毛細管電泳的分離分析方法
CE 是在傳統的電泳技術基礎上于本世紀60 年代末由Hjerten 發明的,其利用小的毛細管代替傳統的大電泳槽,使電泳效率提高了幾十倍。此技術從80 年代以來發展迅速,是生物化學分析工作者與生化學家分離、定性多肽與蛋白類物質的有利工具。CE 根據應用原理不同可分為以下幾種;毛細管區帶電泳Capillary Zone electrophoresis,CZE)、毛細管等電聚焦電泳(Capillary Isoeletric Focusing,CIEF)毛細管凝膠電泳(CapillaryGelElectrophoresis,CGE)和膠束電動毛細管層析(Micellar Electokinetic Electrophoresis Chromatorgraphy,MECC)等。......閱讀全文
毛細管電泳根據分離模式分類
毛細管電泳根據分離模式不同可以歸結出多種不同類型的毛細管電泳。毛細管電泳的多種分離模式,給樣品分離提供了不同的選擇機會,這對復雜樣品的分離分析是非常重要的。毛細管電泳類型類型縮寫說明1 單根毛細管毛細管區帶電泳CZE毛細管和電極槽灌有相同的緩沖液毛細管等速電泳CITP使用兩種不同的CZE 緩沖液毛細
毛細管電泳分離因素pH值
pH值緩沖體系pH的選擇依樣品的性質和分離效率而定,是決定分離成敗的一大關鍵。不同樣品需要不同的pH分離條件,控制緩沖體系的pH值,一般只能改變電滲流的大小。pH能影響樣品的解離能力,樣品在極性強的介質中離解度增大,電泳速度也隨之增大,從而影響分離選擇性和分離靈敏度。pH還會影響毛細管內壁硅醇基的質
高效毛細管電泳分離模式
分離類型八種分離類型,介紹常用的幾種;根據試樣性質不同,采用不同的分離類型;每種機理的選擇性不同;一,毛細管區帶電泳capillary zone electrophoresis ,CZE帶電粒子的遷移速度=電泳和電滲流速度的矢量和.正離子:兩種效應的運動方向一致,在負極最先流出;中性粒子:無電泳現象
毛細管電泳分離因素進樣
進樣CE的常規進樣方式有兩種:流體力學和電遷移進樣。電遷移進樣是在電場作用下,依靠樣品離子的電遷移和(或)電滲流將樣品注入,故會產生電歧視現象,會降低分析的準確性和可靠性,但此法尤其適用于粘度大的緩沖液和CGE情況。流體力學進樣是普適方法,可以通過虹吸、在進樣端加壓或檢測器端抽空等方法來實現,但選擇
毛細管電泳儀的分離因素介紹
緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高,離子強度增加,雙電層
毛細管電泳儀分離條件的選擇
毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分離科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分離科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分離成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分離有了新的轉機。一、分離條件的選擇內容:1、毛
毛細管電泳色譜儀的分離模式
毛細管電泳色譜儀(CE)的分離模式有毛細管區帶電泳、毛細管膠束電泳色譜、毛細管凝膠電泳、毛細管等電聚焦電泳、毛細管等速電泳、毛細管陣列電泳和毛細管芯片電泳等。一、毛細管區帶電泳(CZE):CZE又稱毛細管自由電泳,由于操作簡單、多樣化,是目前CE中最基本、應用最廣泛的一種分離模式。在CZE中,毛細
微量制備毛細管電泳實驗——多次分離
實驗材料多肽:ACTH 4-10試劑、試劑盒血管緊縮素I和血管緊縮素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.30 存儲于 4℃)0.1 mol/L 氫氧化鈉儀器、耗材75 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶實驗步驟1. 低壓下(0.5 lb/in2
芯片毛細管電泳分離模式介紹
芯片毛細管電泳分離蛋白質主要采用區帶電泳、凝膠電泳、等電聚焦、膠束電動色譜及二維電泳等模式。
毛細管電泳根據分離通道形狀分類
按分離通道形狀分為圓形、扁形、方形毛細管電泳等。
毛細管電泳分離因素添加劑
添加劑在電解質溶液中加入添加劑,例如中性鹽、兩性離子、表面毛細管活性劑以及有機溶劑等,會引起電滲流的顯著變化。表面活性劑常用作電滲流的改性劑,通過改變濃度來控制電滲流的大小和方向,但當表面活性劑的濃度高于臨界膠束濃度時,將形成膠束。加入有機溶劑會降低離子強度,Zeta電勢增大,溶液粘度降低,改變管壁
毛細管電泳色譜儀分離系統
毛細管電泳色譜儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,毛細管是分離的關鍵。一、毛細管材質:理想的毛細管必須是化學和電惰性,能透過紫外和可見光,有一定的韌性,富有彈性,易于彎曲,耐用而且便宜。目前使用的材質有聚四氟乙烯、玻璃和石英等,其中石英最
毛細管電泳芯片等電聚焦分離
芯片等電聚焦分離芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3
毛細管電泳分離條件選擇流程
分離條件的選擇是毛細管電泳中最重要但也是最難之處。不同的專業研究工作者可能會有各自不同的選擇策略和流程,我們提出如下九步選擇流程,僅供參考: 第一步,盡可能多地了解分離樣品的類型、來源、組成及其性質; 第二步,根據樣品的可能性質和來源,選擇分離模式,若無樣品信息可先選CZE; 第三步,根據樣品性質確
毛細管電泳色譜儀分離類型
毛細管電泳色譜儀分離類型有電泳型、色譜型、聯用型和其它型。一、電泳型:1、毛細管區帶電泳:毛細管內只填充pH緩沖液。2、毛細管凝膠電泳:毛細管內填充聚丙烯酰胺等凝膠。3、毛細管等電聚焦電泳:毛細管內填充pH梯度介質。4、毛細管等速電泳:通常采用不連續(自由溶液)電泳介質。二、色譜型:1、填充毛細管電
毛細管電泳分離中性分子時可采用哪種分離模式
可采用膠束電動毛細管色譜法(MEKC),MEKC彌補了毛細管區帶電泳(CZE)分離模式的不足,它不僅可以分析荷電離子,還可以測定中性物質。在MEKC分離模式中,通常要向緩沖溶液中加入離子型表面活性劑(如十二烷基硫酸鈉,SDS等),當緩沖液中表面活性劑濃度超過其自身的臨界膠束濃度時就會形成膠束(準固定
毛細管電泳色譜儀分離模式的發展
毛細管電泳色譜儀簡稱毛細管電泳儀(CE),是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用帶電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機
毛細管電泳色譜法的分離原理簡介
電泳和電滲流并存,在不考慮相互作用的前提下,粒子在毛細管內電介質中的遷移速率是兩種速率的矢量和,在典型的毛細管電泳分離中,溶質的分離基于溶質間電泳速率的差異。電滲流的速率絕對值一般大于粒子的電泳速率,并有效地成為毛細管電泳的驅動力。溶質從毛細管的正極端進樣,帶正電的粒子最先流出,中性粒子次之,帶
影響毛細管電泳分離效果的因素介紹
緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高,離子強度增加,雙電層
影響毛細管電泳儀分離效果的因素
影響毛細管電泳儀分離效果的因素有電場強度、緩沖液pH、離子強度、溫度和添加劑等。一、電場強度:1、結果:電滲速度與電場強度成正比。2、說明:(1)電場強度降低,分離效率和分辨率降低。(2)電場強度增大,焦耳熱增大。二、緩沖液pH:1、結果:pH增大,電滲速度增大。2、說明:(1)改變電滲速度zui方
毛細管電泳分離技術的原理與應用
1 概述 毛細管電泳又稱高效毛細管電泳,包括電泳、色譜及其交叉內容,是一類以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,以樣品的多種特性為根據的液相微分離分析技術。CE 是分析科學中繼高效液相色譜之后的又一重大進展,它使分析科學從微升水平進入納升水平,并使單細胞分析乃至單分子分析成為可能。198
滲透分離技術分析實驗方法
實驗方法采用廣東某地區的生活垃圾處理廢水,其滲濾液在穩定塘中自然降解50d左右,水樣為棕褐色,pH:7.40~8.40;COD:1400mg/L~4000mg/L;電導率:11ms/cm~22ms/cm。實驗采用WUFVI實驗超濾系統,試驗系統由以下幾個處理單元組成:(1)一級反滲透裝置;(2)二級
毛細管電泳法(CE)檢測黃曲霉的方法介紹
毛細管電泳(CE)也是一種新發展起來的分析黃曲霉素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了較為理想的分離效果,其中對AFB2的測定最為靈敏。但CE法的成本較高,操作復雜,不適宜在試樣檢測中廣
毛細管電泳分析方法的工作原理介紹(一)
毛細管電泳(capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛細管電泳(HPCE), 是近年來發展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm內徑毛細管柱內用高電壓進行分離, 創立了現代毛細管電泳。1984年Terabe等建立了膠束毛細
毛細管電泳分析方法的工作原理介紹(二)
CE現有六種分離模式,分述如下:? 1. 毛細管區帶電泳(capillary zone electrophoresis, CZE), 又稱毛細管自由電泳, 是CE中最基本、應用最普遍的一種模式。前述基本原理即是CZE的基本原理。? 2. 膠束電動毛細管色譜 (micellar elect
微量制備毛細管電泳實驗——單次分離
實驗材料多肽:ACTH 4-10試劑、試劑盒4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.50)/乙烯乙二醇0.1 mol/L 氫氧化鈉儀器、耗材150 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶實驗步驟1. 制備多肽混合物和預處理柱子(見多次分離步驟 1 和 2)。2. 在 0.
CE儀在中藥分析中的應用
中藥品種繁多、藥材產地各異、成分復雜,無論是藥材還是成藥的分析,都是一項非常艱難的任務。中藥分析工作用現代化儀器設備和科技手段(如薄層色譜、HPLC等)雖取得巨大進展和成就,但往往只是對藥材和成藥成百上千個成分中的一個或幾個成分的分析,實際只是一種象征性的代表式分析,與之起化學和藥理效應的實際組
毛細管電泳分離緩沖液的相關介紹
緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。 緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高,離子強度增加,雙電
影響高效毛細管電泳儀分離效果的因素
? ? ? ??影響高效毛細管電泳儀分離效果的因素有電場強度、緩沖液pH、離子強度、溫度和添加劑等。一、電場強度:? 1、結果:??????? 電滲速度與電場強度成正比。? 2、說明:(1)電場強度降低,分離效率和分辨率降低。(2)電場強度增大,焦耳熱增大。二、緩沖液pH:? 1、結果:??????
影響高效毛細管電泳儀分離效果的因素
???????? 影響高效毛細管電泳儀分離效果的因素有電場強度、緩沖液pH、離子強度、溫度和添加劑等。一、電場強度:? 1、結果:??????? 電滲速度與電場強度成正比。? 2、說明:(1)電場強度降低,分離效率和分辨率降低。(2)電場強度增大,焦耳熱增大。二、緩沖液pH:? 1、結果:?????