一、實驗目的1. 初步掌握用差速離心法分離大鼠肝細胞線粒體的方法。2. 學習并掌握高速離心機和勻漿器的使用方法。二、實驗原理線粒體(mitochondria)是真核細胞中產生能量的重要細胞器。細胞中的能源物質—脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化,并通過偶聯磷酸化生成ATP,供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行的。制備線粒體時,可將組織勻漿液懸浮在懸浮介質中進行差速離心法進行分離。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉速),大小不一的顆粒沉降速度取決于它的密度、半徑和懸浮介質的粘度。在一個均勻懸浮介質中離心一定時間,組織勻漿中的各種細胞器及其它內含物由于沉降速度不同而停留在高低不同的位置。依次增加離心力和離心時間,就能夠使這些顆粒按其大小、輕重分批沉降在離心管底部,從而分批收集。細胞器中最先沉淀的是細胞核,其次是線粒體,其它更輕的細胞器和大分子可依次再分離。懸浮介質通常用緩沖的蔗糖溶液,它比較......閱讀全文
一、破碎細胞的方法 1.桿狀玻璃勻漿器法 ?該勻漿器由一根端部表面磨砂的玻璃桿和一個內壁磨砂的玻璃套管組成。使用時,先用鋒利的刀片把組織塊切碎,然后把碎塊加入套管中,用力使玻桿移動使組織細胞破碎。 2.高速組織搗碎機法 ?使用時將4℃預冷的組織碎塊或細胞懸液加入搗碎機的梅
最近,Whitehead研究所的科學家們開發出一種方法,可快速分離和系統地測量線粒體(被稱為細胞的“動力室”)內的代謝物濃度。之前嘗試這種測量,得到的結果不可靠,要么分離線粒體的時間太長,要么來自其他細胞成分的內容物污染了線粒體代謝物。相關研究結果發表在8月25日的《Cell》雜志。 領導這一
一.實驗目的用差速離心法分離動、植物細胞線粒體。二.實驗原理 線粒體(mitochondria)是真核細胞特有的,司能量轉換的重要細胞器。細胞中的能源物質——脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化,并通過藕聯磷酸化生成ATP,供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行
線粒體是一種雙膜結合的細胞器,存在于大多數真核細胞中。線粒體的功能是提供細胞能量。此外,線粒體參與其他任務,如信號傳遞、細胞分化和細胞死亡,以及維持對細胞周期和細胞生長的控制。線粒體與多種人類疾病有牽連,包括線粒體疾病、心臟疾病、心力衰竭和孤獨癥。線粒體可能在這些細胞過程中發揮重要作用。 為您推薦高
千百年來,細胞中的細胞器—線粒體常常被視為細胞的能量工廠,在線粒體中,糖分和脂肪能被氧化成為能量,最近,來自加州大學洛杉磯分校(UCLA)的科學家們通過研究發現,并非所有的線粒體都是這樣,在每個細胞中都有一組特殊的線粒體能夠吸附脂肪滴,相比燃燒脂肪產生能量而言,這些特殊的線粒體主要負責提供能量來
線粒體能通過精確控制的化學反應,以 ATP 的形式產生能量,在細胞內穩態中發揮著重要的作用。線粒體功能障礙存在于一些疾病中,包括帕金森氏病、心血管疾病和線粒體疾病。到現在為止,探究這些重要細胞器的內部代謝運作,一直是具有挑戰性的和不準確的。 來自 Whitehead 研究所的研究人員研發出一種
主要用途 真菌/酵母細胞高純線粒體分離試劑是一種旨在使用生物、化學和物理方法相結合,有效去除真菌/酵母菌細胞壁,進一步快速且充分裂解真菌/酵母菌細胞,從而分離出完整而高度純化的活性線粒體細胞器的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于各種新鮮培養或凍存的野生型或突變
實驗概要本實驗介紹了線粒體和細胞核制備的基本原理及操作。對分離得到的細胞核及線粒體進行了活性鑒定,有助于掌握用差速離心技術分離制備動物細胞核及線粒體的方法。實驗原理利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來(差速離心技術)。線粒體是真核細胞
3.5 純度鑒定可以通過各種細胞器標志性酶的活性來確定線粒體的污染程度。過氧化物酶體可以鑒定過氧化氫酶、羥基丙酮酸還原酶或者乙二醇氧化酶的活性;葉綠體可以用葉綠素含量,白色體可以用類胡蘿卜素的含量或堿性焦磷酸酶的活性;乙二醛循環體可以用異檸檬酸裂解酶的活性;內質網可以用對抗霉素 A 不敏感的細胞
實驗材料黃化苗 &n
線粒體和細胞核的制備與觀察利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來。(差速離心技術)線粒體是真核細胞特有的進行能量轉換的重要細胞器。將動植物組織制成勻漿,在適當的懸浮介質中差速離心法可以分離細胞線粒體。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉
線粒體和細胞核的制備與觀察利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來。(差速離心技術)線粒體是真核細胞特有的進行能量轉換的重要細胞器。將動植物組織制成勻漿,在適當的懸浮介質中差速離心法可以分離細胞線粒體。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉
通用型植物線粒體DNA萃取試劑盒產品說明書(中文版) 主要用途 通用型植物線粒體DNA萃取試劑是一種旨在通過物理或化學破膜及離心處理方法,從植物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器,然后進一步生物酶處理以獲得高質量的線粒體DNA的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制
實驗材料黃化苗試劑、試劑盒勻漿緩沖液清洗緩沖液Percoll 梯度溶液儀器、耗材分光光度計實驗步驟在選好植物材料和勻漿緩沖液后,接下來關鍵的因素包括勻漿方法、緩沖液的 pH、使用的緩沖液與植物組織之間的比例、研磨時間及溫度等(見注釋 5) 。3.1 勻漿根據植物組織的不同可以采取不同的勻漿方法,或者
線粒體是細胞中重要的細胞器,存在于絕大多數生活細胞中,它的主要功能是提供細胞內各種物質代謝所需要的能量。正由于這樣,對線粒體膜,呼吸鏈酶及線粒體DNA等成分的結構,功能以及物理化學性質的研究已經成為細胞生物學研究中的重要課題,所以提取線粒體的技術已經成為線粒體研究中必不可少的手段,線粒體大量存在于代
葉綠體的分離與熒光觀察一、實驗目的了解葉綠體分離的一般原理和方法,并熟悉應用熒光顯微鏡方法觀察葉綠體熒光現象。二、實驗原理葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器,能發生特有的能量轉換。利用低速離心機可以分離葉綠體,其分離在等滲溶液(0.35mol/L氯化鈉或0.4mol/L蔗糖溶液)中進行,目的是為了防
線粒體和細胞核的制備與觀察利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來。(差速離心技術)線粒體是真核細胞特有的進行能量轉換的重要細胞器。將動植物組織制成勻漿,在適當的懸浮介質中差速離心法可以分離細胞線粒體。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉
線粒體疾病如何診斷和治療?(運用成熟的單線粒體分離技術在顯微鏡下挑取單個小鼠線粒體。) 賓夕法尼亞大學醫學院James Eberwine領導的研究小組剛開發了一種適用于單個線粒體的分離和測序技術“單線粒體測序(single-mitochondrion sequencing)”利用這種新方法他們
主要用途 通用型植物線粒體DNA萃取試劑是一種旨在通過物理或化學破膜及離心處理方法,從植物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器,然后進一步生物酶處理以獲得高質量的線粒體DNA的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于各種新鮮植物組織,包括葉片(leaf)、谷粒(grai
NOVOstar鈣流檢測系統在量度分離線粒體對鈣離子吸收中的應用實而不華的鈣流檢測系統-NOVOstar 中科院上海生科院神經所剛于七月份在著名科學期刊PNAS (vol.110, no.27, 11011-11016) 發表了題為《Canonical transient receptor
實驗概要掌握細胞核與線粒體的分級分離的實驗技術。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過程包括組織細胞勻漿、分級
線粒體是細胞中重要的細胞器,存在于絕大多數生活細胞中,它的主要功能是提供細胞內各種物質代謝所需要的能量。正由于這樣,對線粒體膜,呼吸鏈酶及線粒體DNA等成分的結構,功能以及物理化學性質的研究已經成為細胞生物學研究中的重要課題,所以提取線粒體的技術已經成為線粒體研究中必不可少的手段,線粒體大量存在于代
真菌/酵母細胞線粒體DNA萃取試劑盒產品說明書(中文版) 主要用途 真菌/酵母細胞線粒體DNA萃取試劑是一種旨在使用生物、化學和物理方法相結合,有效去除真菌/酵母菌細胞壁,進一步快速且充分裂解真菌/酵母菌細胞,從而分離出完整而純化的線粒體細胞器,然后進一步生物酶處理以獲得高質量的線粒
主要用途真菌/酵母細胞線粒體DNA萃取試劑是一種旨在使用生物、化學和物理方法相結合,有效去除真菌/酵母菌細胞壁,進一步快速且充分裂解真菌/酵母菌細胞,從而分離出完整而純化的線粒體細胞器,然后進一步生物酶處理以獲得高質量的線粒體DNA的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于各
細胞由各種亞細胞結構組成。其重要的研究手段之一是分離純化亞細胞組分,觀察它們的結構或進行生化分析。離心技術是實現這一目標的基本手段。一般認為,轉速為10~25Kr/min的離心機稱為高速離心機;轉速超過25Kr/min,離心力大于89Kg者稱為超速離心機。目前超速離心機的最高轉速可達100Kr/mi
實驗方法原理 利用差速離心,將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來,再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA,然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖
實驗方法原理利用差速離心,將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來,再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA,然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作為一種蛋白變性劑可非常有效的滅活核糖核酸酶 A。通過 CsCl 梯度離心,線粒體 RNA 沉淀下來。最
摘要 Bcl-2基因是一原癌基因,能抑制細胞凋亡。但近年研究發現,存在有Bcl-2敏感和不敏感的細胞凋亡現象。Bcl-2抑制細胞調亡的機制目前仍然不清,大多認為與Bcl-2的細胞內抗氧化作用及抑制鈣離子的跨膜運動有關。最近,Reed提出Bcl-2具有離子通道蛋白和吸附/錨定蛋白的雙重特性,并闡述
實驗概要通過細胞勻漿和離心的方法分級分離細胞的組分,以了解其原理及過程。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過
一、原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步,這種方法已成為研究亞細胞成分的化