單克隆抗體單克隆抗體(Monoclonal Antibody,McAb)即單個B淋巴細胞克隆所分泌的抗體。抗體主要由機體的B淋巴細胞合成,每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成該細胞的子孫,即克隆。如果選出一個合成一種抗體的細胞進行培養,就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞所合成的抗體即為單克隆抗體。1975年Kohler和Milstein首先報道,用細胞雜交技術,使經綿羊紅細胞(SRBC)免疫的小鼠脾細胞,與小鼠骨髓瘤細胞融合,創建了第一個B細胞雜交瘤細胞株,獲得了抗SRBC的單克隆抗體。這是免疫學,乃至醫學史上的一個里程碑。單克隆抗體的特點是:理化性狀高度均一、生物活性單一、與抗原結合的特異性強、便于人為處理和質量控制,并且來源容易。這些優點使它一問世就受到高度重視,并成為解決生物學和醫學等許多重大......閱讀全文
·?????????Tips and hints for the storage of antibodies?(Synaptic Systems) ·?????????Purification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose(KPL)
實驗步驟材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)裸 鼠 , 6?8 周齡,無 特 殊 病 原(SPF),或者是同基因型宿主(注射小鼠-小鼠雜交瘤時)姥 鮫 焼(Pristane, 2,6,10,14-四甲基十五焼; Aldrich 公司提供)雜 交 瘤(單 元 1.3)添 加 10 mmol/L H
實驗概要顯微鏡下觀察血片或骨髓片,找出異常細胞。實驗原理B淋巴細胞能夠產生抗體,但在體外不能進行無限分裂;而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代,但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后,用一特殊選擇培養基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路,而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存,且既能產
實驗原理 B淋巴細胞能夠產生抗體,但在體外不能進行無限分裂;而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代,但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后,用一特殊選擇培養 基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路,而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存,且既能產生抗體,又能無限增殖,并以此生產抗
實驗概要顯微鏡下觀察血片或骨髓片,找出異常細胞。實驗原理B淋巴細胞能夠產生抗體,但在體外不能進行無限分裂;而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代,但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后,用一特殊選擇培養基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路,而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存,且既能產
1~5 ml/min?的速度上樣于蛋白A-Sepharose柱,用Tris緩沖液洗柱子直至所有的未結合的蛋白都被洗脫,采用A280監測。?3. ?依次用2~3倍柱床體積的檸檬酸緩沖液、乙酸緩沖液液以及甘氨酸·Cl緩沖液連續洗脫結合蛋白,洗脫下的蛋白直接接入裝有中和緩沖液的管中,中和緩沖液的體積應為所
這種藥物是世界上第一個被批準用于治療EGF-R過度表達的晚期頭頸癌的人源化單克隆抗體,且是生物療法中全世界第三個被批準用于治療實體瘤的癌癥藥物。h-R3是由古巴分子免疫學中心自主開發的藥物,于2002年2月19日獲得古巴衛生部的新藥批準證書。另外,人源化單克隆抗體h-R3已在古巴完成了二期臨床實驗,
1、抗CD20單抗的情況?2、抗CD6單抗情況?目前該單抗是屬于抗CD6的IgG1亞型的單克隆抗體。該單抗是針對淋巴瘤細胞,可治療牛皮癬、類風濕關節炎。古巴分子免疫學中心(CIM)開發的人源化抗CD6單抗正在進行針對類風濕關節炎的I期臨床試驗。原來CIM開發過鼠源抗CD6單抗,并進行過治療牛皮癬、類
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 使用聚二乙醇(PEG ) 將抗原免疫過的小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞(P3. 653 )進行融合。用 HAT 選擇性培養基篩選雜合的克隆株(雜交瘤細胞)。融合后 10~14 天用 ELISA 對上清液進行篩査(ELISA 篩
1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術的基礎上,創建立雜交瘤技術,他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原免疫后的純系小鼠B細胞融合,成為雜交細胞系,既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細