哺乳動物細胞的生物特征
哺乳動物是全身被毛,運動快速,恒溫,胎生和哺乳的脊椎動物.它是脊椎動物中軀體結構,功能和行為最復雜的一個高等動物類群.鳥類和哺乳類都是從爬行動物起源的,它們分別以不同的方式適應陸棲生活所遇到的許多基本矛盾(陸地上快速運動,防止體內水分蒸發,完善的神經系統和繁殖方式),并在新陳代謝水平全面提高的基礎上獲得了恒溫.因而鳥類與哺乳類又稱為恒溫動物.......閱讀全文
哺乳動物細胞的生物特征
哺乳動物是全身被毛,運動快速,恒溫,胎生和哺乳的脊椎動物.它是脊椎動物中軀體結構,功能和行為最復雜的一個高等動物類群.鳥類和哺乳類都是從爬行動物起源的,它們分別以不同的方式適應陸棲生活所遇到的許多基本矛盾(陸地上快速運動,防止體內水分蒸發,完善的神經系統和繁殖方式),并在新陳代謝水平全面提高的基
哺乳動物細胞的簡介和生物特征
哺乳動物細胞（mammalian cell)來自哺乳動物體的細胞。它的培養由于可用來大量生產疫苗、重組蛋白和其他醫療產品而倍受重視。已建成許多重要的細胞系，這些細胞來自鼠、人、猴等。 哺乳動物是全身被毛,運動快速,恒溫,胎生和哺乳的脊椎動物.它是脊椎動物中軀體結構,功能和行為最復雜的一個高等動
哺乳動物細胞“變身”生物計算機
《科學》雜志28日報道，波士頓大學合成生物學家威爾森·黃帶領的團隊提出一種方法，用基因工程方法編輯哺乳動物細胞DNA，從而進行復雜的計算，使這類細胞變成生物計算機。他們希望新的編程技術有助于癌癥治療、按需生長可以替換受損身體部位的組織等。 科學家嘗試將細胞編輯工程從細菌擴展到哺乳動物細胞，創建
哺乳動物細胞總RNA的分離
實驗概要本實驗介紹了從培養的單層哺乳動物細胞中分離RNA的實驗程序，該程序同樣適用于從懸浮培養的哺乳動物細胞中或從易于分散成單個細胞的哺乳動物組織中分離RNA。但不適用于從固體組織中提取RNA，因為用這種裂解細胞的方法（在SDS存在的條件下用蛋白酶K消化)去消化組織速度很慢，導致內源性RNA酶在被蛋
哺乳動物細胞的細胞培養
實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，而洗刷消毒
哺乳動物細胞總RNA的分離
哺乳動物細胞總ＲＮＡ的分離細胞的裂解提取步驟注意事項 這一從培養的單層哺乳動物細胞中分離RNA的實驗程序系為Favaloro 等（1980）所介紹程序的改良。該程序同樣適用于從懸浮培養的哺乳動物細胞中或從易于分散成單個細胞的哺乳動物組織中分離RNA。但不適用于從固體組織中提取RNA，因為用這種裂解
哺乳動物細胞胞質RNA的分離
試劑、試劑盒 冰冷的磷酸鹽緩沖液 NaClKCl Na2HP04?7H20 KH2PO4 冰冷的裂解緩沖液： LTris-HCl NaCl MgCL2 NkmidetP-40 胎盤 RNase 抑制劑 SDS 蛋白酶 K 酚 氯 仿 異戊醇 乙酸鈉 (DEPC 處理） 無水乙醇 乙醇 乙酸鈉
哺乳動物細胞的RNAi技術策略(2)
1.化學合成盡管化學合成是最貴的方法，但是卻是最方便的――研究人員幾乎不需要做什么工作。包括Ambion和Qiagen公司都可以根據用戶要求提供高質量的化學合成si 。主要的缺點包括價格高，定制周期長，特別是有特殊需求的。由于價格比其他方法高，為一個基因合成3―4對si s 的成本就更高了，
哺乳動物細胞胞質RNA的分離
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 冰冷的磷酸鹽緩沖液 NaCl KCl Na2HP04?7H20 KH2PO4 冰冷的裂解緩沖液： LTris-HCl
哺乳動物細胞基因穩定轉染的實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 哺乳動物細胞 試劑、試劑盒
哺乳動物細胞的RNAi技術策略(1)
目前RNAi技術已經進入了生物科學研究的許多領域，成為了一種主要的生物學研究工具，發展得相當迅速，并受到了此次諾貝爾獎評審委員會的青睞，獲得2006年諾貝爾獎醫學/生理獎。然而這一才歷經十個年頭的技術依然對于許多研究人員來說還是很陌生的，以下是有關 i技術在哺乳動物細胞中應用的具體設計策略，主要
哺乳動物細胞基因穩定轉染的實驗
分析基因的功能常需要形成含有穩定整合了該基因的哺乳動物細胞系。在轉染中大約有1/104細胞將穩定整合外源因而可用一顯性（正向）選擇標記來分離穩定的轉化細胞。用可高效轉染的細胞系來確保轉染成功。另外，應包括合適的對照以確定目的基因無細胞毒性。實驗材料哺乳動物細胞試劑、試劑盒完全培養液儀器、耗材培養箱離
哺乳動物細胞基因穩定轉染的實驗
實驗材料 哺乳動物細胞試劑、試劑盒 完全培養液儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?確定所要轉染的細抱系能呈獨立集落生長。對于貼壁細胞，在10 cm 組織培養培養皿中接種約100個細胞，培養10~12天，毎4天換液1次。亞甲藍染色后對成活的細胞集落進行計數。?2. ?確定母代細胞的選擇條件：將一
哺乳動物細胞的細胞培養溫度
維持培養細胞旺盛生長，必須有恒定而適宜的溫度；不同種類的細胞對培養溫度要求也不同。人體細胞培養的標準溫度為36.5℃±0.5℃，偏離這一溫度范圍，細胞的正常代謝會受到影響，甚至死亡。培養細胞對低溫的耐受力較對高溫強，溫度上升不超過39℃時，細胞代謝與溫度成正比；人體細胞在39-40℃1小時，即能
哺乳動物細胞的RNAi技術策略(3)
5. si 表達框架si 表達框架(si expression cassettes，SECs)是一種由PCR得到的si 表達模版，能夠直接導入細胞進行表達而無需事前克隆到載體中。這個方法最早是由Castanotto和其同事(5)采用，包括一個 pol III啟動子，一段發夾結構si ，一個
哺乳動物細胞總RNA快速分離
試劑、試劑盒 尤鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液 EDTASDS 乙酸鈉水平衡的苯酚 乙醇 Tris-Cl NaCL 實驗步驟 一 材料與設備 1)尤鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液 (PBS) ? ?? 2)10 mmol/L ?EDTA (pH8.0 ) ? ?? 3)0.5% SDS ?
哺乳動物細胞總RNA快速分離
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 尤鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液 EDTA SDS 乙酸鈉 水平衡的苯酚 ?乙醇 Tris-Cl ?NaCL
哺乳動物細胞基因突變試驗
哺乳動物體外培養細胞的基因正向突變試驗常用的測試系統有小鼠淋巴瘤L5178Y細胞，中國倉鼠肺V79細胞和卵巢CHO細胞的三個基因位點的突變，即次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+／K+ATP酶(OUA)位點。HGRPT和Na+/K+ATP酶位點突變可用于上述三種細胞，O
培養兩棲動物細胞與哺乳動物細胞區別
1.培養兩棲動物細胞與哺乳動物細胞區別在培養液上,也就是血漿的不同,其它的一樣；2.培養兩棲動物體細胞比哺乳動物細胞難養,原因在于兩棲動物個體都較小,血漿制備較難；3.原代培養的話,兩棲動物細胞用兩棲動物的血漿,哺乳動物細胞用哺乳動物的血漿,（同物種個體上取下的血漿,最好自體上取下的）和其它營養物質
挑戰生物學以往觀點－哺乳動物細胞可將RNA序列寫入DNA
美國費城托馬斯杰斐遜大學的研究人員首次發現，哺乳動物細胞可以將RNA序列轉換回DNA，這在病毒中比真核細胞更常見。這一發現可能會挑戰生物學長期以來的觀點，并可能對生物學的眾多領域產生廣泛影響。相關研究發表在6月11日的《科學進展》雜志上。 細胞含有一種機制，它可以將DNA復制成一組新的DNA，
瑞士在哺乳動物細胞內構建出生物數字電路
忘掉智能手機吧，智能手臂不是更酷么？有朝一日，能夠進行簡單運算的人體細胞會被植入你的體內，作為生物計算機來為你診斷疾病、管理藥物或是搭建生物電子界面等。 瑞士聯邦理工學院的馬丁·富塞內格爾及其同事就朝這個夢想邁進了一大步。據《新科學家》網站6月6日報道，瑞士科研人
2.1.3－哺乳動物細胞胞質RNA的分離
下述方法是純化組織培養細胞胞質 RNA 的 簡便并行之冇效的方法 ，此方法出現在 RNA 分離的較早階段，主要步驟即離心去除細胞核試劑、試劑盒冰冷的磷酸鹽緩沖液NaClKClNa2HP04?7H20KH2PO4冰冷的裂解緩沖液： LTris-HClNaClMgCL2NkmidetP-40胎盤RNas
哺乳動物細胞實驗室的構建方案
一、實驗室設計細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，為10萬級潔凈
哺乳動物細胞實驗室的構建方案
一、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，為10萬
實用哺乳動物細胞培養手冊（下）
細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒 清洗 在組織細胞培養中，體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物，上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質，均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器 皿和重新使用的培養器皿都要嚴格徹底的清洗，且要根據器皿的組成材料不同，選擇不同 的清
2.1.2－哺乳動物細胞總RNA快速分離
利用 SDS 裂解細胞 ，并用酸性苯酚分級提取細胞總 RNA, 這是一種適合于處理 mRNA 含量相對較低、內源性 RNase 活性較髙的細胞的方法，該方法 RNA 損失極少，簡便易行 ，可同時處理多個樣品。對大多數細胞株來說，在一個直徑 90mm 培養皿中培養細胞 ，其 RNA 收率為 100?2
實用哺乳動物細胞培養手冊（中）
細胞培養環境 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響， 要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側，常規操作
實用哺乳動物細胞培養手冊（下）
細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒清洗在組織細胞培養中，體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物，上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質，均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器 皿和重新使用的培養器皿都要嚴格徹底的清洗，且要根據器皿的組成材料不同，選擇不同 的清洗方法。玻璃器皿的清
哺乳動物細胞體外剪接分析實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 剪接反應的典型做法是使用核提取物，即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組分，最常使用的是 HeLa 細胞的提取物。前體 mRNA 底物通常采用噬菌體聚合酶體外轉錄的方法來制備。
哺乳動物細胞體外剪接分析實驗
剪接反應的典型做法是使用核提取物，即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組分，最常使用的是 HeLa 細胞的提取物。前體 mRNA 底物通常采用噬菌體聚合酶體外轉錄的方法來制備。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理剪接反應的典型做法是使用核提取物，即 S10