒體活性細胞進入休眠狀態。線粒體,是一種存在于大多數細胞中的由兩層膜包被的細胞器,細胞中制造能量的結構。
線粒體膜電位熒光探針Cell-Meter-線粒體膜電位(MMP)
人體的ATP有95%為線粒體所提供,合成的ATP通過線粒體內膜ADP/ATP載體與細胞質中的ADP交換進入細胞質,參與細胞的各種需能過程,因此線粒體與細胞維持正常功能密切相關。線粒體在呼吸氧化過程中,將所產生的能量以電化學勢能儲存于線粒體內膜,在內膜兩側造成質子及其他離子濃度的不對稱分布而形成線粒體
Cell:一種能快速分離和檢測線粒體代謝物的新方法
線粒體能通過精確控制的化學反應,以 ATP 的形式產生能量,在細胞內穩態中發揮著重要的作用。線粒體功能障礙存在于一些疾病中,包括帕金森氏病、心血管疾病和線粒體疾病。到現在為止,探究這些重要細胞器的內部代謝運作,一直是具有挑戰性的和不準確的。 來自 Whitehead 研究所的研究人員研發出一種
線粒體病的診斷
線粒體肌病的診斷依賴于典型的臨床癥狀:四肢近端極度不能耐受疲勞,身體矮小和神經性耳聾等,伴各亞型臨床特征;血清乳酸,丙酮酸增高和肌肉活組織檢查發現RRF,mtDNA缺失或點突變等之結果,線粒體腦肌病患者CT或MRI檢查可見白質腦病,基底核鈣化,腦軟化,腦萎縮和腦室擴大等。
線粒體病的鑒別
但應注意炎癥肌病和其他肌病可同時伴存線粒體和糖原堆積之可能,嚴防過多過濫診斷線粒體肌病。線粒體肌病需與多發性肌炎,重癥肌無力,周期性癱瘓和眼咽型進行性肌營養不良等鑒別。
線粒體疾病的癥狀
在不同嚴重程度的線粒體疾病,主要影響大腦,心臟和肌肉。根據細胞的體內受到影響,癥狀可能包括:生長緩慢,失去肌肉的協調性,肌肉無力,視覺和/或聽覺有問題的,發育遲緩,學習障礙,精神發育遲滯,心臟,肝臟或腎臟疾病,胃腸功能紊亂,嚴重的便秘,呼吸系統疾病,糖尿病,增加感染的風險,神經系統的問題,癲癇發
線粒體疾病的概述
線粒體疾病或功能障礙是一個能源生產的問題。幾乎在體內的所有的細胞都有線粒體。線粒體是微小的“發電廠”,為身體生產重要的能源。線粒體病是指細胞內的發電廠的運轉產生異常。當這種情況發生時,身體的某些功能不能正常工作。這是因為如果身體有電源故障:會產生漸變的效果,就好像“掉電”或“黑電”現象發生。在科
線粒體病的檢查
(一)實驗室檢查 1.血生化檢查 (1)血乳酸、丙酮酸最小運動量試驗:約80%的病人運動后10分鐘血乳酸和丙酮酸仍不能恢復正常,為陽性;線粒體腦肌病患者CSF乳酸含量也增高; (2)線粒體呼吸鏈復合酶活性降低。 2.mtDNA分析 (1)CPEO和KSS為mtDNA片段缺失,可能發生在
線粒體的功能作用
⑴若將純化的正常的線粒體與純化的細胞核在一起保溫,并不導致細胞核的變化。但若將誘導生成PT孔道的線粒體與純化的細胞核一同保溫,細胞核即開始凋亡變化。⑵細胞死亡調節蛋白不論是抑制死亡的bcl-2家族還是促進細胞死亡的Bax家族均以線粒體作為靶細胞器。bcl-2蛋白的C端的疏水肽段能插入線粒體外膜。事實
線粒體病的病因
基因突變(90%): 線粒體是細胞內提供能量的細胞器,人類mtDNA是長16569bp的環狀雙鏈分子,分輕鏈和重鏈,含37個基因,主要編碼呼吸鏈及與能量代謝有關蛋白,mtDNA缺失或點突變使編碼線粒體氧化代謝過程必需的酶或載體發生障礙,糖原和脂肪酸等不能進入線粒體充分利用和產生足夠的ATP,導
線粒體DNA的定義
線粒體DNA是線粒體中的遺傳物質,線粒體能為細胞產生能量(ATP),是在細胞線粒體內發現的脫氧核糖核酸特殊形態。線粒體是為細胞提供能量(ATP)的細胞器。一個線粒體中一般有多個DNA分子。
線粒體用什么染色
線粒體用健那綠染液,健那綠染液常用作線粒體專一性活體染色劑,可以將線粒體染成藍綠色。線粒體中細胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(即有色狀態)呈藍綠色,而在周圍的細胞質中染料被還原,成為無色狀態。線粒體能在健那綠染液中維持活性數小時,通過染色,可以在高倍顯微鏡下觀察到生活狀態的線粒體的形態和分布。線粒體
線粒體腫脹檢測方法
Estimating Mitochondrial Mass,可以用于線粒體腫脹的檢測Accurate measurements of mitochondrial mass require a probe that will accumulate in mitochondria regardless
線粒體DNA的特性
線粒體DNA是線粒體中的遺傳物質,線粒體能為細胞產生能量(ATP),是在細胞線粒體內發現的脫氧核糖核酸特殊形態。線粒體是為細胞提供能量(ATP)的細胞器。一個線粒體中一般有多個DNA分子。
線粒體基因的定義
線粒體基因:mtDNA,線狀、環狀,能單獨復制,同時受核基因控制。哺乳動物:無內含子,有重疊基因突變率高。
如何提取細胞線粒體
提取新鮮心肌組織細胞內線粒體的方案:心肌組織切碎后在4 ℃介質(0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4,0-4℃)中制備心肌組織勻漿。勻漿經750g、離心10 min后留上清,以9000 g離心20 min 后留沉淀,重新懸浮后以9000 g再離心20 min,棄
線粒體翻譯損傷通過激活線粒體UPR延長線蟲壽命
近日,《氧化還原生物學》(Redox Biology)在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心研究員周小龍研究組與中國科學院生物物理研究所研究員陳暢研究組的合作研究成果Mitochondrial translational defect extends lifespan in?C. elegan
Cell特輯:多面線粒體
“Cell Press Selections”是由Cell出版社推出的一份推薦文章集合手冊,主要介紹某個生命科學研究領域最新的進展及突出成果。相關特輯內容包括研究論文,評論性文章以及snapshots,涉及了同一領域的方方面面,更為重要的是這些文章由贊助商贊助,可以免費獲取。 線粒體在我們體內
如何診斷線粒體疾病?
線粒體肌病的診斷依賴于典型的臨床癥狀:四肢近端極度不能耐受疲勞、身體矮小和神經性耳聾等,伴各亞型臨床特征;血清乳酸、丙酮酸增高和肌肉活組織檢查發現RRF,mtDNA缺失或點突變等之結果。線粒體腦肌病患者CT或MRI檢查可見白質腦病、基底核鈣化、腦軟化、腦萎縮和腦室擴大等。 但應注意炎癥肌病和其
細胞化學詞匯線粒體DNA
中文名稱:線粒體DNA外文名稱:Mitochondrial DNA,mtDNA定?????? 義:線粒體DNA是線粒體中的遺傳物質,線粒體能為細胞產生能量(ATP),是在細胞線粒體內發現的脫氧核糖核酸特殊形態。線粒體是為細胞提供能量(ATP)的細胞器。一個線粒體中一般有多個DNA分子。?
線粒體DNA的組成結構
研究人員發明了轉換卵細胞基因材料的方法,用擁有健康線粒體的卵細胞取代攜帶錯誤線粒體DNA的卵細胞。結果是,胚胎會攜帶來自母親和父親的核DNA,以及卵細胞捐獻者的線粒體DNA。mtDNA雖能合成蛋白質,但其種類十分有限。迄今已知,mtDNA編碼的RNA和多肽有:線粒體核糖體中2種rRNA(12S及16