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    什么是PCR技術

    PCR技術也就是基因擴增技術,它是通過基因擴增儀,在細胞外進行DNA復制,由1個DNA分子增加到2個,然后依次增加到4個,8個…,使分子數目呈幾何級數增加,以在短時間內獲得足夠的DNA,供研究用的一種技術。PCR技術的出現,使生物學的研究一大突破。在PCR技術問世之前,人們無法查出愛滋病病毒感染者,因為這種病毒在感染者體內的含量很少,且難于培養。在PCR技術問世之后,可將愛滋病病毒的核酸進行擴增從而查出受感染者,并可研究治療方法。PCR技術已經在分子生物學中發揮了重要作用。可以預知,它在遺傳病診斷、治療,在動、植物育種,以及在司法破案等方面,將會發揮更大的作用。......閱讀全文

    多重PCR(Multiplex PCR)

    一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同.???

    Troubleshooting for PCR and multiplex PCR

    Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles. COMPONENT VO

    PCR簡介/PCR儀

    PCR的要素 基本的PCR須具備 PCR儀圖冊 1.要被復制的DNA模板 Template 2.界定復制范圍兩端的引物Primers. 3.DNA聚合酶Taq. Polymearse 4.合成的原料(四種脫氧核苷酸)及水。 PCR儀工作原理 利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作

    多重PCR(Multiplex PCR)

    一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多

    重疊PCR—overlap PCR

    1、簡介?重疊PCR也是基本的PCR原理:變性-退火-延伸。不同的是在重疊PCR過程是兩個或者幾個片段重疊延伸之后,再進行指數擴增的PCR過程。 ?2、基本原理*步:PCR產生兩個或者幾個片段,這幾個片段之間必須有重疊區。?第二步:以兩個片段為例,見上圖,*步產生的兩個片段,A D鏈之間有互補,B

    普通PCR梯度PCR 原位PCR 熒光定量PCR儀的區別

      普通PCR儀:   一般把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,稱之為普通PCR儀,也就是傳統的PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。如;(ABI 2720)   梯度PCR儀:   一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱

    反轉錄PCR(RT-PCR, Reversed Transcript PCR)

    1 原理   RT—PCR是一種將cDNA合成與PCR技術結合分析基因表達的快速靈敏的方法,主要用于對表達信息進行檢測或定量分析,還可以用來檢測基因表達差異而不必構建cDNA文庫克隆cDNA。RT-PCR的模板可以為總RNA或poly(A)+選擇性RNA。逆轉錄反應可以使用逆轉錄酶,以隨機引物、ol

    PCR技術(十四):反向PCR

    描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法,使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA,以產生適合于PCR擴 增大小的片段,然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列,但其方向性,使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開引

    反向PCR (inverse-PCR)

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列,因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補,但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA

    菌落PCR(Colony PCR)方法

    菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因組DNA,不必酶切鑒定,而是直接以菌體熱解后暴露的DNA為模板進行PCR擴增,省時少力。建議使用載體上的通用引物。通常利用此方法進行重組體的篩選或者DNA測序分析。最后的PCR產物大小是載體通用引物之間的插入片斷大小。 具體方法: 1、PCR混合

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