紅細胞裂解液的基本介紹
紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或稱 ACK Lysis Buffer)是一種去除紅細胞最簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細胞,它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進一步用于原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。......閱讀全文
紅細胞裂解液的基本介紹
紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或稱 ACK Lysis Buffer)是一種去除紅細胞最簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細胞,它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細
紅細胞裂解液的作用原理
細胞裂解液一般都用的是含酶的,在血紅細胞表面上有紅細胞專屬的表面抗原,當裂解液中含可以攻擊特定紅細胞表面抗原的酶的時候 就只會造成紅細胞的變形,生物通道擴大,膨脹,裂解,或者引起紅細胞的變性.而不會攻擊其他細胞.另外紅細胞有自己的電負性,滲透脆性(通常是一些非酶細胞裂解液的突破點) ,懸浮穩定性,這
簡述紅細胞裂解液的作用原理
氯化銨是紅細胞裂解液的主要效應物質,氨根離子不能通過細胞膜,而其他離子可以通過,造成細胞內外的離子濃度差異,形成了滲透壓差,外部的水分會擴散至細胞內,使紅細胞膨脹,達到裂解的效果。
關于紅細胞裂解液的使用說明
一、組織細胞樣品: 1.新鮮組織經胰酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液,離心棄去上清液; 2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入3-5ml裂解液),輕輕吹打混勻; 3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液;
mRNA-在網織紅細胞裂解液中的翻譯
實驗材料 家兔胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 I 型磷酸肌酸激酶試劑、試劑盒 乙酰苯肼溶液 A 溶液 B 滅菌重蒸水 CaCl2 EGTA 氯高鐵血紅素儲存液 亞精胺 磷酸肌酸 氨基酸 DTT HEPES 水 KCl 乙酸鎂 [35S] 甲硫氨酸.儀器、耗材 電泳裝置干酪包布離心機實驗步驟 一、材料與設
mRNA-在網織紅細胞裂解液中的翻譯
? ? ? ? ? ? 實驗材料 家兔 胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 ? I 型磷酸肌酸激酶 試劑、試劑盒
紅細胞裂解液(RBC-Lysis-Buffer,10×)-操作步驟
、組織細胞樣本的常規操作1、制備細胞懸液: 新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理,通過適當方法制備成細胞懸液,離心棄上清。2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解1~2min。 3、離心,棄紅色上清。本步驟亦可在室溫下操作。4、如果發現紅細胞裂解不完全,可以重復上述
4.1-mRNA-在網織紅細胞裂解液中的翻譯
從哺乳動物細胞中提取的 mRNA 或通過克隆化 DNA 在體外轉錄產生的 mRNA 在無細胞提取液中能被翻譯而合成蛋白質,這些蛋白質可用于免疫沉淀試驗或進行生物學活性測定。實驗材料家兔胰核糖核酸酶小球菌核酸酶I 型磷酸肌酸激酶試劑、試劑盒乙酰苯肼溶液 A溶液 B滅菌重蒸水CaCl2EGTA氯高鐵血紅
紅細胞裂解液(RBC-Lysis-Buffer,10×)使用說明
紅細胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)簡介在生物科研領域,經常需要去除紅細胞。去除紅細胞的方法有多種,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer
急速裂解法去除紅細胞
器材和試劑:?所有直接接觸細胞的用品和試劑必須無菌。1.?標注體積刻度的試管(圓錐形底);2.?巴斯德吸管(短型和長型);3.?臺式離心機;4.?培養級純凈水;5.?2×Hanks平衡鹽溶液;6.?儲存培養基,含10%血清;實驗方法:1.?1000r/min離心原代細胞懸液5min,棄上清;2.?向
紅細胞裂解的實驗方法步驟
IntroductionPrior to using lymphoid tissue cell suspensions for flow cytometric analysis and/or for?in vitro?functional assays, it is recommended to r
細胞裂解液的制備
一、試劑準備1、新鮮配制冷的 RIPA 裂解緩沖液:? ?? ?150 mM NaCL? ?? ?1% NP-40 (去垢劑)? ??? ?? ?0.1% SDS (去垢劑)? ?? ?2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)? ?? ?2ug/ml Leupeptin (
網織紅細胞裂解物的概念
中文名稱網織紅細胞裂解物英文名稱reticulocyte lysate定 義用于測定信使核糖核酸(mRNA)活性的一種體外翻譯分析系統。通常由藥物致貧血而發育不完全的兔網織紅細胞制備,但須用RNA酶去除其中內源的mRNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
制備細胞裂解液
實驗流程:1. 收集胰蛋白酶消化的細胞并離心,用PBS清洗。2. 用100μl 裂解緩沖液冰浴溶解沉淀10min(每500000個細胞20μl裂解緩沖液)。3. 10000rpm,4°C離心10min,取上清轉移至新管。4. 用考馬斯亮藍法檢測蛋白質濃度。5. 用裂解緩沖液將溶液濃度調到5mg/ml
紅細胞裂解液法體外分離培養兔骨髓間充質干細胞
骨髓間充質干細胞是存在于骨髓腔內具有很強增殖 能力及多向分化潛能的一類成體干細胞,在一定條件下其不僅可以分化為同源于中胚層的間質細胞,還可以誘導分化為骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、上皮樣細胞、 心肌細胞、肝細胞等。近年來隨著組織工程技術的快速發展,骨髓間充質干細胞的體外分離、培養及其增殖特 性的相關研
關于紅細胞壽命的基本介紹
紅細胞壽命(red blood cell life span,RBCS):生理狀態下,紅細胞的生成和破壞呈動態平衡,健康成年人RBCS平均115(70~140)天。病理狀態下,無論何種機制介導的紅細胞破壞增多(即溶血),均可導致RBCS縮短,紅細胞破壞超過骨髓代償增生時,即導致貧血。
紅細胞凝集試驗的基本介紹
指紅細胞凝集的現象。有由病毒、細胞凝集素和抗體而引起的紅細胞凝集。 (1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)發現流感病毒能使雞的紅細胞發生凝集,其后又發現其它各種病毒也能引起同樣的紅細胞凝集反應。即紅細胞表面存在著對各種病毒的受體,病毒與受體結合,以紅細胞為橋梁的結果而引起凝
細胞/組織裂解液的制備
溶液準備 2×樣品緩沖液:130mM Tris-HCl ( pH8.0 ) , 20% ( v/v ) 甘油 , 4.6% ( w/v ) SDS , 0.02% 溴酚藍 , 2%DTT PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4 ,50
細胞裂解液怎么配制
裂解細胞的話:新鮮配制冷的 RIPA 裂解緩沖液:先配150 mM NaCL+ 1% NP-40 (去垢劑) + 0.1% SDS (去垢劑)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)或1 mM PMSF
什么是蛋白裂解液
RIPA裂解液。RIPA裂解液(英語:Radioimmunoprecipitation assay buffer,全稱放射免疫沉淀法緩沖液)是一種用于裂解細胞或組織的裂解緩沖液,常用于放射性免疫沉淀分析(RIPA)。此緩沖液的變性性能比NP-40裂解液或曲拉通X-100裂解緩沖液更強,因為它包含離子
裂解酶的基本信息
裂解酶的一種,狹義的指催化裂解1.6-二磷酸-D-果糖生成3-磷酸-D-甘油醛與α-二羥丙酮磷酸反應的酶(同時在糖異生中也可催化這個反應的逆反應),即指1.6-二磷酸-D-果糖醛縮酶(Ec 4.1.2.13)。(廣義的指催化同形式反應的酶,例如亦有將鼠李糖磷酸醛縮酶等統稱為醛縮酶)。
關于紅細胞環狀體的基本介紹
在紅細胞中出現的一種紫紅色呈圓形或“8”字形紅細線狀環。有人認為該環是核膜的殘留物,現認為可能是紡錘體的殘余物或者是由于胞漿中的脂蛋白變性所致,常與Howell-Jolly小體同時出現。見于溶血性貧血、惡性貧血、巨幼細胞性貧血、脾切除后或鉛中毒等。
關于紅細胞比容檢查的基本介紹
指紅細胞占全血容積的百分比。它反映紅細胞和血漿的比例。 血細胞自動分析儀: 男 性:0.40-0.50 (40-50vol%)。 女 性:0.37-0.48 (37-48vol%)。 新生兒:0.49-0.60 (49-60vol%)。
細胞培養為什么要先裂解紅細胞
紅細胞裂解液一、基本介紹紅細胞裂解液是一種去除紅細胞最簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細胞,它 既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除 方法,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細 胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解
核酸樣品與裂解液的比例
核酸樣品與裂解液的比例?????? 核酸樣品與裂解液的比例開始樣品用多大,并沒有具體的講法。假如不是樣品量有限,則以能抽提出滿意數次成功實驗所需的核酸量,作為表決樣品開始量的基礎,會比較合理的。?恒溫培養箱????? 不要由于?1ml?裂解液可以抽提100mg?樣品,就一定運用100mg?樣品。裂解
細胞裂解液作為對照的原因
WCL的全稱是whole cell lysate,中文就是全細胞裂解液對吧?如果是這樣的話,這個部分的目的就是研究細胞里面你想要研究的蛋白表達情況.IP的就是你用抗體pull down以后得到的目的蛋白.我們做co-IP研究A和B蛋白相互作用的時候,一般會在細胞里面轉染質粒,分別表達A和B蛋白.等蛋
細胞裂解液各成分的作用
細胞裂解液各成分的作用:1、第一種50mmol/L Tris-HCl是緩沖液,保證細胞裂解時PH值也能穩定,Tris是一種有機堿。2、第二種1.0 mmol/L EDTA是一種金屬螯合劑。3、第三種150 mmol/L NaCl是等滲體系電解質,用于協調細胞膜內外離子平衡。4、第四種0.1% SDS
RNA提取裂解液有哪些
CTAB ,異硫氰酸胍
常見細胞裂解液及其組分
在許多細胞內蛋白表達、純化及蛋白-蛋白互作等免疫實驗(如WB、IP、Co-IP、ChIP)中,細胞裂解是關鍵一步。 圖片源自于網絡 基本介紹 ? 根據不同細胞類型、蛋白定位及下游應用,需要不同的細胞裂解液進行細
巨幼紅細胞性貧血的基本介紹
巨幼紅細胞性貧血簡稱巨幼貧,因缺乏維生素B12或(和)葉酸所致。孕前或孕中缺乏維生素B12或者葉酸可能會患上一種名為巨幼紅細胞性貧血的疾病。這種貧血的特點是骨髓里的幼稚紅細胞量多,紅細胞核發育不良,成為特殊的巨幼紅細胞。這兩種營養素都是在紅細胞的合成階段發揮巨大作用的物質。正常人缺乏葉酸15-1